701跌打镇痛膏活血化瘀实验研究

<正>701跌打镇痛膏主要由土鳖虫、草乌、马钱子、大黄、水杨酸甲脂等14味药物组成,具有活血止痛,散瘀消肿,祛风胜湿的功效,临床上主要应用于急、慢性扭挫伤,慢性腰腿痛,风湿关节痛等病症,是中国外用贴膏类出口第一产品。虽然701跌打镇痛膏已经上市销售多年,在临床上也取得了一定的疗效,但是其活血化瘀作用目前尚未见相关实验报道。为进一步明确701跌打镇痛膏的活血化瘀作用,了解其作用特点而进行本研究。1材料与方法     

大鼠原代培养肝细胞作为早期肝毒性筛选模型的研究

目的研究大鼠原代培养肝细胞作为早期肝毒性的筛选模型的生物学特征。方法采用二步灌流法分离提取大鼠肝细胞进行培养;采用荧光倒置显微镜观察原代培养肝细胞的生长情况;采用MTT法绘制肝细胞生长曲线;采用全自动生化分析仪检测细胞上清液的ALT、AST、ALP、CK、LDH、TP、ALB、GGT值;采用爬片技术进行HE检查;采用Elisa法检测细胞上清液中细胞色素P450(CYP450)的总量,并采用肝细胞毒性药物对乙酰氨基酚对肝细胞作为早期肝毒性筛选模型进行验证。结果肝细胞培养4 h后开始贴壁,24 h后绝大多数肝细胞贴壁,体积明显增大;48 h后肝细胞贴壁牢固,维持至第8日,细胞开始逐渐脱落。肝细胞的对数生长期为第2至第3日,ALT、AST、LDH、CK在提取4 h后增高,第1日大幅降低后趋于平稳至第7日。TP、ALB、GGT、ALP提取4 h降低,后趋于平稳至第7日,肝细胞CYP450第1日至第5日分泌呈上升趋势,第6⁷日,轻微下降。HE结果显示提取的肝细胞与肝组织的HE涂片基本一致。对乙酰氨基酚对肝细胞的生长具有抑制作用,IC50为20.5 mmol·L-1,能使肝细胞肿胀,细胞核萎缩,使肝细胞分泌ALT、ALP、LDH增多,对肝细胞分泌CYP450的功能具有抑制作用。结论系统全面的阐述肝细胞的生物学特征及在早期毒性评价中的应用,肝细胞作为肝早期毒性筛选模型敏感的评价指标,对于原代培养肝细胞用于药物的早期毒性筛选研究起到了一个示范作用。     

701跌打镇痛膏抗炎作用的实验研究

目的考察701跌打镇痛膏的抗炎作用,为其临床应用提供实验依据。方法通过角叉菜胶致大鼠足跖肿胀模型、二甲苯致小鼠耳肿胀模型、完全氟氏佐剂致大鼠关节炎模型,考察701跌打镇痛膏的抗炎作用。结果 701跌打镇痛膏单次腹部敷贴给药后能明显降低角叉菜胶致SD大鼠足肿胀的足容积和足肿胀度,药效达峰时间约为给药后4 h;连续腹部敷贴给药5 d后能明显降低二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀度,抗炎作用具有明显的量效关系;对大鼠佐剂性关节炎模型未见明显作用。结论 701跌打镇痛膏对急性渗出性炎症具有明显的改善作用,但对免疫性炎症作用不明显。     

格列本脲对GK大鼠心肌的保护作用实验研究

<正>糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)指由糖尿病引起心脏微血管病变、心肌代谢紊乱和心肌纤维化等所致的心肌广泛结构异常的一种疾病状态[1]。近年来的研究发现,血管紧张素(Ang-Ⅱ)增多、游离脂肪酸(IFFA)在DCM的发病中起着重要的作用。     

地塞米松致胃肠机能紊乱的动物实验研究

目的建立地塞米松致大、小鼠胃肠道功能紊乱的疾病模型。方法以地塞米松ig、sc给药,采用不同给药剂量进行分组实验,观察地塞米松对大鼠胃分泌功能及对小鼠胃肠运动功能的影响,确定建立该模型地塞米松的给药剂量及给药途径,根据模型研究结果选择知柏地黄丸和三九胃泰抑制地塞米松导致的胃肠功能紊乱的试验研究。结果与正常组相比,各组动物ig、sc给予地塞米松后出现小鼠胃肠运动被抑制,大鼠胃蛋白酶活力增加、胃液pH降低、胃壁结合黏液量降低,同时三九胃泰能有效抑制地塞米松导致的胃肠功能紊乱。结论大鼠以地塞米松1.2 mg.kg-1连续灌胃8 d,小鼠以1.0 mg.kg-1连续灌胃5 d,可以建立较为理想的致胃肠道功能紊乱的模型,三九胃泰能有效抑制地塞米松导致的胃肠功能紊乱。     

