金属蛋白酶类及其抑制剂在椎间盘退变中作用研究进展

椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IVDD)可导致多种脊柱相关疾病的发生.细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)的降解被认为是IVDD的主要病理过程.基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)及含凝血酶敏感蛋白模体的解整合素样金属蛋白酶(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motif,ADAMTSs)是参与ECM降解的主要蛋白酶类.本文总结在IVDD中MMPs、ADAMTSs及金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinases,TIMPs)的基因表达调控相关研究.研究发现人IVDD中MMP-1、2、3、7、8、10、13,ADAMTS-1、4、5出现表达上调,TIMP-3下调、TIMP-1上调.MMPs、ADAMTSs的表达受多因素共同调节,包括机械应力、炎症、氧化应激等,部分参与P38途径.遗传因素也在MMP 1、2、3、9的表达中起重要作用.MMPs、ADAMTSs蛋白表达及酶活性的上调导致ECM降解,进一步导致IVDD的发展.未来的治疗将靶向于导致ECM病理降解的特定MMPs及ADAMTSs.     

弥散张量成像参数比值对脊髓型颈椎病临床症状及预后的评估价值

目的 探讨磁共振(MR)弥散张量成像(DTI)的表观扩散系数(apparent diffusion coefficient,ADC)比值、各向异性分数(fractional anisotropy,FA)比值对脊髓型颈椎病(CSM)的临床症状及预后的评估价值.方法 对入选的50例CSM患者及36例正常对照人群进行MRI及DTI检查,选择脊髓白质前索、侧索、后索和中央灰质4个部位作为感兴趣区(ROI),CSM组测量和计算脊髓受压最重平面与C1/2平面的ADC比值和FA比值,正常对照人群测量和计算C3/4、C4/5、C5/6、C6/7平面与G1/2平面的ADC比值、FA比值.对比正常对照人群不同节段、不同年龄间DTI参数比值的差异;对比DTI参数(ADC、FA)和参数比值(ADC比值、FA比值)与CSM患者临床症状(JOA评分)及预后(JOA改善率)相关性的差异;CSM患者按术前JOA评分分为轻度损伤组、中度损伤组、重度损伤组,比较各组间DTI参数比值的差异;按术后JOA改善率分为优、中、差3组,比较各组间DTI参数比值的差异.结果 正常对照人群不同年龄组间4个部位ADC比值、FA比值间差异无统计意义;C3/4、C4/5 、C5/6 、C6/7各平面间脊髓白质前索、侧索、后索ADC比值、FA比值差异均有统计学意义(P＜0.05).相关分析显示:脊髓前索、侧索、后索和中央灰质的ADC比值、FA比值与JOA评分、JOA改善率相关性优于ADC值、FA值(P＜0.05或P＜0.01),且FA比值优于ADC比值.与正常对照人群相比,轻度损伤组、中度损伤组、重度损伤组患者ADC比值逐渐升高,FA逐渐降低,差异有统计学意义(P＜0.05);与正常对照人群相比,改善率为优、中、差3组CSM患者ADC比值逐渐升高,FA比值逐渐降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 DTI参数比值可消除年龄因素的影响,与CSM患者症状及预后有更优的相关性,可能具有较好的CSM临床症状及预后评估价值.     

3D打印技术制备个体化终板匹配颈椎间融合器的初步尝试

目的：探讨3D打印制备个体化颈椎间融合器的可行性并验证其终板匹配性。 方法：选取经福尔马林浸泡的成人新鲜尸体标本10具,男女各5具。截取标本的颈1-颈7节段,行CT平扫并将平扫图像导入Mimics软件,制作个体化颈5/6椎间融合器模型。通过3D打印机打印出椎间融合器。对每具标本施行颈5/6椎间隙减压植骨术。术后再次行CT检查,通过打印椎间融合器与上下终板之间的间隙来评价终板匹配性,每个椎间融合器测量36个点,间距＜1mm,匹配性优;1mm≤间距＜2mm,匹配性良;间距≥2mm,匹配性差。 结果：大体观察发现椎间融合器与椎间隙嵌合度较好,融合器植入后稳定性较好,无融合器过大不能置入发生,无融合器松动脱落。6例标本（60%）所有测量点匹配性均为优;3例标本（30%）中14个点（3.89%）匹配性良,其中1例6个点、另2例各4个点匹配性良;1例标本（10%）中共3个点（0.83%）匹配性差;共计343个点（95.28%）匹配性优。 结论：Mimics软件可很好呈现颈椎椎体和椎间隙解剖结构,并可据此进行颈椎Cage的个体化设计;利用3D打印可实现颈椎Cage产品快速成型,且打印产品与宿主终板匹配满意。     

