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双重实时荧光PCR快速鉴别人参和西洋参＊

目的 建立一种能够快速鉴定人参和西洋参的双重实时荧光PCR方法。方法 通过对人参属及其近似种基因序列的分析比对，设计特异性的引物探针，建立双重实时荧光PCR检测方法。PCR反应体系为Premix Ex Taq （Probe qPCR） 10 μL，人参上下游引物各0.5 μL，西洋参上下游引物各0.3 μL，人参与西洋参特异性探针各0.4 μL，DNA模板2 μL，灭菌去离子水补至20 μL。反应条件为95℃预变性30 s；然后以95℃变性5 s，60℃退火延伸30 s进行40个循环。应用该方法测试了27份DNA样品，包括7份人参、6份西洋参、4份人参与西洋参混合样、10份其他人参属样品及其他常见中药材样品的DNA，以确定该方法的特异性。将人参与西洋参样品DNA混合后10倍稀释成不同浓度后进行检测，用以确定该方法的灵敏度。结果 人参及西洋参样品均在特定的荧光通道下出现典型的阳性扩增曲线，人参与西洋参混合样品均同时出现两条阳性扩增曲线，其它对照样品及空白对照均没有出现阳性扩增曲线。灵敏度检测结果显示该方法检测人参及西洋参的最低检测限均为2 pg DNA/反应。结论 本实验建立的双重实时荧光PCR方法能够同时快速、准确、灵敏地鉴别出人参和西洋参。     

《临床儿科杂志》稿约——关于法律、伦理和道德规范问题

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浅析社区慢性病电子健康档案管理

慢性病电子健康档案是开展慢性病防控的基础,但在建立和管理过程中需要不断完善。该文分析建立慢性病电子健康档案的意义以及管理现状,探讨并提出积极有效的措施。     

甲状旁腺自体荧光在甲状腺癌根治手术中的临床应用

目的　探究甲状旁腺自体荧光技术在甲状腺癌根治术中的应用。方法　选取2020年3月～2020年6月于烟台毓璜顶医院甲状腺外科和头颈外科就诊且资料完整的甲状腺癌患者103例，所有患者均行甲状腺癌根治术。分步骤依次逐步探查甲状腺旁腺，分析肉眼和自体荧光检出甲状旁腺的情况。结果　103例患者共检出甲状旁腺244枚，其中单侧手术76例检出甲状旁腺146（59.8%）枚，双侧手术27例检出甲状旁腺98（40.2%）枚。肉眼检出甲状旁腺227枚（93.0%），近红外显像仪检出241枚（98.8%），差异有统计学意义（χ2=10.219，P =0.001）。进一步对步骤stage I~III上甲状旁腺和下甲状旁腺分别进行卡方分析发现，在stageI阶段，上甲状旁腺的检出率，肉眼和自体荧光没有统计学差异（χ2=0.401，P =0.527），而下甲状旁腺的检出率，自体荧光明显优于肉眼观察（χ2=0.02，P =9.538）。在stage II/III阶段，自体荧光对上甲状旁腺（χ2=0.039，P =4.270）和下甲状旁腺（χ2=0.028，P =4.855）的检出率都明显高于肉眼检出。结论　自体荧光技术可明显提高甲状旁腺的检出率，降低甲状旁腺的误切率。     

浅谈网络版色谱工作站选型及实施

目的：通过布局网络版色谱工作站，实现色谱系统电子实验数据合规化，提升实验室色谱电子数据的安全性，提高实验室色谱系统管理的效率。方法：布局线上网络版色谱工作站。结果：工作站运行良好，升级数据安全，法规响应更完善，节省了实验室管理及维护成本。结论：值得在有色谱需求的实验室推广。     

《临床普外科电子杂志》2020年订阅办法

《临床普外科电子杂志》是由国家卫生健康委员会主管、人民卫生出版社有限公司主办的普外科专业学术电子期刊。吴孟超院士、黎介寿院士、夏穗生教授担任顾问,赵玉沛院士、陈孝平院士担任名誉主编,池一凡教授担任主编。本刊是集70余名全国著名专家担任编委并且共同推出的面向国内外公开发行的学术期刊。《临床普外科电子杂志》为季刊、国内统一刊号为CN11-9331/R,国际刊号为ISSN2095-5308。本刊为多媒体光盘期刊,本杂志保留传统杂志的全部内容和功能,同时运用影视语言和多媒体技术,附加有精品手术视频和学术讲座,具有极强的互动性,是当今期刊发展的最新趋势。     

微滴式数字PCR和实时荧光定量PCR对新型冠状病毒肺炎患者不同时间血便尿中核酸检测结果初步探讨

目的 分析微滴式数字PCR(droplet digital PCR, ddPCR)和实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)的核酸检测结果,比较两种方法检测各类样本的差异性,为改进新型冠状病毒核酸检测方案提供数据支持。 方法 利用ddPCR和qPCR技术对已经确诊的3例新型冠状病毒肺炎患者发病不同时间的全血、尿液、粪便共22份标本进行新型冠状病毒核酸检测。 结果 两种方法对人保守区域基因扩增结果一致:全血标本信号最强,尿液次之,粪便最少;ddPCR在1份全血,1份尿液,5份粪便中检出ORF-1ab和N基因的阳性微滴,qPCR仅在3份粪便中检出上述基因,漏检的3个标本基因拷贝数平均浓度为128 copies/ml;ddPCR在发病<5、5~15、>15 d的各类标本中都有检出,qPCR检出以中晚期为主;重症病例用ddPCR均可测到阳性微滴,qPCR检测的各类标本均为阴性;轻症病例的各类标本中qPCR只有粪便核酸检测阳性,ddPCR检出率高于qPCR。 结论 ddPCR可以有效克服qPCR 灵敏度不足的难题,是对qPCR 的有益补充,尤其是针对病毒载量比较低的血液、尿液和可疑的粪便或肛拭子标本,适用于早期感染的判断及患者治愈后出院诊断。