谷胱甘肽-S-转移酶-π和端粒酶在食管癌及癌前病变组织中的表达

谷胱甘肽-S-转移酶(GST)是一组有多种生理功能的同功酶，在保护细胞免受细胞毒性物质和致癌剂损害方面起重要作用。研究表明，端粒酶的激活与细胞永生化、癌变关系极为密切。我们采用免疫组化和TRAP-银染法检测GST-π和端粒酶在食管癌及癌前病变组织中的表达。     

银染法观察铜绿假单胞菌生物被膜变化初探

目的探讨银染法观察细菌生物被膜在药物作用前后变化的可靠性。方法建立细菌生物被膜,分别用银染法和扫描电镜进行观察生物被膜的变化。结果银染后普通光学显微镜观察和扫描电镜观察对生物被膜变化的观察结果完全相符。结论用银染法观察细菌生物膜的变化便捷、可靠。     

Telomerase activity analysis of esophageal carcinoma using microdissection-TR AP assay

Objectives To investigate telomerase activity in esophageal squamous cell carcinoma (SCC) and its preneoplasia lesions, and to study the relationships between telomerase activity and cancer differentiation, cancer invasiveness, and lymphatic metastasis.Methods Telomerase activity in esophageal SCC tissues, adjacent dysplasia tissues and normal epithelia from the surgical edge were assessed by microdissection-TRAP elomeric repeat amplification protocol）-silver staining assay.Results Telomerase activity was detected in 37 (82.2%) of 45 esophageal tumors, 23 (79.3%) of 29 dysplasias, and 2 (5%) of 40 normal epithelia.There was a significant difference in activity between dysplasia and normal epithelium, as well as between tumor and normal epithelium.Twenty-six (92.9%) of 28 tumors with lymphatic metastasis had detectable telomerase activity compared to 11 (64.7%) of 17 non-lymphatic metastasis tumors.These relationships were statistically significant (P<0.05), but the one between telomerase activity and tumor grade was not.Conclusion Telomerase activity was high both in esophageal SCC and their preneoplasia lesions.The telomerase activity in SCC tissue was related to lymphatic metastasis, but not to cancer differentiation.     

试剂盒配合琼脂糖EB染色法和PAGE银染法分析线粒体DNA A1555G突变的比较研究

目的 通过比较试剂盒配合琼脂糖EB染色法和PAGE银染法分析线粒体DNA A1555G突变的不同特点,探索应用标准试剂盒和PAGE银染方法检测线粒体DNA A1555G突变的快速筛查和诊断方法.方法 采用线粒体DNA A1555G突变诊断试剂盒配合PAGE胶电泳银染法检测线粒体DNA 1555位点正常者229例,A＞G突变阳性者17例,验证此试剂盒配合PAGE银染法检测的有效性和准确性.结果 线粒体DNA A1555G突变诊断试剂盒配合PAGE胶电泳银染法检测结果与酶切EB染色和测序结果完全吻合.结论 线粒体DNA A1555G突变诊断试剂盒配合PAGE胶电泳银染法和试剂盒配合EB检测法较前者更为灵敏和清晰,在分析线粒体DNA A1555G突变方面具有简单、价廉、结果直观的特点,适合在中国用于进行此突变的大规模筛查或预防性检查.     

宫颈癌与CIN中端粒酶活性及增殖细胞核抗原的表达

目的 探讨宫颈癌、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)中端粒酶及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.方法 采用TRAP-银染法检测宫颈癌、CIN及正常宫颈的端粒酶活性,并用S-P法测定相应标本的增殖细胞核抗原水平.结果 宫颈癌、CIN及正常宫颈中端粒酶阳性表达率分别为86.67%、35.71%和0.00%:PCNA标记指数分别为66.73±12.41、37.28±11.25和6.97±4.05,各组比较差异有显著性(P<0.01,P<0.05),并且端粒酶阳性组PCNA表达级别高于端粒酶阴性组,差异有显著性(P<0.05).结论 端粒酶阳性表达与宫颈癌的发生有关;PCNA高表达与端粒酶激活有关.     

白血病细胞增殖动力学两项指标的对比研究

采用３Ｈ—ＴｄＲ掺入法研究细胞增殖动力学历史悠久，实验结果可靠。用核仁组成区银染法（Ａｇ－ＮＯＲ银染法）研究细胞增殖情况也已开展，两种方法是否有可比性的研究报告不多，现将我科研究的初步结果报告如下。１材料和方法１．ｌ３Ｈ－ＴｄＲ掺入法　取骨髓ｌｍｌ或外周血２ｍｌ，置肝素抗凝小瓶内，室温自然沉淀３０ｍｉｎ～ｌｈ，取富含白细胞的上层液体，用含１０％新生小牛血清的ＲＰＭｌｌ６４０培养液稀释至细胞数１×１０６／ｍｌ，每例测３孔，取平均值。在５％ＣＯ２简易培养箱内３７℃培养２ｈ，然后每孔加３Ｈ－ＴｄＲｌｕ…     

不同组织细胞中端粒酶活性的表达及其意义

端粒酶在人类细胞永生和致癌的过程中起着至关重要的作用。自１９９８年起，我们采用ＴＲＡＰ－酶联法及ＴＲＡＰ－银染法对２５９例不同的临床标本进行了端粒酶活性的定性定量检测，以探讨端粒酶的活性与不同的组织细胞恶性程度的关系及端粒酶能否作为一个肿瘤标志物广泛应用于临床诊断中。１材料与方法１.１标本来源４０例乳腺癌及癌旁组织标本及４５例乳腺纤维腺瘤等良性肿瘤标本取自于１９９８～１９９９年间无锡市级医院行乳房肿瘤手术切除术的患者。１５例正常外周血标本来自无锡市血防所。其余临床标本皆为我院各科室所提供，其中５…     

金属硫蛋白检测方法的研究进展

金属硫蛋白(metallothioneins，MTs)是一类普遍存在的低分子量(约6500Da)热稳定性蛋白．富含半胱氩酸，与某些金属阳离子有高度亲和力(如Ag^ ，Cd^2 ．Hg^2 ，Cu^2 等)。MT结构分析表明其含有两个结构域：α结构域和β结构域，分别结合4个和3个共价金属离子。MT生物学作用广泛，主要参与机体的重金属解毒和微量金属代谢。     

银染法观察大肠杆菌生物被膜变化初探

目的探讨银染法下利用普通光学显微镜观察大肠杆菌生物被膜在药物作用前后的变化。方法采用腹膜透析液-腹膜透析管系统建立大肠杆菌生物被膜,分别用扫描电镜和银染法染色后应用普通光学显微镜来观察细菌生物被膜在药物作用前后的变化情况。结果使用银染法后用普通光镜观察大肠杆菌生物被膜变化的情况与用扫描电镜观察的结果一致。结论银染法下利用普通光学显微镜可以更为便捷地观察大肠杆菌生物膜的变化情况,且实验结果稳定、可靠。     

银染法鉴定克雷伯杆菌生物被膜

目的　探讨银染法鉴定克雷伯杆菌生物被膜的可靠性。方法　采用改进的平板培养法建立克雷伯杆菌生物被膜 ,用银染法和扫描电镜进行观察鉴定。结果　银染后普通光学显微镜观察和扫描电镜观察对生物被膜的鉴定符合率是 10 0 %。结论　用银染法鉴定克雷伯杆菌生物膜方法可靠、简单