临床免疫学及免疫检验开放式实验教学方法研究

为了适应21世纪发展需要,就围绕如何培养学生实践能力及科学素养,提高学生的综合素质,对检验医学专业的临床免疫学及免疫学检验实验教学进行探索.通过开放式实验教学培养学生综合思维、创新能力.     

临床微生物学及微生物检验实验教学改革与探索

临床微生物学及微生物检验是一门内容丰富、实践性强的课程,也是当前研究最热、发展迅速的学科之一。它的实验技术在基础研究、临床医学、生物制药等领域得以广泛应用,使其实验教学显得尤其重要。它不仅要求学生要牢固掌握微生物学基础知识,还要熟练掌握微生物检验实验技术,加强创新精神和实践能力及科学素养的培养。以下是我们在临床微生物学及微生物检验实验教学方面的改革和探索。加强教师队伍建设,不断提高实验教学教师的理论水平和实验技能,以教促学,以学促教,教学相长,达到共同发展的良性循环。因此,建设高素质教学师资队伍,信息转换…     

BalB/c小鼠口服重组幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的免疫应答

目的：评价重组尿酶B亚单位（rUreB）作为幽门螺杆菌（Hp)口服疫苗成份的效果、探讨Hp的免疫保护机制。方法：采用重组Hp保护性抗原UreB与粘膜免疫佐剂霍乱毒素B亚单位（CTB）共口服免疫BalB/c小鼠，ELISA分析血清、唾液和粪便、胃粘液中IgG、IgA抗体水平，体外培养脾淋巴细胞在Hp刺激下的增殖情况及IL－4、IFN－γ的变化。结果：BalB/c小鼠口服rHreB和CTB混合制剂能有效激发机体产生全身和局部特异性的体液免疫应答和细胞免疫应答。结论：rUreB可以作为Hp疫苗成分用于Hp感染的预防和治疗。     

淋病奈瑟菌外膜蛋白与粘膜佐剂的融合表达

目的 :在大肠埃希菌 (E .coli)中表达淋病奈瑟菌外膜蛋白与粘膜免疫佐剂的融合蛋白。　方法 :PCR扩增淋病奈瑟菌保守抗原表位porinloopⅥ～Ⅷ (PL678)基因 ,并与不耐热肠毒素B亚单位 (LTB)融合 ,转化E .coli,ELISA、SDS PAGE及Western印迹分析其表达。　结果 :融合蛋白获得表达 ,具有结合GM1神经节苷酯的能力和与抗淋病奈瑟菌多克隆抗体的反应性。　结论 :融合蛋白的表达为研究淋病奈瑟菌分子内佐剂疫苗奠定了基础。     

药学专业微免课程教学改革实践研究

目前,生物制药已成为最活跃、发展最快的医药产业.培养具有创新精神和实践能力的高素质生物技术复合型人才,是广大医学教育工作者的责任所在[1].     

幽门螺杆菌尿素酶B亚单位基因克隆表达及临床应用

目的 获得重组表达的人幽门螺杆菌（Hp)尿素酶B亚单位蛋白（UreB),并将其运用于Hp感染的临床检测。方法 应用聚合酶链反应（PCR）技术从临床分离的Hp菌株基因组中扩增出编码UreB的基因（ureB),将其克隆于质粒PinPoint^TMXa-Ⅲ上进行序列分析和蛋白表达,通过亲和层析得到纯化的重组UreB蛋白并用于113例消化性溃疡患者Hp感染的酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测。结果 克隆的ureB基因核苷酸序列与GenBank公布的序列相比较,同源性为96.44%,推定氨基酸序列同源性为99.65%。纯化的重组UreB蛋白相对分子量约为66000,纯度为90%以上,并保持较好的免疫原性。应用纯化的重组UreB蛋白联合ELISA法检测113例消化性溃疡患者Hp感染的灵敏度和特异性分别为92.0%、98.5%。结论 重组UreB蛋白作为抗原用于ELISA法检测Hp感染,保持了较高的灵敏度和特异性,可用于Hp感染的临床检测与诊断、疗效判定及流行病学研究。     

幽门螺杆菌cagA基因与致病性的研究

１材料和方法１．１材料１９９７／１９９８我校附属医院消化科门诊和住院部患者．通过临床和内镜镜检诊断为十二指肠溃疡病（ＤＵ）２４例,胃溃疡病（ＧＵ）１９例,慢性胃窦胃炎（ＧＩ）３９例,无明显病变者２０例．年龄２１岁～６９岁,男女比例相当．１．２方法①Ｈ...     

重组人幽门螺杆菌尿素酶B亚单位及其生物学性质

目的基因重组人幽门螺杆菌(Hp)尿素酶B亚单位(UreB)并分析重组蛋白的生物学性质。方法采用PCR从我国临床分离的Hp菌株中克隆UreB基因,并通过DNA重组技术构建非融合表达UreB的重组质粒pET-11C-UreB,转化至大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达。结果重组UreB在大肠杆菌中表达,相对分子质量约62 000,表达率26%,N端15个氨基酸序列为MKKISRKEYVSMYGP,肽图及氨基酸组成成分分析结果与理论预测值吻合。以重组UreB免疫BalB/c小鼠,能产生抗UreB抗体。ELISA及Western blotting分析显示,重组UreB具有良好的免疫原性和反应性,表现出与天然Hp UreB相似的生物学功能。结论为重组UreB作为Hp亚单位疫苗成分奠定了免疫学基础。     

表达幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的减毒沙门氏菌工程菌株的构建

目的 采用平衡致死系统构建表达幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的减毒沙门氏菌工程菌株。方法 PCR扩增幽门螺直菌尿素酶B亚单位,与pYA3149(asd^ ）载体质粒重组,转化减毒的伤寒沙门氏菌突变株,SDS-PAGE,用western-bolt分析其表达,并观察重组菌体外传代培养的稳定性。结果 利用宿主-载体平衡致死系统构建了表达幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的重组减毒沙门氏菌工程菌株,且在有选择压力的条件下在体外能稳定地繁殖、生长和传代。结论 表达幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的减毒伤寒沙门氏菌工程菌株的成功构建为发展幽门螺杆菌的口服基因工程疫苗奠定了基础。     

横跨医学检验专业主干课程的“三性”实验课设计与初步实践

医学检验专业主要包括临床微生物学与微生物检验、临床免疫学与免疫检验、临床生物化学与检验等主干课程,但长期以来各课程均独立开展实验课教学,存在部分实验内容重复,各学科间有机结合不够,学生对医学检验专业理论知识掌握和实验技能培训不连贯等问题。本文对检验医学各主干课程的实验课内容进行深入调研,寻找出彼此间重叠的实验内容与项目,重新整合设计出横跨医学检验专业主干课程的“三性”实验项目,并进行初步的教学实践与分析,为医学检验专业实验课的教学改革奠定了工作基础。