运用三色ＦＩＳＨ技术确定自然流产夫妇染色体微小区域倒位

摘要： 【目的】 对２例婚后妻子连续２次流产伴２１号染色体结构改变病例进行多探针荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）,探讨ＦＩＳＨ技术在临床诊断微小区域染色体结构异常的应用价值。【方法】通过染色体常规Ｇ 显带技术初步确定染色体结构异常类型及染色体断裂的区带位置,然后挑选位于２１号染色体长臂位点特异性ＢＡＣ克隆,缺口平移法将其标记为探针,与２１号染色体长臂末端的商品化探针混合,进行三色ＦＩＳＨ。【结果】ＦＩＳＨ结果排除了涉及其它染色体结构异常的可能,确定这２例均为２１号染色体长臂微小区段的臂内倒位,这是首次关于２１号染色体臂内倒位导致自发流产病例的报道。【结论】２１号染色体臂内倒位与自然流产相关;多色ＦＩＳＨ 技术在诊断和确定微小区域染色体结构异常中有非常重要的作用和应用价值。     

血浆同型半胱氨酸和叶酸及ＭＴＨＦＲ基因多态性与早产

【目的】 探讨孕妇血浆同型半胱氨酸水平（Ｈｃｙ）、叶酸水平及ＭＴＨＦＲ基因多态性与早产的相关性。【方法】 采用病例对照研究,选取４４０例分娩孕妇为研究对象,其中早产临产孕妇（ｃａｓｅ ｇｒｏｕｐ）、同孕周健康孕妇（ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ）各２２０例。用高效液相色谱荧光检测法（ＨＰＬＣ－ＦＤ）检测两组孕妇血浆同型半胱氨酸水平和叶酸水平差异;１４Ｃ 放射法测定两组孕妇ＭＴＨＦＲ的活性;Ｔａｑｍａｎ－ＭＧＢ技术检测两组孕妇ＭＴＨＦＲ基因的５个ＳＮＰ分型差异。【结果】 早产临产孕妇的血浆Ｈｃｙ 水平（μｍｏｌ／Ｌ）明显高于同孕周健康孕妇的血浆Ｈｃｙ水平 （７．５６ ± ２．９７ ｖｓ． ５．９６ ± ２．５４, Ｐ ＝ ０．０１５）,而早产临产孕妇的血浆叶酸水平（μｍｏｌ／Ｌ）明显低于同孕周健康孕妇血浆叶酸水平（１６．２１ ± ２．９１ ｖｓ． １８．５３ ± ３．４４, Ｐ ＝ ０．００２）。早产临产孕妇ＭＴＨＦＲ的活性（ｎｍｏｌ·ｍｇ－１·ｈ－１）明显低于同孕周健康孕妇ＭＴＨＦＲ的活性（１３．３３ ± ３．１６ ｖｓ． ２６．８６ ± ５．６３, Ｐ ＝ ０．０００）。在ＭＴＨＦＲ基因中ｒｓ１８０１１３１和ｒｓ１８０１１３３在早产临产孕妇组与同孕周健康孕妇组的基因型分布差异有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）。【结论】 早产儿孕妇血浆同型半胱氨酸水平受叶酸水平影响,并与ＭＴＨＦＲ基因ＳＮＰ分型密切相关。     

