mTOR负调控miR-27a并通过靶向降低GP73抑制人肝癌细胞侵袭

目的探索m TOR促进肝癌细胞侵袭能力机理。方法使用q-PCR方法检测miR-27a和GP73表达;将miR-27a的mimic转染GP73高表达的M97H细胞中,并将miR-27a inhibitor转入GP73低表达Hep G2细胞中,q-PCR和Western blot观察GP73的表达;使用荧光素酶报告基因系统验证miR-27a在GP73的3UTR区的结合位点;将miR-27a mimic转染GP73高表达的M97H细胞和GP73低表达的Hep G2细胞,Transwell实验观察细胞的侵袭。结果m TOR下调miR-27a,并上调GP73的表达;miR-27a下调GP73的表达,抑制miR-27a则上调GP73;GP73是miR-27a的靶基因;miR-27a显著抑制M97H细胞的侵袭,但对Hep G2细胞无抑制效果。结论 m TOR负调控的miR-27a靶向GP73抑制肝癌细胞的侵袭。     

全外显子组测序技术检出Kallmann syndrome患者KAL1基因新突变

目的 分析Kallmann syndrome家系患者的分子遗传机制.方法 利用全外显子组测序技术对先证者进行测序分析,按照ACMG解读规则筛选致病性突变,Sanger测序对所有家系成员验证突变结果.结果 捕获且比对到目标区的碱基量为3418.98Mb,平均测序深度为77.66X,覆盖度为99.23％,共检出5056个变异,3174为罕见变异（RSV）,KAL1基因c.1735_1736insT突变为疑似致病性突变,且满足家系共分离.结论 KAL1基因c.1735 1736insT框移突变为新的疑似致病性突变.     

肝癌新的血清标志物：可能改善肝癌早期诊断的现状

原发性肝癌是目前世界上致死率最高的恶性肿瘤之一,在全世界范围内的发病率有逐年上升的趋势。早期诊断对肝癌患者的预后至关重要。对于肝癌的高危人群,现在最常用的监测手段是定期检测血浆中甲胎蛋白(AFP)水平和影像学检查如超声等。然而,甲胎蛋白的敏感性和特异性都不令人满意。近年来,蛋白组学技术的发展使得筛选新的肿瘤标志物成为可能,各种有希望的新的肿瘤标志物被相继发现,其中高尔基体蛋白73(GP73)最有可能成为更好的诊断肝癌,尤其是早期肝癌的血清标志物。在仅有的少数报道中,其敏感性可达69%,特异性可达90%,而其异构体敏感性和特异性可达90%和100%。除此之外,新发现的肝癌患者血清中高表达的标志物有甲胎蛋白异质体(AFP-L3)、异常凝血酶原(DCP)、α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、磷脂酰基醇蛋白聚糖-3(GPC-3)、肝细胞生长因子(HGF)、转化生长因子β1(TGFβ1)、血管内皮生长因子(VEGF)、粘液素1(MUC-1,KL-1)等。这些新的血清标志物,正在被各种临床研究进行检测,有希望改变肝癌早期诊断和治疗的现状。我们正在进行GP73的大样本临床研究,取得初步结果。     

利用文献讨论课提高研究生的科学素质

提高研究生质量成为当前研究生教育改革的主要任务,课程建设为研究生教育的必要环节,对于提高研究生质量至关重要.而课堂教学作为课程建设中的前沿阵地,如何改变以知识传授为主的课堂教学方式,成为当前研究生教育改革的重要课题.我们借鉴了国外发达国家研究生教育中常见的课堂形式--文献讨论,在中国医学科学院2006级研究生中开设文献讨论课,取得了较好的效果.本文简要介绍并讨论了文献讨论课的意义、具体设置、学生意见反馈以及出现的问题和对策.     

