黄芪对急性弓形虫RH株感染小鼠的保护作用研究

目的探讨黄芪颗粒剂对刚地弓形虫RH株速殖子感染小鼠的治疗作用.方法 ICR小鼠腹腔注射105、103、102个速殖子,感染后第1天起每鼠给予黄芪0.075 g/d、阿齐霉素[150 mg/(d·kg)]灌胃治疗,对照组给蒸馏水.连续10 d,观察小鼠的存活率与存活时间.于感染后第4、8天处死102个速殖子感染的小鼠,PCR荧光定量方法检测肝、肺弓形虫DNA基因拷贝数.结果 105、103速殖子感染时,黄芪组小鼠平均存活时间为5.57 d和6.23 d,与对照组相比差异无显著性(P＞0.05),阿齐霉素组小鼠平均存活时间为6.96 d和8.12 d,明显高于对照组(P＜0.05).102个速殖子感染时,黄芪组小鼠平均存活时间为8.74 d,明显高于对照组,阿齐霉素组小鼠平均存活时间为7.79 d,与对照组相比差异无显著性(P＞0.05).黄芪组小鼠感染102个速殖子后第4、8天肝、肺虫荷与对照组相比差异无显著性(P＞0.05).结论黄芪可以改善低剂量(102)速殖子感染小鼠的存活情况.     

氧化应激下黑素细胞自噬相关基因差异表达分析

目的 探讨过氧化氢(H2O2)对黑素细胞自噬的影响及可能的调节机制.方法 取对数生长期健康人黑素细胞,分为空白对照组(不予任何处理)、阳性对照组(100 nmol/L西罗莫司处理)和实验组(体积分数为10-7～10-3的H2O2处理),处理4h后,使用CCK8法、流式细胞仪分别检测各组黑素细胞活性及凋亡率.吖啶橙染色检测自噬小泡,透射电镜下观察自噬小体,Western印迹检测自噬特异性蛋白Beclin 1、微管相关蛋白轻链3B(LC3B).最后采用包含84个自噬相关基因的RT2 Profiler PCR Array筛选自噬相关的差异表达基因.结果 黑素细胞分别经10-3、5×104、10-4、5×10-5、10-5、5×10-6、10-6H2O2处理后,细胞增殖活性及凋亡率与空白对照组相比差异均有统计学意义(F值分别为286.95、301.23,均P＜0.05),且随H2O2体积分数升高,增殖活性降低,凋亡率升高.除5×l0-6 H2O2组分别与10 5、10-6 H2O2组间相比细胞凋亡率差异无统计学意义外,上述各H2O2组间两两比较,黑素细胞增殖活性及凋亡率差异均有统计学意义(P＜0.05).吖啶橙染色及电镜观察发现,10-5 H2O2、10-6 H2O2和西罗莫司处理的黑素细胞中有自噬小体形成.Western印迹显示,10-5H2O2、10-6H2O2和西罗莫司组黑素细胞Beclin 1表达量和LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比率均较空白对照组显著升高(P＜0.05).RT2 Profiler PCR Array结果显示,与空白对照组相比,10-5 H2O2组、10-6H2O2组和西罗莫司组中ATG12、ATG3、ULK1、PIK3CG、PTEN、PIK3C3表达均显著上调,EIF2AK3表达显著下调;10-5 H2O2组和西罗莫司组mTOR表达显著下调,ULK2表达显著上调;10-6H2O2组mTOR表达未发生明显改变,AMPK、JNK1表达显著上调.结论 体积分数为10-5和10-6的H2O2均能有效诱导黑素细胞自噬,可能与影响相关信号分子表达相关.     

医学研究生大型仪器使用及方法学课程设置及教学体会

分析了在医学研究生中开设大型仪器使用及方法学课程的意义,总结了在教学实践中获得的心得,着重阐述了在教学内容的选择、教学及确立考核形式中的经验,并就进一步优化教学体系的设想进行了讨论,为培养高素质医学人才的科研和创新能力提供了支持.     

羟基积雪草苷对氧化应激条件下黑素细胞的保护作用及其诱导自噬机制的研究

目的：积雪草是一种传统中医药物,具有很多医学作用,如创伤愈合和抗氧化。中医也发现它可用于白癜风复色和炎症后色素沉着。本研究评估羟基积雪草苷对氧化应激下人黑素细胞作用效果及机制。方法：正常的人黑素细胞予 0.01 mmol/L 过氧化氢处理,再予不同浓度的羟基积雪草苷（0、10、50、100 μg/mL）。评估人黑素细胞树突的回缩速率,流式细胞术及细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)检测线粒体膜电位（MMP）,透射电子显微镜(TEM)观察线粒体超微结构,吖啶橙染色检测自噬,蛋白质印迹检测自噬体形成的指标LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ 的比值。结果：在过氧化氢引发的氧化应激条件中,羟基积雪草苷在一定浓度下抑制了黑素细胞树突的回缩,提高了膜电位并减少了 [Ca2+]i的积累,减弱了线粒体的损伤,增强了自噬活动。结论：人黑素细胞遭受氧化应激损伤时,羟基积雪草苷可通过自噬激活起到抗氧化作用。因此,羟基积雪草苷可成为氧化应激引起的白癜风的有效治疗手段。     