继发性意义未明的单克隆免疫球蛋白血症35例研究

 目的　研究继发性意义未明的单克隆免疫球蛋白血症（sMGUS）在接受不同治疗的多发性骨髓瘤（MM）患者中的发生率,分析其对患者的治疗反应和长期生存的影响。方法　回顾性分析515例MM患者的临床资料及血清免疫固定电泳（IFE）结果,分析sMGUS患者的IFE图谱特征,对sMGUS组和非sMGUS组疗效分布组成进行比较,对2组进行生存曲线分析。结果　515例MM患者中含接受自体造血干细胞移植（auto-SCT）治疗的患者73例,单纯联合化疗患者442例,共发现35例sMGUS,总发生率为6.8 %;经auto-SCT治疗和单纯联合化疗治疗后sMGUS的发生率分别为19.2 %（14／73）和4.8 %（21／442）,二者差异有统计学意义（χ2＝20.587,P＝0.002）;sMGUS组与非sMGUS组在初诊MM时的M蛋白类型分布差异无统计学意义（χ2＝6.396,P＝0.380）;sMGUS组与非sMGUS组完全缓解（CR）率分别为45.7 %（16／35）和14.3 %（59／480）,差异有统计学意义（χ2＝22.961,P＜0.001）,2组疗效分布组成经秩和检验分析,差异有统计学意义（P＜0.001）;经Kaplan-Meier法生存曲线分析,sMGUS组的中位生存时间为42个月（5～112个月）,非sMGUS组的中位生存时间为14个月（1～120个月）,二者差异有统计学意义（P＜0.001）,对auto-SCT治疗患者单独分析,经auto-SCT治疗后出现sMGUS的患者,中位生存时间为30.8个月（5～111个月）,未出现sMGUS的患者中位生存时间为39.3个月（2～120个月）,二者差异有统计学意义（P＝0.002）。结论　sMGUS的发生可能与免疫重建或经大剂量免疫抑制治疗后的免疫失调有关,MM经auto-SCT治疗后出现sMGUS的概率大于经单纯联合化疗治疗者,同非sMGUS患者相比,sMGUS患者有着更好的疗效和预后,但对于auto-SCT治疗患者,发生sMGUS并非是一个良好的预后因素。     

注射用丹参多酚酸盐联合培美曲塞及卡铂治疗老年人晚期非鳞非小细胞肺癌效果观察

目的 观察注射用丹参多酚酸盐联合培美曲塞及卡铂方案治疗老年人晚期非鳞非小细胞肺癌的效果和安全性。方法 经组织病理学或细胞学证实初治老年晚期非鳞非小细胞肺癌患者58例,通过区组随机化法分为对照组和观察组各29例。对照组给予培美曲塞＋卡铂方案化疗,观察组在对照组治疗基础上给予注射用丹参多酚酸盐200 mg／次,1次／d,静脉滴注,连用14 d。21 d为１个周期,4个周期后比较两组近期疗效、生活质量、不良反应发生及凝血指标改善情况。结果 观察组和对照组总有效率分别为44.8 %（13／29）、37.9 %（11／29）,疾病控制率分别为86.2 %（25／29）、75.8 %（22／29）, 两组近期疗效比较差异无统计学意义（P＞0.05）,观察组生活质量总改善率优于对照组[82.7 %（24／29）比65.5 %（19／29）]（P＜0.05）,血液学毒性和消化道反应发生率低于对照组（P＜0.05）,且观察组血液高凝状态改善情况优于对照组（P＜0.05）。结论 注射用丹参多酚酸盐联合培美曲塞、卡铂方案治疗老年人晚期非鳞非小细胞肺癌可降低化疗引起的不良反应,提高患者生活质量,改善肺癌患者的血液高凝状态,从而预防血栓栓塞性并发症的发生。     

胃癌及结肠癌术后早期肠内营养的临床应用

 目的 评价肠内营养（EN）对胃癌、结肠癌术后免疫功能及炎症反应的影响。方法 将58例行胃、结肠癌根治术后患者随机分为EN组和完全胃肠外营养（TPN）组，EN组于术后24 h开始将肠内营养混悬液（商品名：能全力）经鼻肠管滴入至患者能进流食。TPN组于术后进行TPN，肠蠕动完全恢复后开始进食。分别于术前第1天，术后第3、8天检测外周血IgA、IgG、IgM、C3、C4、CRP、淋巴细胞计数（LYM）、淋巴细胞（LYM）百分比、总蛋白（TP）、清蛋白（ALB）、前清蛋白（PA）。结果 术后第8天较术后第3天（除CRP外）EN组上述指标回升幅度[（0.926±0.468）g／L、（6.011±3.179）g／L、（0.754±0.465）g／L、（1.178±0.581）×109／L、（18.685±14.331）%、（63.875±32.436）mg／L]高于PN组[（0.081±0.527）g／L、（0.440±3.363）g／L、（0.093±0.449）g／L、（0.293±0.176）×109／L、（4.443±5.724）%、（34.571±31.701）mg／L]，差异有统计学意义（P＜0.05）；EN组CRP明显降低，对照组未降低，两组差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 胃、结肠癌患者术后早期接受EN较TPN支持能较好地提高患者免疫功能，降低炎症反应。     