TK基因在垂体腺瘤治疗中的作用

目的探讨胸苷激酶（TK）基因在垂体腺瘤治疗中的作用及其机制。方法应用免疫印迹法,检测AdGHTK质粒转染GH3细胞后TK基因的表达情况;使用非放射性细胞增殖检测法,测定不同感染复数（MOI）AdGHTK转染后的GH3细胞对更昔洛韦的敏感性;将转染AdGHTK的GH3细胞和未转染细胞以不同比例混合,观察旁观者效应。结果TK基因可转染入GH3细胞并成功表达;即使在低MOI下,转染组细胞成活率也随更昔洛韦浓度的增加而降低;存在旁观者效应。结论将TK基因导入GH3细胞并经更昔洛韦处理,可明显降低肿瘤细胞存活率,为垂体腺瘤的治疗提供了可靠的理论依据。     

球囊注射压迫法建立山羊颈脊髓慢性压迫模型

目的 验证一种新型颈脊髓慢性压迫动物模型建立方法的可行性.方法 选取18只崇明山羊,随机分为实验组(15只)和对照组(3只).通过前路手术将球囊压迫装置固定在C3椎体内,实验组术后每周经皮向注射阀注射0.1 ml造影剂,使球囊缓慢膨胀,对颈脊髓产生慢性压迫;对照组放置压迫装置后即刻取出,术后每周仅经皮穿刺但不注射造影剂.每4周采用Tarlov评分法对动物进行行为学评价,在全麻下进行颈椎X线、CT、MRI检查,并处死2只取压迫节段脊髓进行病理学观察.结果 对照组各时间点Tarlov评分均为5分.实验组术后4周(n=13)Tarlov评分不变;术后8周时(n=11)有2只Tarlov评分为4分,9只5分;术后12周时(n＝9)有3只Tarlov评分为2分,4只3分,2只4分.影像学检查示对照组脊髓未见明显异常;实验组球囊压迫系统表现稳定,随着时间推移,脊髓逐渐受压.病理学检查显示对照组未见明显异常.实验组术后4周未见明显异常;术后8周受压节段脊髓前角内神经元数量减少,胞体周围间隙增大,白质轻度脱髓鞘,部分轴突空泡变性;术后12周白质出现片状脱髓鞘区和空泡变性.结论 术后实验动物行为学、影像学和组织学检查符合慢性压迫性颈脊髓病特点,说明新型球囊注射压迫系统可以辅助建立稳定、可靠的慢性颈脊髓压迫动物模型.     

miRNA在急性脊髓损伤病理生理调节机制中的作用研究进展

急性脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）是中枢神经系统的严重损伤,是一种严重威胁人类生命健康的疾患。早期、全面的医疗干预和康复治疗对减轻脊髓损伤程度和提高患者的生活质量有着极其重要的影响。急性SCI存在两种机制：机械压迫导致的初次损伤和其后多种生物机制导致的二次损伤[1],受伤当时的暴力性质决定初次损伤的程度,随后启动包括自由基损伤、细胞凋亡、炎症反应等二次损伤,其具体分子机制、如何减轻并逆转二次损伤一直是近年来的研究热点[2]。     

TK 基因治疗库欣病的实验研究

目的：探讨胸苷激酶（ TK）基因在库欣病的基因治疗中的作用及机制。方法采用免疫印迹法检测腺病毒载体AdPOMCTK转入小鼠垂体瘤AtT20细胞及人乳腺癌T47D细胞后TK基因的表达情况;采用非放射性细胞增殖检测试剂盒检测AdPOMCTK在不同感染复数（ MOI）下转染AtT20细胞和人T47D细胞后对更昔洛韦（ GCV）的敏感性。将转染了AdPOMCTK的AtT20细胞和未经转染的细胞以不同比例混合,观察旁观者效应。结果 TK基因转染入AtT20细胞并成功表达,但在T47D细胞中表达不明显,说明POMC启动子具有靶向性;即使在低MOI下,转染组细胞仍明显表现出对GCV的敏感性;混合细胞与对照细胞相比杀伤作用明显,说明旁观者效应存在。结论将TK基因导入AtT20细胞并经GCV处理后可明显降低细胞存活率。本研究为临床TK基因治疗库欣病奠定了实验基础。     

