重组大鼠白介素3对培养的大鼠正常骨髓细胞及其白血病细胞的影响

将携带大鼠白介素３（ｒＩＬ－３）全基因的ｐＩＬＲ１质粒转染猴肾ＣＯＳ－１细胞，表达制备了重组ｒＩＬ－３（ｒｒＩＬ－３）．用半固体培养系统和液体培养测定了ｒｒｌＬ－３对大鼠正常骨髓细胞及其髓系白血病细胞系ＬＴ１２的影响。研究结果表明，所表达的ｒｒＩＬ－３剂量依赖地明显促进ＢＮ大鼠正常骨髓造血祖细胞的增殖。并进一步观察到无论在半固体培养系统或液体培养中，ｒｒＩＬ－３具有抑制白血病ＬＴ１２细胞生长的作用，同样呈量一效相关。     

全骨髓贴壁法培养兔骨髓间充质干细胞体外定向成骨诱导分化及鉴定

背景：流式细胞仪分离法和免疫磁珠分离法对细胞活性影响较大,密度梯度离心法虽然能够获得纯度高的单核细胞,但由于多次离心可造成细胞的大量流失且对细胞活性有一定的影响使其应用值得商榷。目的：采用全骨髓贴壁法分离兔骨髓间充质干细胞进行成骨诱导分化及鉴定。方法：采用全骨髓贴壁法体外分离培养兔骨髓间充质干细胞,倒置显微镜下观察细胞形态学特征。在成骨诱导剂作用下,通过碱性磷酸酶染色试剂盒行碱性磷酸酶染色,I型胶原免疫细胞化学染色,VonKossa法及茜素红进行矿化结节染色以及电镜下检测兔骨髓间充质干细胞成骨诱导后的形态结构。结果与结论：经诱导后细胞出现与成骨细胞相似的形态学特征,碱性磷酸酶染色阳性,I型胶原免疫细胞化学染色,Von-Kossa法及茜素红矿化结节染色阳性。表明经成骨诱导剂诱导后全骨髓贴壁法体外分离纯化培养的兔骨髓间充质干细胞能向成骨细胞方向分化增殖。     

骨髓细胞与实验性自身免疫性脑脊髓炎诱导敏感性的关系(英文)

目的研究自身免疫病的发生与造血干细胞的关系。方法建立实验性自身免疫性脑脊髓炎动物（EAE）模型，研究不同大鼠品系对EAE诱导的敏感性，然后将EAE抵抗大鼠（Wistar）的去T细胞骨髓移植给EAE敏感大鼠（Lewis）或将Lewis大鼠的去T细胞骨髓移植给Wistar大鼠，观察受体鼠对EAE诱导的敏感性的变化。结果Lewis大鼠对EAE诱导高度敏感，而Wistar大鼠对EAE诱导具有抵抗性；当将Lewis大鼠的去T细胞骨髓移植给Wistar大鼠后，Wistar大鼠对EAE诱导变得高度敏感。与此对应，当Wistar大鼠的去T细胞BMCs被输入Lewis大鼠后，后者变得对EAE诱导具有抵抗性。结论不同大鼠品系对EAE诱导的敏感性与BMCS高度相关。     

免疫磁珠法纯化小鼠CD34+造血干细胞

目的探讨免疫磁珠法(MiniMACS)能否用于纯化小鼠骨髓CD34+造血干细胞.方法应用免疫磁珠纯化小鼠骨髓CD34+细胞,流式细胞仪(FACS)评估纯化效率,检测纯化后的细胞活力.结果纯化后CD34+细胞纯度81.5%(范围76.80%～85.38%),回收率47.54%(范围40.50%～54.31%),纯化前后细胞活力不受影响(P=0.169).结论应用MiniMACS纯化小鼠骨髓可获得高纯度CD34+细胞,并不影响细胞活力.     

静态心肌灌注-代谢显像评价心肌梗死后经冠状动脉介入骨髓干细胞移植治疗的价值

目的:应用心肌灌注-代谢显像评价心肌梗死(AMI)后经冠状动脉介入移植治疗的疗效。方法:应用单光子发射型断层扫描(SPECT)静态心肌灌注代谢显像对比观察经冠状动脉成形术(PCI)+支架(stent)+心肌骨髓干细胞移植(MBMC)前后的心肌梗死区心肌血流灌注和代谢变化。结果:介入移植治疗前灌注缺损106节段,代谢缺损80节段;介入治疗后灌注缺损84节段,代谢缺损66节段,治疗前后灌注代谢差异无统计学意义(χ2=0.033,P>0.05);介入移植治疗前后人均灌注缺损分别是(3.13±1.14)节段和(2.54±1.30)节段,2组差异有统计学意义(P=0.0005);介入移植治疗前后人均代谢缺损分别是(2.42±1.28)节段和(2±1.28)节段,2组差异有统计学意义(P=0.004)。介入移植治疗后定量分析靶心图灌注显像的总记分(SPS)、代谢显像的总记分(SMS)以及严重度记分(SSS)较治疗前均有下降,但无统计学意义(P=0.184,P=0.608,P=0.166)。结论:静态心肌灌注-代谢显像是观察经冠状动脉介入移植治疗AMI疗效的一种方法。     