申克孢子丝菌ＳＰＤＳ基因的生物信息学分析及分子克隆

【目的】 分析预测申克孢子丝菌ｃＤＮＡ中编号为Ｌｏｃｕｓ＿１６８＿Ｃｏｎｔｉｇ＿１序列编码的基因及蛋白质结构、功能特征,并进行分子克隆。 【方法】 利用ＮＣＢＩ及Ｅｘｐａｓｙ网站提供的ＢＬＡＳＴｘ、ＳｉｇｎａｌＩＰ、ＩｎｔｅｒＰｒｏ Ｓｃａｎ等生物信息学软件分析其序列,判断其是否为全长编码序列、同源序列名称,并分析其结构、定位及功能等;将其中的全长编码区利用ＰＣＲ方法进行扩增后克隆到ｐＥＴ－３０ａ（＋）载体,测序验证。 【结果】 该序列是亚精胺合成酶（ＳＰＤＳ）的同源基因,全长序列为１０６２ ｂｐ,包含完整的编码区１９０ ～ １ ０６２ ｂｐ,编码２９１个氨基酸,在ＧｅｎＢａｎｋ中,其与粗糙脉孢菌的ＳＰＤＳ基因同源性最高,达８８％。理化性质预测其编码蛋白疏水性高;无质体、线粒体等定位序列,不存在跨膜螺旋结构,为非分泌型蛋白。进化树分析结果显示与粗糙脉孢菌同源性最高;ＰＣＲ扩增及测序结果证实目的基因成功克隆进入ｐＥＴ－３０ａ（＋）质粒。【结论】 获得申克孢子丝菌ＳＰＤＳ的基因及蛋白结构、功能特点,构建了其重组表达质粒,将为进一步明确其在孢子丝菌病中的致病作用奠定理论基础。     

高度近视ＬＡＳＩＫ术后远期视觉相关生活质量调查

【目的】 研究高度近视患者ＬＡＳＩＫ术后远期视觉相关生活质量。【方法】 应用视觉相关生活质量调查问卷对８０例高度近视ＬＡＳＩＫ术后患者及８０例术前高度近视患者进行调查,同时对术后患者进行视力、屈光度及近对比敏感度检查,评估术后远期视觉相关生活质量及了解术后常见视觉障碍,评分越高,视觉障碍越严重。【结果】ＬＡＳＩＫ术后患者生活质量得分为（８．６ ± ８．２）分,低于术前对照组得分（１６．２ ± ８．９）分（Ｐ ＜ ０．０５）。视觉障碍阳性率发生较高的前６项条目,依次为电脑使用和阅读容易疲劳（２８．８％）、近视力感受变差（２２．６％）、夜间视物模糊（２２．６％）、眼干涩不适（２０．１％）、眩光（２０％）、夜间驾驶困难（１７．５％）。其中电脑使用和阅读引发视疲劳与术后视力、高空间频率（１８ｃｐｄ）呈负相关（ｒ ＝ －０．２５７、－０．２６５）;近视力感受变差与术后视力呈负相关（ｒ ＝ －０．３０６）,与术后屈光度存在正相关（ｒ ＝ ０．２７０）;夜间视物模糊与术后视力、低空间频率（３ｃｐｄ）存在负相关（ｒ＝ －０．４３６,－０．２２６）,与术后屈光度存在正相关（ｒ＝ ０．４７８）;眩光与术后视力、各空间频率存在负相关（ｒ ＝ －０．２６５ ～ －０．４０８）,与术后屈光度存在正相关（ｒ ＝ ０．３４２）;夜间驾驶困难与术后视力、高空间频率（１８ｃｐｄ）呈负相关（ｒ ＝－０．３５１、－０．２４９）,与术后屈光度存在正相关（ｒ ＝ ０．３６９）。【结论】 ＬＡＳＩＫ手术能有效改善高度近视患者远期的视觉生活质量。电脑使用和阅读容易疲劳是ＬＡＳＩＫ术后远期高度近视患者最常见视觉障碍。     

