大鼠原代培养肝细胞作为早期肝毒性筛选模型的研究

目的研究大鼠原代培养肝细胞作为早期肝毒性的筛选模型的生物学特征。方法采用二步灌流法分离提取大鼠肝细胞进行培养;采用荧光倒置显微镜观察原代培养肝细胞的生长情况;采用MTT法绘制肝细胞生长曲线;采用全自动生化分析仪检测细胞上清液的ALT、AST、ALP、CK、LDH、TP、ALB、GGT值;采用爬片技术进行HE检查;采用Elisa法检测细胞上清液中细胞色素P450(CYP450)的总量,并采用肝细胞毒性药物对乙酰氨基酚对肝细胞作为早期肝毒性筛选模型进行验证。结果肝细胞培养4 h后开始贴壁,24 h后绝大多数肝细胞贴壁,体积明显增大;48 h后肝细胞贴壁牢固,维持至第8日,细胞开始逐渐脱落。肝细胞的对数生长期为第2至第3日,ALT、AST、LDH、CK在提取4 h后增高,第1日大幅降低后趋于平稳至第7日。TP、ALB、GGT、ALP提取4 h降低,后趋于平稳至第7日,肝细胞CYP450第1日至第5日分泌呈上升趋势,第6⁷日,轻微下降。HE结果显示提取的肝细胞与肝组织的HE涂片基本一致。对乙酰氨基酚对肝细胞的生长具有抑制作用,IC50为20.5 mmol·L-1,能使肝细胞肿胀,细胞核萎缩,使肝细胞分泌ALT、ALP、LDH增多,对肝细胞分泌CYP450的功能具有抑制作用。结论系统全面的阐述肝细胞的生物学特征及在早期毒性评价中的应用,肝细胞作为肝早期毒性筛选模型敏感的评价指标,对于原代培养肝细胞用于药物的早期毒性筛选研究起到了一个示范作用。     

701跌打镇痛膏抗炎作用的实验研究

目的考察701跌打镇痛膏的抗炎作用,为其临床应用提供实验依据。方法通过角叉菜胶致大鼠足跖肿胀模型、二甲苯致小鼠耳肿胀模型、完全氟氏佐剂致大鼠关节炎模型,考察701跌打镇痛膏的抗炎作用。结果 701跌打镇痛膏单次腹部敷贴给药后能明显降低角叉菜胶致SD大鼠足肿胀的足容积和足肿胀度,药效达峰时间约为给药后4 h;连续腹部敷贴给药5 d后能明显降低二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀度,抗炎作用具有明显的量效关系;对大鼠佐剂性关节炎模型未见明显作用。结论 701跌打镇痛膏对急性渗出性炎症具有明显的改善作用,但对免疫性炎症作用不明显。     

鸡血藤提取物对环磷酰胺致白细胞低下大鼠的影响

目的 利用环磷酰胺（CTX）致白细胞低下大鼠模型研究鸡血藤提取物的升白细胞作用，发现其升白细胞作用的有效部位。方法 采用CTX（100 mg/kg）单次sc的方法制备大鼠白细胞低下模型，给药后第7、9、11天采集大鼠的血液，测定白细胞总数及分类，并进行统计分析。结果 鸡血藤提取物A（50%乙醇提取，为总提取物）、B（50%乙醇提取-水洗脱）、C（50%乙醇提取-25%乙醇洗脱）组均未见明显升白细胞作用，而鸡血藤提取物D（50%乙醇提取-70%乙醇洗脱，总黄酮量大于55%）和阳性药利可君均具有明显的升白细胞作用，且鸡血藤提取物D的升白细胞作用具有量效关系，优于阳性药利可君。结论 鸡血藤提取物D可能是鸡血藤升白细胞作用的有效部位，推测其升白细胞作用的有效物质是总黄酮。     

一类创新药苯胺洛芬注射液初步药效学和安全性研究

目的:从药效学、安全性两方面对一类新药苯胺洛芬注射液进行评价.并推测其开发前景.方法:通过小鼠扭体试验、二甲苯致小鼠耳廓肿胀试验、急性毒性试验来考察苯胺洛芬注射液的抗炎、镇痛和安全性,并选用氟比洛芬酯注射液进行对比研究.结果:苯胺洛芬注射液能显著减少小鼠的扭体反应次数,ED50为7.9mg/kg;急性毒性试验结果表明苯胺洛芬注射液LD50＞900mg/kg.结论:苯胺洛芬注射液抗炎、镇痛作用与氟比洛芬酯注射液相似,但安全性优于氟比洛芬酯注射液.     

