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1.
Ribozyme基因对人肿瘤细胞株MCF—7/Adr多药抗药性的靶向逆转   总被引:17,自引:0,他引:17  
设计合成能切割人mdr-1mRNA的Ribozyme基因并构建成真核细胞表达克隆(pHβApr-1new/5mR3),以靶向切割耐药癌细胞株(MCF-7/Adr)的mdr-1mRNA,抑制P-糖蛋白的表达,逆转多药抗药性。方法将含Ribozyme基因的真核细胞表达克隆转染MCF-7/Adr细胞,采用斑点杂交和Northern杂交技术测得Ribozyme能在细胞中稳定表达,并使细胞中mdr-1mRNA降解83.5%,P-糖蛋白表达明显下降(ABC法)。结果Ribozyme基因转染的MCF-7/Adr细胞耐药性下降至敏感细胞的6倍,而无Ribozyme基因转染的MCF-7/Adr耐药性是敏感细胞的1000倍。结论这种基因调控技术介入可能将为肿瘤耐药的治疗开辟一个新领域。  相似文献
2.
Huang S  Kong B  Ma Y  Jiang S 《中华医学杂志》2002,82(13):911-914
目的:探讨三氧化二砷(As2O3)对人卵巢癌耐药细胞系3AO/cDDP细胞生长的影响及其机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法,检测不同浓度As2O3作用后,3AO/cDDP细胞的生长抑制率;采用流式细胞技术检测细胞凋亡率,细胞周期变化,以及Fas、FasL基因表达的变化。所有结果均与人卵巢癌细胞系3AO细胞相比较;采用细胞骨架染色法观察3AO/cDDP细胞凋亡细胞形态变化,通过吖啶橙染色,荧光显微镜观察As2O3作用后3AO细胞的形态变化。结果:As2O3能明显抑制3AO/cDDP细胞的增殖,抑制作用呈时间和剂量依赖性(P<0.05);在定一浓度范围内,3AO/cDDP细胞凋亡率与As2O3的浓度和作用时间呈依赖关系,诱导凋亡的最适浓度是3μmol/L;As2O3低浓度时,3AO/cDDP细胞周期S期通过受阻,高浓度时诱导S期细胞凋亡;As2O3作用后,两种细胞系Fas基因的表达均呈升调节,FasL基因的表达无变化;与3AO细胞相比,差异无显著意义(P>0.05);As2O3作用后3AO及3AO/cDDP形成典型的凋亡小体。结论:As2O3通过Fas/FasL系统,诱导S期细胞凋亡,有效地抑制人卵巢癌耐药细胞系细胞的生长。  相似文献
3.
胃癌多药耐药基因的表达及其意义   总被引:9,自引:1,他引:8  
黄爱民  刘景丰 《医学争鸣》2002,23(21):1952-1954
目的:探讨5种多药耐药(MDR)基因在胃癌组织中的表达,建立MDR的基因诊断标准。方法:用逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)及流式细胞术检测胃癌组织中5种MDR基因的mRNA和蛋白质的表达,用四氯唑蓝快速比色法(MTT)检测抗癌药物对胃癌原代细胞的IC50值。结果:胃癌组织mdr1,MRP,LRP和GSTp1mRNA表过增加,TopoⅡαmRNA表达最减少,5种MDR基因mRNA表达量之间无相关性;胃癌耐药涉及mdr1,MRP,LRP,GSTp1和TopoⅡα基因,mdr1mRNA≥0.4,MRP mRNA≥0.5,LRP mRNA≥0.9,GSTp1 mRNA≥0.8和TopoⅡmRNA≤0.3为耐药联合诊断标准,符合率为98.6%,结论:胃癌组织中存在5种MDR基因,分别介导不同的多药耐药现象,多重MDR是胃癌耐药的主要形成,用RT-PCR方法联合检测5种MDR基因mRNA表灰在胃癌化疗敏感性预测中具有必要性和可行性。  相似文献
4.
乳腺癌组织中耐药相关基因表达的研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
【目的】探讨乳腺癌组织中胎盘型谷胱甘肽转移酶(GST-π)、多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药蛋白(LRP)及P-糖蛋白(P-gp)4种耐药相关基因的表达情况,分析它们之间及它们与雌激素(ER)、孕激素(PR)、原癌基因C-erbB2、P53蛋白、肿瘤转移之间的相关性。【方法】收集了103例临床病理确诊为乳腺癌的癌组织标本,患者术前均未经过化疗。采用免疫组织化学方法检测GST-π、MRP、LRP及P-gP的表达情况,与同时检测的ER、PR、c-erhB2、P53等与乳腺癌预后有关的因素进行相关性分析,并将病例按有无淋巴结转移分成2组,分别对2组的GST-π、MRP、LRP、P-gP的表达进行卡方检验。【结果】4种耐药相关基因在乳腺癌组织中均有表达,其阳性率分别为GST-π56.3%、MRP16.7%、LRP72.8%、P-gp57.1%,均以低量表达为主(阳性细胞数小于25%),有、无淋巴结转移2组之间4种耐药相关基因的表达差异均无显著性。仅GST-π表达与C-erbB2、LRP之间及LRP表达与C-erbB2之间存在正相关关系,相关系数分别为r=0.323,r=0.244,r=0.231,其他指标相互间无相关性。【结论】乳腺癌组织的原发多药耐药主要与GST-π、LRP及P-gp的表达有关,化疗前这几种耐药相关基因表达的检测可为化疗药物的选择及预后判断提供参考依据。  相似文献
5.