微粒体谷胱甘肽S转移酶1过度表达促进肝癌发生发展

目的探讨微粒体谷胱甘肽S转移酶1(MGST1)在肝癌中的表达及其在肝癌细胞增殖、迁移和裸鼠成瘤中的作用。方法 Western blot检测人肝癌样品及肝癌细胞系中MGST1的表达;用慢病毒PLL3.7载体系统构建敲低MGST1的MHCC97H和HCCLM3细胞株及慢病毒p CDH载体系统构建过表达MGST1的SK-Hep-1细胞株后,用克隆形成实验检测细胞增殖能力;用Transwell实验检测细胞迁移能力;用皮下移植瘤实验检测MHCC97H细胞裸鼠成瘤能力。结果 71%(17/24)的肝癌组织中MGST1蛋白表达上调。敲低MGST1抑制MHCC97H和HCCLM3细胞的增殖、迁移能力(P0.05);过表达MGST1促进SK-Hep-1细胞增殖、迁移(P0.05);敲低MGST1的MHCC97H细胞裸鼠成瘤时间滞后(P0.01),肿瘤体积减小(P0.001),裸鼠生存期延长(P0.001)。结论 MGST1过度表达促进肝癌发生发展,是治疗肝癌的一个新靶点。     

雷帕霉素在免疫抑制和肿瘤抑制中的双重作用

雷帕霉素（rapamycin）是近年来应用较多的免疫抑制剂，它在肿瘤治疗中也发挥重要作用。雷帕霉素（rapamycin）与FKBP12结合，形成Rapamycin- FKBP12复合物，这一复合物抑制mTOR (mammalian target of rapamycin)的活性，进一步抑制mTOR下游的一系列分子的合成或功能。雷帕霉素可将免疫细胞滞留于G1期，阻止免疫细胞的增殖；抑制IL-2和其他的免疫分子的合成,从而发挥其免疫抑制作用。另一方面，对于肿瘤细胞，雷帕霉素抑制其生长和增殖，发挥肿瘤抑制作用。它的这一双重功能可应用在器官移植和肿瘤治疗的交叉领域。     

X连锁显性遗传性原卟啉症一家系及ALAS2基因突变分析

目的 报道中国人X连锁显性遗传性原卟啉症一家系,并对其5?氨基酮戊酸合成酶2（ALAS2）基因突变进行研究。方法 收集该家系成员资料,进行临床调查。用二代测序方法检测后再行Sanger测序,测定该家系中患病者及部分表型正常者ALAS2致病基因。用皮肤镜观察皮肤卟啉皮损,根据Fotofinder系统和甚高频皮肤超声系统评估皮肤卟啉症的光损伤严重程度,对该家系成员做肝胆B超检查,同时检测血液学改变。结果 该家系中所有患者X染色体的1706号到1709号碱基发生AGTG缺失,导致转录时移码突变,最终导致翻译得到的ALAS2酶C端19、20个残基替换或缺失,ALAS2酶活性升高。XLDPP患者皮肤光损伤显著,肝胆可出现卟啉损伤,随年龄增加而加重,可出现贫血和铁过载。结论 X染色体1706?1709碱基AGTG缺失突变可能是该ALDPP家系患者的发病原因。     

细胞衰老：阻碍癌基因致癌的机制

细胞衰老是生物体中普遍存在的一种永久性生长抑制现象,能够防止老化的或非正常细胞的进一步生长,对抗细胞的无限增殖能力而对机体起到保护作用。近年来,体内外研究表明,癌基因诱导的细胞衰老能够抑制肿瘤的发生,但一旦衰老机制缺陷,癌基因就可能刺激细胞无限增殖而导致恶性肿瘤,引起细胞衰老的机制目前还不是很清楚,但已发现ARF-P53和P16INK4 a-RB这两条途径的活化与细胞衰老的启动和调节过程密切相关。对细胞衰老的信号传导通路及其调节因子等方面的深入研究可能为肿瘤等重大疾病的预防和治疗提供帮助。