知母提取物对地塞米松致大小鼠胃肠机能紊乱的影响

目的探讨知母提取物对地塞米松致大小鼠胃肠机能紊乱的影响。方法通过建立地塞米松诱发的大小鼠胃肠道机能紊乱动物模型,检测大鼠胃液量、胃液pH值、胃蛋白酶活力及胃壁结合黏液量和小鼠肠推进率及胃内色素残留率等指标考察知母提取物的药理作用。结果知母提取物能显著减轻地塞米松所致小鼠胃排空运动减缓,使给予地塞米松造模的大鼠胃液pH值显著增加,胃蛋白酶活力明显降低,胃壁结合黏液量也有明显增加趋势。结论知母提取物具有改善地塞米松致大小鼠胃肠机能紊乱的作用。     

701跌打镇痛膏活血化瘀实验研究

<正>701跌打镇痛膏主要由土鳖虫、草乌、马钱子、大黄、水杨酸甲脂等14味药物组成,具有活血止痛,散瘀消肿,祛风胜湿的功效,临床上主要应用于急、慢性扭挫伤,慢性腰腿痛,风湿关节痛等病症,是中国外用贴膏类出口第一产品。虽然701跌打镇痛膏已经上市销售多年,在临床上也取得了一定的疗效,但是其活血化瘀作用目前尚未见相关实验报道。为进一步明确701跌打镇痛膏的活血化瘀作用,了解其作用特点而进行本研究。1材料与方法     

两种中药组方对D-半乳糖诱导的衰老模型裸鼠皮肤的影响

目的 研究杭白菊、珍珠粉、当归、丹参组方增加胶原蛋白后对D-半乳糖诱导裸鼠皮肤衰老模型的改善作用,筛选疗效好的中药组方。方法 裸鼠sc D-半乳糖1 000 mg/(kg?d) 建立亚急性衰老模型,通过检测机体的抗氧化能力、羟脯氨酸（Hyp）、透明质酸、皮肤含水量及胶原纤维、弹性纤维、皮肤组织学等指标,考察2种复方是否具有抗氧化及延缓皮肤衰老的功效。结果 杭白菊、珍珠粉、当归、丹参组方增加胶原蛋白后具有改善衰老模型裸鼠皮肤含水量,增加皮肤超氧化歧化酶（SOD）、I型胶原蛋白、Hyp的量;减少皮肤中丙二醛（MDA）生成的作用,同时能显著改善衰老裸鼠皮肤形态学改变,增加胶原蛋白后组方作用的综合指标强于原组方。结论 杭白菊、珍珠粉、当归、丹参组方增加胶原蛋白后对D-半乳糖诱导衰老模型裸鼠皮肤衰老具有显著改善作用。     

二精丸有效部位对肾阴虚模型大鼠学习记忆障碍的影响及其分子机制

目的探讨二精丸有效部位对肾阴虚模型大鼠学习记忆障碍的影响及其分子机制。方法采用大鼠ig甲状腺素加im利血平方法制备肾阴虚模型,二精丸总黄酮和总多糖ig给药结束后Morris水迷宫法测定各组的学习记忆能力;采用酶联免疫法测定血清激素水平;采用免疫组织化学法测定海马部位Bcl-2和Bax表达及Tau蛋白异常磷酸化水平。结果二精丸总黄酮和总多糖能显著提高模型大鼠的学习记忆能力;能显著恢复激素水平及海马区Bcl-2和Bax表达;能显著抑制海马区Tau蛋白Ser199/202、Ser396、Thr231三个磷酸化位点异常磷酸化。结论二精丸总黄酮和总多糖能提高肾阴虚模型大鼠的学习记忆能力。     

安痛藤对大鼠佐剂性关节炎的实验研究

目的研究安痛藤对类风湿性关节炎大鼠的影响,观察其镇痛作用。方法建立福氏佐剂诱导大鼠类风湿性关节炎模型;口服安痛藤水煎液,观察药物对实验性大鼠足肿胀的抑制作用;采用化学刺激致小鼠扭体观察安痛藤的镇痛作用。结果与模型组比较,安痛藤水煎液(2.4 g生药/kg,4.8 g生药/kg)其有明显的镇痛作用,能明显地改善AA大鼠原发性炎症和继发性炎症,能明显在减轻AA大鼠的关节肿胀,降低多发性关节炎指数(P<0.01)。结论安痛藤有抗大鼠佐剂性关节炎的作用。     

二精丸有效部位对肾阴虚模型记忆障碍影响及其机制的实验研究

目的探讨二精丸有效部位对肾阴虚模型学习记忆障碍的影响及其机制。方法使用附子、肉桂等热性中药复制大鼠肾阴虚模型。二精方总黄酮和总多糖灌胃给药结束后Morris水迷宫法测定各组的学习记忆能力,采用酶联免疫法检测大鼠血清激素水平。结果二精丸总黄酮和总多糖能显著提高模型大鼠的学习记忆能力;能显著恢复模型大鼠激素水平。结论二精丸总黄酮和总多糖能提高模型大鼠的学习记忆能力。