米非司酮对卵巢癌细胞的增敏作用及其机制的研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的研究米非司酮对卵巢癌耐药细胞系COC1/DDP的增敏作用及其作用机制。方法用卵巢癌耐药细胞系COC1/DDP和敏感细胞系COC1为实验对象,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测米非司酮对COC1/DDP细胞的增敏作用,流式细胞仪检测米非司酮对凋亡蛋白Bcl-2、Bax表达的影响。结果1.25μmol/L的米非司酮能够增强COC1/DDP对顺铂的敏感性,并使Bcl-2的阳性率从(23.80±0.44)%下降至(19.40±0.69)%(P=0.000),Bax从(12.75±0.25)%上升至(25.60±0.88)%(P=0.000),其逆转作用有剂量依赖性。结论米非司酮逆转卵巢癌COC1/DDP细胞对顺铂的耐药可能与下调Bcl-2的表达、上调Bax的表达、降低Bcl-2/Bax的比率有关。  相似文献
6.
野生型survivin表达的上调促进胃癌对多西他赛的耐药性   总被引:4,自引:2,他引:2  
目的研究胃癌组织survivin基因各转录变异体表达情况及其与胃癌化疗药物抗药性的关系。方法采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR)技术,对39例胃恶性肿瘤患者肿瘤标本中的survivin转录变异体进行定量检测。采用组织培养肿瘤药敏实验(HDRA)技术,检测胃癌组织对多种化疗药物的敏感性,并且分析该敏感性与survivin转录变异体表达的关系。结果在39例胃癌组织标本中,survivin的表达率100%(39/39),survivin2B的表达率795%(31/39),survivin△Ex3的表达率667%(26/39)。胃癌标本对顺铂、丝裂霉素、5氟尿嘧啶、多西他赛(TXT,商品名泰索帝)和双氟脱氧胞苷在体外实验中的敏感率分别是368%(14/38)、312%(10/32)、231%(9/39)、205%(8/39)和125%(4/32)。泰索帝耐药组中患者野生型survivin的表达水平显著高于泰索帝敏感组(P=0021)。结论研究结果提示野生型survivin的表达促进了胃癌患者对泰索帝的抗药性。  相似文献
7.
野生型p53基因提高肝癌细胞化疗药物敏感性的实验研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的:研究野生型p53(wtp53)提高肝癌细胞化疗药物敏感性的作用.方法:采用p53基因型不同的三种人肝癌细胞株HepG2 (部分wtp53)、Hep3B(p53-/-)和 PLC/PRF/5(mtp53),观察携wtp53基因的重组腺病毒联合化疗药物争光霉素(bleomycin,bleo)、丝裂霉素(mitomycin, mito)或甲氨蝶呤(methotrexate, meth)对肝癌细胞的杀伤效应.结果:HepG2、Hep3B和 PLC/PRF/5分别耐受600 μg/ml bleo、100 μg/ml mito或1 000 μg/ml meth,但转入wtp53基因后再使用上述质量浓度范围的化疗药物,则肝癌细胞出现了明显的被杀伤效应.结论:wtp53基因能提高肝癌细胞对化疗药物的敏感性,wtp53基因联合化疗药物治疗可望开辟克服肝癌耐药的新途径.  相似文献
8.
原发性肾癌组织中MDR1和MRP基因的表达   总被引:3,自引:0,他引:3  
①目的 研究肾癌组织中多药耐药 (MDR1)基因和多药耐药相关蛋白 (MRP)基因的mRNA表达及其临床意义。②方法 应用定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR) ,检测 2 0例原发性肾癌组织、10例正常人肾脏组织新鲜标本MDR1和MRP基因的mRNA表达水平。③结果 正常肾脏组织和肾癌组织均有MDR1和MRP基因表达 ,肾癌组织MDR1基因表达水平低于正常肾脏组织 ,MRP基因表达水平高于正常肾脏组织 ,差异有显著性 (t=2 .2 93,2 .96 8,P <0 .0 5 ,0 .0 1)。MDR1和MRP基因的表达与肾癌的病理类型、病理分期和组织学分级无关 ,与肾癌病人的无进展生存期无关 ,正常肾脏组织的MDR1基因和MRP基因的表达呈高度正相关关系 (r =0 .932 ,P<0 .0 1) ;肾癌组织MDR1基因和MRP基因的表达无明显相关关系。④结论 MDR1基因和MRP基因复合表达与肾癌固有的多药耐药现象有关  相似文献
9.
目的 :检测肺耐药蛋白 (LRP)和多药耐药相关蛋白 (MRP)在 6 0例大肠癌组织中的表达 ,探讨其与组织学类型、浸润深度、淋巴结转移的关系。方法 :应用免疫组化S -P法 ,检测 6 0例大肠癌组织 ,10例正常大肠粘膜中MRP和LRP的表达情况。结果 :MRP、LRP在 6 0例大肠癌组织中的阳性表达率分别为 6 8.3%和 70 % ,均高于正常大肠粘膜中阳性表达率 (P <0 .0 5 ) ,在各组织学类型之间的表达无明显差异 (P >0 .0 5 ) ,不同浸润深度及是否有淋巴结转移间表达率无差异 (P >0 .0 5 )。结论 :MRP、LRP在大肠癌中均呈高表达 ,在大肠癌原发性多药耐药中起重要作用 ,这可能是大肠癌对化疗不敏感的原因之一。  相似文献
10.
应用mRNA差异显示技术筛选卵巢癌耐药相关基因   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的 筛选卵巢癌泰素耐药相关基因。方法 采用间歇诱导法建立了卵巢癌泰素耐药细胞株Skov3/Taxl-25;采用mRNA DD比较Skov3/Taxol-25对泰素耐药增加44倍,同时对顺铂也产生了耐药。比较Skov3和Skov3/Taxol-25的mRNA,获得22个差异条带。对其中5个差异条带进行了DNA序列测定,有3个与已知的基因高度同源,分别为tPA、Kiaa0372和LDLC。2个为未知  相似文献
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