α-硫辛酸对黑素细胞氧化应激下的保护作用及抑制自噬机制的研究

目的:探讨α-硫辛酸(α-LA)对体外培养的人黑素细胞氧化损伤的保护作用。方法:以不同浓度的α-LA(100、200及400μmol/L)预处理正常人黑素细胞12 h,再加入500μmol/L H_2O_2处理6 h。采用CCK-8试剂盒检测黑素细胞活力,流式细胞仪分析细胞内活性氧(ROS)含量、钙离子水平及细胞周期,线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)分析线粒体膜电位,图像分析软件测量树突回缩速率,透射电镜观察超微结构以及western blot检测LC3和p62蛋白表达情况。结果:正常情况下α-LA能显著提高黑素细胞的活力,同时还能明显降低氧化应激时黑素细胞内ROS水平,减轻细胞内超微结构的损伤,阻止线粒体去极化及细胞内钙离子的累积,延缓树突的回缩,促进增殖及降低过度激活的自噬水平(P0.05)。结论:α-LA不仅能在正常情况下显著提高黑素细胞的活力,而且可明显降低氧化应激下黑素细胞过度激活的自噬水平,对黑素细胞起保护作用。     

超微病理学教学模式改革初探

南京医科大学在第三学年的第一学期为本科临床医学(临床病理学方向)专业学生开设了超微病理学课程。目的是让学生通过学习医学超微结构知识和电镜技术的相关知识,培养临床病理专业技能和科研思维能力。文章分析了该专业学生开设超微病理学课程的意义,总结了该课程教学模式改革的实践经验。     

新生儿惊厥性49临床分析

新生儿惊厥是多种原因引起的新生儿时期较常见症状,它提示病情严重、病死率高、所以是国产期医学的一个重要问题,我科收治的49例新生儿惊厥病历进行总结分析: 一般资料 49例中男30例。女19例,其中低体重儿16例(<2500克)首发年龄为生后却刻,最大4周,生后3天内发病28例(58％)7天内发病33例(67％),7天以上6例(12％)。     

日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30保护性免疫力持续时间的研究

目的确定日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30主动免疫诱导保护性免疫力的持续时间.方法实验组昆明种小鼠腹腔注射NP30 10 μg/鼠,主动免疫3次,每次间隔2周,对照组腹腔注射生理盐水.末次免疫后8、12、16、20、24周感染日本血吸虫尾蚴(40±1)条,尾蚴感染后40 d行足垫试验.结果 NP30末次免疫后8、12、16周感染日本血吸虫尾蚴的减虫率为21.43%～41.16%,分别与对照组相比差异有显著性;足垫试验结果显示8、12周实验组与对照组差异有显著性.结论 NP30主动免疫诱导的保护性免疫力持续约4个月;足垫试验结果与细胞免疫有关.     

白癜风皮损边缘黑素细胞线粒体超微结构的电镜观察

【摘要】 目的 探讨白癜风患者皮损边缘黑素细胞线粒体结构的变化。方法 在透射电镜下观察健康对照、进展期白癜风及稳定期白癜风患者皮损边缘黑素细胞形态,体视学方法测量线粒体体密度（Vv）、表面积密度（Sv）、数密度（Nv）等参数。结果 健康对照组黑素细胞可见大量黑素小体（28.57 ± 3.21）,以Ⅲ、Ⅳ期为主,线粒体规则分布在细胞内,结构正常、嵴密集,部分细胞胞质内可见自噬小体。进展期和稳定期白癜风黑素细胞内黑素小体数量减少,单位细胞内黑素小体数量分别为22 ± 6.16和17.43 ± 6.24,其中,Ⅲ期黑素小体显著减少,线粒体大小不一、形态多样,大部分线粒体明显肿胀,嵴模糊、排列紊乱甚至断裂,呈空泡状改变,未见线粒体自噬现象。线粒体形态结构定量研究显示,健康对照组Nv、Vv、Sv分别为（7.194 ± 1.434） μm－3、（4.8 ± 1.2）%、（2.42 ± 0.86） μm－1;进展期白癜风组Nv、Vv、Sv分别为（4.055 ± 0.906） μm－3、（7.4 ± 2.1）%、（3.58 ± 1.15） μm－1;稳定期白癜风组Nv、Vv、Sv分别为（5.311 ± 0.873） μm－3、（6.5 ± 1.4）%和（2.82 ± 0.94） μm－1,组间差异有统计学意义（P ＜ 0.05）。结论 白癜风皮损边缘黑素细胞线粒体受损,且进展期损伤程度大于稳定期。 【关键词】 白癜风; 黑素细胞; 线粒体; 显微镜检查,电子,透射     

自噬小体的超微结构分析

目的 :分析研究自噬小体的超微结构。方法 :应用透射电镜技术整理分析本中心收到的用于自噬研究的细胞标本,发现自噬小体的特征结构,并对细胞内易与自噬小体混淆的其他细胞结构进行分析。结果:自噬小体具有双层或多层膜的特征,并且其内包含细胞器和胞浆成分,可以与细胞内其他易于混淆的细胞结构相区分。结论:双层或多层膜的球状结构,内含胞浆成分,如线粒体、内质网、核糖体等,是自噬小体的结构特征。