照射骨髓基质细胞对辐射损伤小鼠造血重建的影响

采用辐照方法将骨髓基质细胞(BMSC)预先强化,再经体外培养、富集后与骨髓细胞(BMC)一起经尾静脉输注给全身致死剂量照射的小鼠。采用股骨BMC计数,CFU-GM和CFU-S测定及股骨切片组织学观察等方法研究了这种细胞对辐射损伤小鼠造血重建的影响。结果表明输入的BMSC对辐射损伤小鼠造血重建具有促进作用。进一步研究表明,这种细胞对辐射损伤小鼠造血重建的促进作用不是由于其中含有造血干细胞(HSC)所致,而是通过其经血循环迁徒至造血组织后对同时输入BMC中的HSC增殖和向粒系分化发挥支持和刺激作用来实现的。     

Tissue engineering of bone: search for a better scaffold

BACKGROUND: Large bone defects still represent a major problem in orthopedics. Traditional bone-repair treatments can be divided into two groups: the bone transport (Ilizarov technology) and the graft transplant (autologous or allogeneic bone grafts). Thus far, none of these strategies have proven to be always resolving. As an alternative, a tissue engineering approach has been proposed where osteogenic cells, bioceramic scaffolds, growth factors and physical forces concur to the bone defect repair. Different sources of osteoprogenitor cells have been suggested, bone marrow stromal cells (BMSC) being in most cases the first choice. METHODS AND RESULTS: In association with mineral tridimensional scaffolds, BMSC form a primary bone tissue which is highly vascularized and colonized by host hemopoietic marrow. The chemical composition of the scaffold is crucial for the osteoconductive properties and the resorbability of the material. In addition, scaffolds should have an internal structure permissive for vascular invasion. Porous bioceramics [hydroxyapatite (HA) and tricalcium phosphate] are osteoconductive and are particularly advantageous for bone tissue engineering application as they induce neither an immune nor an inflammatory response in the implanted host. Earlier, we first reported a cell-based tissue engineering procedure to treat three patients with long bone segmental defects. Cells were loaded on a 100% HA porous ceramic. These scaffolds proved to have good osteoconductive properties resulting in a good functional recovery, but they have not been resorbed after more than 5 years from the implant. In addition, due to the high density of the mineral and the relatively low porosity (50-60%), it was very difficult to monitor the patient recovery during the post-surgery time using X-rays. CONCLUSIONS: We report here some pre-clinical testing of new scaffolds. To compare these second generation ceramic scaffolds more suitable for a tissue engineering approach we had to first establish animal models and analysis procedures including the use of X-ray-computed microtomography associated with X-rays synchroton radiation.     

抗癫痫药——苯妥英钠诱发小鼠骨髓细胞染色体畸变的研究

对苯妥英钠诱发小鼠骨髓细胞畸变的问题进行了研究。结果表明:苯妥英钠对小鼠骨髓细胞染色体的损伤程度,随荆量的增加而增大,各剂量组与对照组比较均有显著性差异。     

三种方法构建去细胞肌肉生物支架：组织学和生物力学比较

背景：目前构建去细胞肌肉生物支架的方法有化学方法、物理冻融法和冷冻法。目的：比较化学方法、物理冻融法和改良化学方法构建去细胞肌肉生物支架组织学和生物力学差异。方法：将6只SD大鼠竖脊肌截成36段,随机分3组（n=12）,分别采用化学方法、物理冻融方法、改良化学方法构建去细胞肌肉生物支架。将荧光标记的骨髓间充质干细胞接种于3组支架上进行组织学与生物力学检测。结果与结论：苏木精-伊红染色显示3组支架均可见平行排列结构,化学方法组连续性较物理冻融组、改良化学组差;Masson染色显示3组支架结构主要为胶原纤维,物理冻融组残留一些肌纤维,间隙不均。物理冻融组第7天荧光标记种子细胞计数明显少于化学方法组、改良化学组（P〈0.01）,第14天物理冻融组少于改良化学组（P〈0.05）;扫描电镜可见细胞贴附各组支架生长、大量存活;物理冻融组最大载荷高于化学方法组（P〈0.05）,与改良化学组无明显差别,各组弹性模量无差异;物理冻融组孔隙率低于化学方法组、改良化学组（P〈0.05）。表明改良化学方法可以兼顾支架的组织学和生物力学特性,彻底清除肌细胞,较多保留更完整的细胞外基质。     

持久稳定的大鼠→小鼠造血嵌合体模型的建立

目的：建立持久稳定的造血嵌合体模型．方法：将预处理后的SD大鼠经尾静脉注射BALB／c小鼠骨髓细胞,诱导形成特异性耐受的嵌合体SD大鼠．30d岳,再将此嵌合体大鼠的骨髓反向移植给致死性照射后的BALB／c小鼠,监测小鼠的存活率,移植后30d做皮片移植和混合淋巴细胞培养,观察小鼠嵌合率的变化．结果：嵌合体模型小鼠仅有轻度移植物抗宿主病的表现,生存期明显延长,移植后嵌合率较稳定,移植皮片存活期延长,与对照组相比有显著性差异．结论：通过输入嵌合体骨髓的方法可建立稳定持久的大鼠→小鼠嵌合体模型．