辣椒素对脂多糖诱导血管内皮细胞活化的影响及机制

 目的:探讨辣椒素对脂多糖（LPS）刺激后小鼠主动脉内皮细胞活化的影响,并探讨其可能机制。方法:（1）体外分离培养小鼠主动脉内皮细胞,免疫荧光鉴定内皮细胞特异性标志。（2）以100 μg/L LPS作用于血管内皮细胞后,以不同浓度的辣椒素（50 μmol/L、100 μmol/L和200 μmol/L）进行干预,分别于12、24和48 h收集主动脉血管内皮细胞及细胞上清液。采用ELISA法检测各组细胞上清液中的可溶性细胞间黏附分子 1（sICAM-1）、可溶性血管细胞黏附分子 1（sVCAM-1）和可溶性P-选择素(sP-selectin)水平,Western blotting法检测各组主动脉血管内皮细胞核内NF-κB p65水平和胞浆p-IκBα、IκBα水平。结果:与对照组相比,LPS组细胞上清液中sP-selectin、sICAM-1和sVCAM-1含量显著升高（P<0.05）, LPS能够时间依赖性上调sICAM-1和sVCAM-1的含量。与同时点的LPS组相比,辣椒素能够剂量依赖性下调sP-selectin、sICAM-1和sVCAM-1水平。与对照组相比,LPS作用24 h后, 细胞核内NF-κB p65和胞浆p-IκBα蛋白水平显著升高（P<0.05）,胞浆IκBα蛋白水平显著降低（P<0.05）。与同时点LPS组相比,辣椒素能够剂量依赖性下调细胞核内NF-κB p65和胞浆p-IκBα蛋白的水平（P<0.05）,剂量依赖性上调胞浆IκBα蛋白水平（P<0.05）。结论: 辣椒素能够显著抑制LPS作用后血管内皮细胞活化水平,该效应可能是通过下调IκBα降解和NF-κB p65胞核内转位而实现的。     

不同评分系统对急性中毒预后评估价值的比较

目的比较PSS、APACHEII、SAPSII、SOFA 4种评分系统在急性中毒预后评估中的价值。方法回顾性分析2015年1月至2016年10月收住我院急诊重症监护室EICU的231例急性中毒患者的临床资料,收集入院24h内PSS评分、APACHEII评分、SAPSII评分、SOFA评分,根据28d临床结局分为存活组和死亡组,比较两组临床资料的差异,分析两组患者的的PSS评分、APACHEII评分、SAPSII评分、SOFA评分的相关性,并对4种评分系统分值及ROC曲线下面积进行比较,评估4种评分系统的预测价值。结果与死亡组比较,存活组PSS评分、APACHEII评分、SAPSII评分、SOFA评分的差异有统计学意义(P<0.01)。PSS评分、APACHEII评分、SAPSII评分、SOFA评分之间呈明显正相关关系(P<0.01),4种评分系统的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.833、0.887、0.843、0.843。APACHEII评分曲线下面积大于PSS评分、SAPSII评分、SOFA评分,差异有统计学意义(z=2.351,2.317,2.217;P=0.019,0.021,0.027),另3种评分曲线下面积(AUC)比较的差异无统计学意义(P>0.05)。PSS评分、APACHEII评分、SAPSII评分、SOFA评分截断值(cut-off)、灵敏度、特异度、准确率分别为(2.5,93.1%,50.9%,61.5%)、(14.5,82.8%,75.7%,77.48%)、(31.5,77.6%,76.90%,77.08%)、(5.5,77.60%,74.60%,75.35%)。结论4种评分系统均可对急性中毒患者的预后进行评估,APACHEII评分对预后的评估能力及准确率优于其他3种评分系统。     

中医对农药急性中毒病人的预检分诊探讨

农药急性中毒是急诊科常见的一种急性中毒，大都病势凶险．发展迅猛．如不及时抢救．往往危及生命。分诊护士作为病人到急诊科的第一接触者．为患者提供正确的分诊以及采取及时有效的抢救措施．能为病人抢救赢得宝贵的时机。我院急诊科于2002年1月。2006年3月期间共接诊农药急性中毒病人112例．现将预检分诊经验总结如下。     