电刺激鼠尾实验条件的探讨

目的探讨电刺激鼠尾实验的各种因素对实验结果的影响。方法在不同体质量、刺激电压、性别的条件下,观察电刺激致痛嘶叫反应的动物数。结果在相同实验条件下,雌性小鼠发生嘶叫数多于雄性小鼠,刺激电压越高发生嘶叫数越多,体质量18～22g小鼠与22～26g小鼠的发生嘶叫数无显著差异。结论必须严格控制电刺激鼠尾实验的各种条件才能获得准确、可重复的实验结果。     

鸡血藤提取物对环磷酰胺致白细胞低下大鼠的影响

目的 利用环磷酰胺（CTX）致白细胞低下大鼠模型研究鸡血藤提取物的升白细胞作用，发现其升白细胞作用的有效部位。方法 采用CTX（100 mg/kg）单次sc的方法制备大鼠白细胞低下模型，给药后第7、9、11天采集大鼠的血液，测定白细胞总数及分类，并进行统计分析。结果 鸡血藤提取物A（50%乙醇提取，为总提取物）、B（50%乙醇提取-水洗脱）、C（50%乙醇提取-25%乙醇洗脱）组均未见明显升白细胞作用，而鸡血藤提取物D（50%乙醇提取-70%乙醇洗脱，总黄酮量大于55%）和阳性药利可君均具有明显的升白细胞作用，且鸡血藤提取物D的升白细胞作用具有量效关系，优于阳性药利可君。结论 鸡血藤提取物D可能是鸡血藤升白细胞作用的有效部位，推测其升白细胞作用的有效物质是总黄酮。     

两种中药组方对D-半乳糖诱导的衰老模型裸鼠皮肤的影响

目的 研究杭白菊、珍珠粉、当归、丹参组方增加胶原蛋白后对D-半乳糖诱导裸鼠皮肤衰老模型的改善作用,筛选疗效好的中药组方。方法 裸鼠sc D-半乳糖1 000 mg/(kg?d) 建立亚急性衰老模型,通过检测机体的抗氧化能力、羟脯氨酸（Hyp）、透明质酸、皮肤含水量及胶原纤维、弹性纤维、皮肤组织学等指标,考察2种复方是否具有抗氧化及延缓皮肤衰老的功效。结果 杭白菊、珍珠粉、当归、丹参组方增加胶原蛋白后具有改善衰老模型裸鼠皮肤含水量,增加皮肤超氧化歧化酶（SOD）、I型胶原蛋白、Hyp的量;减少皮肤中丙二醛（MDA）生成的作用,同时能显著改善衰老裸鼠皮肤形态学改变,增加胶原蛋白后组方作用的综合指标强于原组方。结论 杭白菊、珍珠粉、当归、丹参组方增加胶原蛋白后对D-半乳糖诱导衰老模型裸鼠皮肤衰老具有显著改善作用。     

知母提取物对地塞米松致大小鼠胃肠机能紊乱的影响

目的探讨知母提取物对地塞米松致大小鼠胃肠机能紊乱的影响。方法通过建立地塞米松诱发的大小鼠胃肠道机能紊乱动物模型,检测大鼠胃液量、胃液pH值、胃蛋白酶活力及胃壁结合黏液量和小鼠肠推进率及胃内色素残留率等指标考察知母提取物的药理作用。结果知母提取物能显著减轻地塞米松所致小鼠胃排空运动减缓,使给予地塞米松造模的大鼠胃液pH值显著增加,胃蛋白酶活力明显降低,胃壁结合黏液量也有明显增加趋势。结论知母提取物具有改善地塞米松致大小鼠胃肠机能紊乱的作用。     

杭白菊、当归、丹参提取液抑制黄褐斑形成及机制研究

目的观察杭白菊、当归、丹参提取液对im黄体酮及紫外(UV)照射导致的黄褐斑小鼠模型的抗氧化与抗黄褐斑形成作用。方法将小鼠随机分成对照组、模型组、维生素C组、杭白菊组、当归组、丹参组共6组。采用im黄体酮及辅助UV照射方法建立黄褐斑小鼠模型。测定各组肝脏及皮肤组织中的谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、酪氨酸酶(TYR)活性与总抗氧化能力(T-AOC),以及丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、肝脏脂褐质水平,并测定血液流变学指标,进行皮肤病理学检查。结果杭白菊、当归、丹参提取液显著增强黄褐斑小鼠肝脏和皮肤中GSH-Px、SOD活性,降低MDA水平,抑制TYR增加,使黑素细胞(MC)生成减少,抑制黑色素合成,从而减轻皮肤色素沉着。结论杭白菊、当归、丹参提取液有一定的防治黄褐斑的功效,其作用与提高机体抗氧化能力,抑制TYR活性,减少黑色素的合成以及改善机体的血液流变学有关。