甲钴胺联合康复治疗对脑卒中后肩手综合征合并抑郁的影响

目的 探索甲钴胺联合康复治疗对脑卒中后肩手综合征合并抑郁的影响。方法 将123例脑卒中后出现肩手综合征合并抑郁的患者随机分为A、B、C三组,A组给予肌肉注射甲钴胺联合康复治疗,B组给予肌肉注射甲钴胺治疗,C组单给予康复治疗。观察三组患者治疗前后汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、视觉模拟评分法(VAS)、Brunnstrom分期变化、简式Fugl-Meger运动功能(FMA)、Barthel指数(BI)分值的变化。结果 A组较治疗前HAMD、VAS分值明显下降,FMA、BI分值明显升高,Brunnstrom分期明显改变,HCY水平明显下降;B组HCY水平、HAMD有所下降,VAS、FMA、BI分值及Brunnstrom分期无明显变化;C组各项分值较治疗前无明显变化;脑卒中后肩手综合征与抑郁的发生呈正相关,抑郁程度与同型半胱氨酸水平呈正相关。结论 脑卒中后肩手综合征与抑郁的发生有关,抑郁与同型半胱氨酸水平有关。甲钴胺联合康复治疗可明显促进患者神经功能的恢复并明显改善其抑郁的状况,且治疗的不良反应较少,是临床值得推广的一种综合治疗方法。     

中国南方人群遗传性痉挛性截瘫ＳＬＣ３３Ａ１基因的突变检测

【目的】 ＳＬＣ３３Ａ１基因已被报道是我国北方一个ＨＳＰ家系的致病基因,但研究未发现在欧洲的ＨＳＰ患者中有该基因的突变。本研究的目的是检测ＳＬＣ３３Ａ１是否为中国南方人群中遗传性痉挛性截瘫患者的致病性基因之一。【方法】 对收集到的７０例中国南方散发遗传性痉挛性截瘫的患者,提取基因组ＤＮＡ,并进行ＳＬＣ３３Ａ１基因所有编码外显子及外显子－内含子交界区域的直接测序;鉴定所发现的遗传变异,并同我们所收集到的５７例无血缘关系的正常人进行比对,以及生物信息学分析。【结果】我们只发现 ＳＬＣ３３Ａ１基因区域的８个已存在于数据库中的单核苷酸多态性,未发现任何致病性突变。【结论】 与国外学者的报道相符合,我们的７０例中国南方ＨＳＰ病人中没有ＳＬＣ３３Ａ１所导致的病人,故 ＳＬＣ３３Ａ１对ＨＳＰ的致病性需要进一步的核实、研究。     

食管、贲门癌手术前肺功能评估与术后急性呼吸窘迫综合征的相关性

 目的　研究食管、贲门癌术前肺功能试验、屏气试验、登梯试验与术后发生急性呼吸窘迫综合征（ARDS）的相关性，为临床诊断与治疗提供依据。方法　回顾性分析该院2002年至2004年胸心外科行剖胸探查食管、贲门癌根治术患者577例。分析术前肺功能试验的3个主要指标：第一秒用力呼气容积占预计值百分比（FEV1），第一秒用力呼气容积与用力肺活量比值（FEV1／FVC），最大通气量占预计值百分比（MVV）以及屏气试验、登梯试验、年龄等与术后发生ARDS的关系。结果　577例患者中，21例术后发生ARDS（3.64 %）。年龄与FEV1和MVV的交互作用与ARDS的发生密切相关（P＜0.001）。FEV1、FEV1／FVC、MVV 3个指标中，任何两个指标的交互作用均与ARDS的发生相关（P值分别为0.001、0.005、0.048）。屏气试验、FEV1、FEV1／FVC、MVV 4个指标的交互作用与ARDS的发生密切相关（P＜0.001）。术前重度肺功能受损的26例患者中，术后随即入ICU15例，发生ARDS 1例（6.67 %）。其余11例术后回病房，发生ARDS 4例（36.3 %），术后早期加强监护治疗能明显降低ARDS发生（P＜0.05）。结论　食管、贲门癌术前肺功能试验、屏气试验、登梯试验与术后ARDS的发生有相关性，术后早期加强监护治疗是预防术后ARDS的重要手段。