治疗前后酒精灌胃大鼠创伤弧菌脓毒症肝组织Toll样受体等的变化

目的 探讨抗生素对酒精灌胃大鼠创伤弧菌(vibrio vulnificus,VV)脓毒症肝组织Toll样受体(Toll like receptor,TLR)等的影响.方法 大鼠设正常对照组(N组,6只)、酒精灌胃大鼠对照组(A组,6只)、酒精灌胃大鼠抗生素对照组(AA组,6只)、酒精灌胃大鼠VV脓毒症组(AV组,24只;分别于染菌后2、6、12、24 h处死,每时相点动物数均为6只)和酒精灌胃大鼠VV脓毒症抗生素治疗组(AVA组,30只;分别于染菌后6、12、24、36 h和1周时活杀,各时相点动物数均为6只).采用逆转录聚合酶链技术检测各组大鼠不同时点肝组织TLR等的变化.结果 AV-6 h组TLR4 mRNA表达量为0.775±0.101,AVA-6 h组TLR4 mRNA表达量为0.600±0.064;AV-12 h组TLR4 mRNA表达量为0.918±0.133,AVA-12 h组TLR4 mRNA表达量为0.583±0.112;AV-24 h组TLR4 mRNA表达量为0.732±0.110,AVA-24 h组TLR4 mRNA表达量为0.512±0.118.AVA组大鼠染菌后6、12、24h TLR4 mRNA,与同时点AV组相比,TLR4 mRNA表达量明显降低,差异有统计学意义(AVA-6 h组与AV-6 h组比较,t=-3.573,P＜0.01;AVA-12 h组与AV-12 h组比较,t=-4.722,P＜0.01;AVA-24 h组与AV-24 h组比较,t=-3.340,P＜0.01).结论 及早联用抗生素可减低酒精灌胃大鼠VV脓毒症肝组织TLR等的表达,有利于机体促、抗炎平衡恢复,对酒精灌胃大鼠VV脓毒症有明显的治疗作用.     

温州地区急性农药中毒特点及预后影响因素研究

目的探讨本地区农药急性中毒的特点,为干预提供依据。方法对2002年1月至2006年3月期间我院急诊科接诊且资料完整的农药急性中毒病人进行调查分析。结果共调查了112例农药急性中毒病人。男女性别比为1.60：1。平均年龄为45.0岁。非生产性中毒是主要的中毒方式,占97.3%。自杀为其主要原因,占62.4%。自杀者病死率高,为5.8%。44.6%的农药中毒发病于第三季度。有机磷类农药中毒占首位,占70.5%。其中,敌敌畏中毒病死率最高（5.7%）。15.2%的病例进行了血液透析治疗,25.9%的病人需要机械通气,有机磷中毒病例人工通气率（32.9%）明显高于其他组。呼吸衰竭的并发症发生率为8.9%。农药急性中毒平均住院天数为10.52d。病死率为3.6%。农药中毒预后影响因素有自杀、病人的依从性、血液透析、并发症和住院时间。结论本研究提供了温州地区农药急性中毒的流行病学资料,为防治和干预提供有用信息。     

酒精性肝病大鼠创伤弧菌脓毒症凝血因子的动态变化

目的探讨酒精性肝病大鼠创伤弧菌脓毒症凝血因子的变化及意义。方法制作酒精性肝病大鼠创伤弧菌脓毒症模型,观察脓毒症组大鼠在染菌后2、6、12、24 h各时间点脓毒症表现,并检测各时间点大鼠血浆FIG、AT:A、tPA、PAI-1水平。结果脓毒症组大鼠染菌后6 h开始出现较明显的毒血症状,并随时间的延长而加剧,24 h达高峰,濒临死亡。脓毒症组大鼠血浆FIG在染菌后呈进行性升高,6 h始明显高于正常对照N组及酒精肝对照A5组(P<0.01),12 h达高峰,24 h FIG有下降趋势,但与12 h组相比,两者差异无统计学意义(P>0.05)。大鼠AT:A在染菌后呈进行性下降,6 h即显著低于A5及N组(P均<0.01)。tPA在染菌后2 h第1次达高峰(P<0.05),下降至正常水平后于24 h再次显著升高(P<0.01),PAI-1于2 h显著升高(P<0.01),而tPA/PAI值2 h显著降低,24 h显著高于对照组(P均<0.05)。结论酒精性肝病大鼠创伤弧菌脓毒症早期即可出现明显的凝血紊乱,动态检测FIG、AT:A、tPA、PAI-1水平可反映创伤弧菌脓毒症病情严重程度。     