人颈椎间盘髓核组织中SOX9与COL2A1基因的表达及其意义

目的 观察不同退变程度的人颈椎间盘髓核(nucleus pulposus,NP)组织中性别决定基因组9(SOX9)、Ⅱ型胶原α1(COL2A1)的表达差异,并探讨此差异在人颈椎间盘退变(cervical intervertebral disc degeneration,CIDD)发生发展中的意义.方法 收集在我院行手术治疗的36例颈椎病或颈椎外伤患者的NP组织及术前颈椎MRI(T2加权像正中矢状位)资料,采用Miyazaki分级系统评估退变程度.用免疫组织化学法观察SOX9、COL2A1在NP组织中的表达定位,用荧光定量(FQ) RT-PCR、蛋白质印迹分析法检测SOX9、COL2A1在mRNA及蛋白水平上的表达量,分析其表达水平与CIDD程度间的关系,初步探究SOX9和COL2A1间的相互作用.结果 SOX9在NP细胞胞核中表达,COL2A1在细胞外基质中表达;随着CIDD退变程度的加重,两者的mRNA和蛋白表达水平均逐渐降低;且以SOX9表达量为自变量(X) 、COL2A1表达量为应变量(Y)的直线回归方程为Y=0.923X-0.059(P＜0.001).结论 随着CIDD程度加重,SOX9与COL 2A1基因表达水平逐渐降低,两者下降趋势相近,SOX9正向调控COL2A1的表达,提示SOX9与COL2A1基因功能改变可能是CIDD的分子机制之一.     

改良经皮球囊导管法建立山羊急性脊髓损伤模型

目的 探讨应用经皮穿刺技术向椎管内置入球囊导尿管致急性脊髓压迫性损伤动物模型的方法.方法 12只崇明山羊分为对照组(A组)、0.5 ml压迫组(B组)和1 ml压迫组(C组).选择腰-骶椎板间隙体表投影处为穿刺点,局麻后使用血管经皮穿刺鞘管,将5Fr球囊导尿管输送至硬膜外腔,透视下确认导尿管头端到达T6水平.1周后分别以0.5和1 ml容量扩张B、C组导尿管球囊,持续压迫脊髓30 min后撤除.各组动物均在穿刺操作及球囊扩张前后接受CT和MRI检查,计算球囊导管的椎管侵占率,并采用改良Tarlov评分评估神经功能.分别于球囊扩张后48 h及72 h处死每组各2只动物,取压迫节段脊髓送检病理.结果 所有动物均顺利置管.CT测得置管后A～C组椎管侵占率依次为6.8％±0.7％、6.7％±0.7％和6.6％±0.6％.扩张球囊后B、C组椎管内侵占率分别增加到43.4％±2.5％和88.1％ ±2.3％;MRI提示球囊扩张后对脊髓腹侧右侧半形成压迫.置管后各组动物神经功能无明显受损,球囊扩张后B、C组出现后肢运动障碍.除A组外,病理检查显示球囊扩张压迫48 h后,相应节段脊髓呈现灰质内神经元胞体缩小,数量减少,胞体周围间隙增大,白质轻度脱髓鞘,部分轴突空泡样变;压迫72 h后病理改变明显加重.结论 球囊扩张后神经、影像和病理学的评估结果符合急性脊髓压迫性损伤的特点.经皮穿刺置管技术能够避免破坏脊髓正常生理环境,模拟符合临床实际的闭合损伤机制,是一种可行性较高的脊髓损伤建模方法.     

乳腺恶性腺肌上皮瘤1例报告

1 病例资料 患者女性,47岁,因"右侧乳房外上象限肿块4个月"就诊,查体:右侧乳房外下象限可扪及一实性无痛性肿块,大小2.0 cm×2.0 cm,质稍硬,边界欠清楚,与皮肤无明显粘连,活动度尚可.腋下无淋巴结肿大.