蛤蚧皮质加厚区的形态解剖及三维重建

目的明确蛤蚧皮质加厚区的位置、核团的形态及与比邻结构的关系,为研究皮质加厚区的功能提供依据。方法对蛤蚧脑行冷冻冠状连续切片(厚60μm),Nissl染色,对每张含有皮质加厚区的切片进行摄片和测量,选取其中1套用于三维重建,重组软件为3D MAX。结果1.皮质加厚区位于端脑吻侧端,前背侧室嵴外侧,外侧皮层内侧和背侧皮层腹侧。皮质加厚区的吻尾长(912.67±110.96)μm(n=10),体积(0.1430±0.0414)μm3(n=10)。2.皮质加厚区从吻侧端到尾侧端大约可分为前段、中段、后段和末段。后段的背腹径最长,可分为背侧部和腹侧部,两部分的细胞分界清晰。结论皮质加厚区为一吻尾径长于内外径的狭长片状结构,背侧缘较腹侧缘平滑;加厚区的尾侧端比吻侧端大,且尾端的后段分离成背侧和腹侧两个细胞群。     

Expression of sex steroid hormone-related genes in the embryo of the leopard gecko

Sex steroid hormones are known to play a central role in vertebrate sex determination and differentiation. However, the tissues in which they are produced or received during development, especially around the period of sex determination of the gonads, have rarely been investigated. In this study, we identified the cDNA sequence, including the full-length of the coding region of cholesterol side-chain cleavage enzyme (P450scc), from the leopard gecko; a lizard with temperature-dependent sex determination. Embryonic expression analysis of two steroidogenic enzymes, P450scc and P450 aromatase (P450arom), and four sex steroid hormone receptors, androgen receptor, estrogen receptor alpha and beta, and progesterone receptor, was subsequently conducted. mRNA expression of both steroidogenic enzymes was observed in the brain and gonads prior to the temperature-sensitive period of sex determination. The mRNAs of the four sex steroid hormone receptors were also detected in the brain and gonads at all stages examined. These results suggest the existence of a gonad-independent sex steroid hormone signaling system in the developing leopard gecko brain.     

多疣壁虎断尾再生中巨噬细胞的组织定位

目的:研究巨噬细胞与多疣壁虎断尾再生的关系.方法:多疣壁虎120只,断尾后随机分为野生型组(正常组)、生理盐水组(免疫正常组)、生理盐水+氢化可的松组(免疫抑制组)和生理盐水+脂多糖组(免疫增强组).免疫抑制组腹腔注射氢化可的松80μg·g-1·d-1;免疫增强组注射脂多糖10 μg·g-1·d-1;采用免疫组织化学检测巨噬细胞组织定位.结果:在壁虎断尾再生过程中,横断创面巨噬细胞的浸润定位层次是改变的,断尾12 h后迁移到尾巴断截面附近的巨噬细胞数量达到峰值.免疫正常组、增强组在断尾后24 h与免疫抑制组相比较,断面附近巨噬细胞的数量显著增加.结论:巨噬细胞有可能参与多疣壁虎断尾再生过程.     

蛤蚧生态与生物学特性的研究

笔者通过对蛤蚧的野外调查和人工养殖观察，基本掌握了蛤蚧的地理分布、栖息环境，活动规律以及蛤蚧的繁殖习性和食性，为人工养殖提供了科学依据。     

蛤蚧中污染对二氯苯的气相色谱分析

有关蛤蚧中污染对二氯苯的分析未曾见报道。作者等采用气相色谱法──外标法定量测定蛤蚧中污染的对二氯苯含量。实验结果表明：方法的线性范围为２７μｇ／ｍｌ～１３８μｇ／ｍｌ，相关系数为０．９９９８，平均回收率为９８．９８％，日内、日间ＲＳＤ分别为１．５％、４．６％。本方法简便、灵敏、快速。经过ＧＣ分析表明：污染有对二氯苯的蛤蚧采用冷风摊及日光摊两种方法不同时间的处理后，对二氯苯的含量有不同程度的减少。     

蛤蚧乙醇提取液影响去势大鼠胫骨TGF-β1表达的研究

目的：研究在灌服蛤蚧乙醇提取液去势大鼠胫骨中TGF-β1的表达,探讨蛤蚧乙醇提取液防治绝经后骨质疏松症的机理。方法：采用12月龄SD雌性大鼠60只,随机分为对照组、去势组和实验组。去势组和实验组均切除双侧卵巢,实验组给予蛤蚧乙醇提取液灌胃处理;对照组给予假手术处理。3组大鼠分别于术后4、12周,随机各取10只,测定骨密度（BMD）后处死,取右侧胫骨,脱钙后包埋切片,HE染色,计数破骨样细胞;常规SABC法进行免疫组化染色,图像分析灰度值。结果：实验组的全身BMD明显高于去势组,但仍然低于对照组;实验组的破骨样细胞计数与对照组相似,与去势组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。TGF-β1在实验组及对照组的成骨细胞中呈阳性染色,部分骨基质中也有阳性表达,去势组呈阴性表达。结论：蛤蚧乙醇提取液可能诱导骨微环境中TGF-β1表达增加,进而抑制破骨样细胞的生成,有效地预防绝经后骨质疏松的发生。     

蛤蚧肽对小鼠免疫功能的调节作用

目的:观察蛤蚧肽对免疫功能低下小鼠免疫功能的影响.方法:动物分组设正常对照组、模型阴性对照组、左旋咪唑(25mg/kg)阳性对照组、蛤蚧肽三剂量(400,200,100 mg/kg)组,腹腔注射环磷酰胺(CTX)造成小鼠免疫功能低下模型,给药7d后,应用MTS法测定小鼠脾淋巴细胞增殖反应、自然杀伤细胞(NK)活性、腹腔...     

壁虎对肝细胞癌干细胞特性的影响及其机制

研究壁虎对肝癌干细胞特性的影响,并探讨其分子机制。采用MTT法检测肝癌细胞增殖;肿瘤球培养和流式细胞术检测肝癌干性;Western blot检测Wnt通路及干性相关蛋白的表达;免疫共沉淀检测相互作用蛋白;皮下移植瘤模型检测肝癌细胞的干性。结果显示,壁虎对Huh7细胞的IC_(50)为(0.750±0.112)g·mL~(-1),其对Hep3B细胞的IC_(50)为(0.454±0.039)g·mL~(-1)。壁虎处理的肝癌细胞培养形成的肿瘤球的数目和大小均缩小(P0.05),CD44,CD133阳性的肝癌细胞比例减少(P0.05)。守宫处理肝癌细胞后,β-catenin,CD44,c-Myc,CCND1,Sox2,Oct4,Nanog,ABCG2等表达均下调。免疫共沉淀结果显示,壁虎能抑制LRP6与Frizzled6的相互作用。表明,壁虎能够抑制肝癌细胞的增殖、肿瘤球的形成及肿瘤干细胞的比例,其通过靶向LRP6,阻止LRP6与Frizzled6复合物的形成而抑制Wnt信号通路。     

蛤蚧成分分析研究

对中药蛤蚧进行了分析研究,从中检出十四种氨基酸和十八种微量元素,并分得一分子量为7.6×10⁴的多肽成分,以及胆固醇、正交硫、硫酸钙等七个结晶成分.