姜黄素上调线粒体融合蛋白2抑制脓毒症小鼠淋巴细胞凋亡的实验研究

目的 研究姜黄素抑制脓毒症小鼠淋巴细胞凋亡的作用与机制.方法 取45只清洁级BALB/c雄性小鼠,随机(随机数字法)分为3组,即假手术组(n=15),脓毒症组(n=15),姜黄素组(n=15),实验重复3次.脓毒症组行盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP),术前予等体积生理盐水灌胃1周;姜黄素组行CLP术,术前给予姜黄素200 mg/ (kg-d)灌胃1周;假手术组仅行开腹,不予以结扎、穿孔,术前等体积生理盐水灌胃1周.观察各组小鼠术后24h病死率,并处死存活小鼠,分离脾脏淋巴细胞.采用流式细胞术、TUNEL法检测淋巴细胞凋亡情况;流式细胞术检测线粒体膜电位水平;Western Blot检测线粒体融合蛋白2(Mitofusin2,Mfn2)、Bax、Bcl-2蛋白表达.数据采用SPSS 18.0软件进行分析,计数资料采用x2检验,计量资料组间比较采用单因素方差分析.结果 小鼠病死率采用x2检验,脓毒症组小鼠术后24h病死率为46.7％,较假手术组0.00％明显升高(x2 =27.391,P＜0.01),姜黄素组病死率较脓毒症组有所降低(40.0％ vs.46.7％,x2=6.429,P=0.01).脾淋巴细胞凋亡率比较采用单因素方差分析,3组比较,P＜0.01,差异具有统计学意义.进一步两两比较,脓毒症组脾淋巴细胞凋亡率为(17.1±1.67)％,较假手术组(9.43±1.06)％明显增高(P ＜0.001);姜黄素组淋巴细胞凋亡率(12.70±1.25)％较脓毒症组比较明显下降(P=0.012).脾淋巴细胞线粒体膜电位比较采用单因素方差分析,3组比较P＜0.01,差异具有统计学意义.进一步两两比较,脓毒症组线粒体膜电位降低率为(45.13±4.14)％,较假手术组(21.63±1.62)％明显升高(P＜0.01),姜黄素组线粒体膜电位降低率为(29.67±2.15)％,较脓毒症组明显降低(P=0.001).蛋白表达情况采用单因素方差分析,3组线粒体Bax蛋白(P＜0.01)、胞浆Bax蛋白(P＜0.01),差异具有统计学意义.进一步两两比较,与假手术组比较,脓毒症组线粒体Bax蛋白表达水平明显上调(P=0.001),而胞浆Bax蛋白表达水平明显降低(P＜0.01).经姜黄素预处理后线粒体Bax蛋白水平较脓毒症组明显降低(P=0.02),胞浆Bax蛋白表达水平明显升高(P＜0.01).3组细胞总Mfn2蛋白(P ＜0.001)、Bcl-2蛋白(P=0.001),差异具有统计学意义.进一步两两比较,与假手术组比较,脓毒症组Mfn2蛋白(P=0.015)、Bcl-2蛋白(P=0.01)表达水平明显降低,经姜黄素预处理后Mfn2蛋白(P=0.002)、Bcl-2蛋白(P =0.001)水平明显上调.结论 姜黄素能够上调Mfn2表达,促进线粒体融合进而抑制脓毒症小鼠脾淋巴细胞的凋亡.     

EICU脓毒性休克患者的临床特点及死亡危险因素分析

目的探讨急诊危重病监护室(EICU)脓毒性休克患者临床特点及死亡相关危险因素。方法回顾性调查2003年1月～2009年1月间入住笔者医院急诊科EICU的159例脓毒性休克患者临床资料,总结患者临床特点,采用单因素分析和多因素逐步Logistic回归,分析脓毒性休克死亡相关危险因素。结果 159例脓毒性休克患者中,男性96例(60.4%),女性63例(39.6%),平均年龄57.9±16.3岁,器官功能衰竭数目3.38±1.57个,腹部是最常见感染部位(45.3%),心血管系统疾病(38.4%)是最常见的基础疾病;总病死率53.5%(85/159),男性病死率高于女性(60.4%vs 42.9%,P<0.05);多因素逐步Lo-gistic回归显示:合并器官功能衰竭数目、静脉使用碳酸氢钠是脓毒性休克的死亡独立危险因素,血液净化及住院时间是保护因素。结论脓毒性休克的病死率极高,早期积极抢救,运用血液净化等多种抢救措施,防治器官功能衰竭是降低脓毒性休克病死率的关键。     

血液灌流对急性百草枯中毒兔氧化应激和基质金属蛋白酶及其抑制物的影响

目的 观察血液灌流(hemoperfusion,HP)对急性百草枯(PQ)中毒兔氧化指标和基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9及基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的影响,探讨HP对急性PQ中毒兔的治疗作用及机制.方法 将78只日本大耳白兔随机分成正常对照组(N组)6只、PQ中毒组(PQ组)24只、HP治疗组24只、空白对照组(HP对照组)24只.后3组动物分为1、3、7、21d4个观察时间组,N组给予5 ml生理盐水灌胃;PQ组每只兔经口一次灌胃PQ (50 mg/kg); HP治疗组兔经口一次灌胃PQ (50 mg/kg)后于1h内予活性炭HP治疗2h,HP对照组给予等量生理盐水灌注后1h内予无吸附柱灌流2h.分别测定不同处理后动物肺、肝脏、肾脏中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力,并用免疫组化SP法检测MMP-2和MMP-9及TIMP-1表达.结果 随观察时间的延长,PQ组和HP治疗组兔肺、肝、肾组织中MDA含量呈下降趋势,SOD及GSH-Px活力呈上升趋势.PQ组与HP治疗组肺、肝、肾组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1在第1天表达均增强,PQ组最为明显,随观察时间的延长,各种阳性表达仍呈较高水平.与N组比较,PQ中毒组和HP治疗组动物肺、肝、肾组织中SOD、GSH-Px活力明显降低,肺、肝、肾组织中MDA含量增高;肺、肝、肾组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1含量明显增加,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).与PQ组比较,HP治疗组动物肺、肝、肾组织中SOD、GSH-Px活力明显升高,MDA含量降低;肺、肝、肾组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1含量降低,但高于N组,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 急性PQ中毒引起的脏器损伤可能与氧化应激及基质金属蛋白酶异常变化有关,HP可能通过改善组织清除自由基的能力及下调兔肺、肝、肾组织中MMP-2、MMP-9和TIMP-1含量,上调组织中MMP-9/TIMP-1比值而发挥救治PQ中毒、保护脏器功能的作用.