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目的 建立一种能够快速鉴定人参和西洋参的双重实时荧光PCR方法。方法 通过对人参属及其近似种基因序列的分析比对,设计特异性的引物探针,建立双重实时荧光PCR检测方法。PCR反应体系为Premix Ex Taq (Probe qPCR) 10 μL,人参上下游引物各0.5 μL,西洋参上下游引物各0.3 μL,人参与西洋参特异性探针各0.4 μL,DNA模板2 μL,灭菌去离子水补至20 μL。反应条件为95℃预变性30 s;然后以95℃变性5 s,60℃退火延伸30 s进行40个循环。应用该方法测试了27份DNA样品,包括7份人参、6份西洋参、4份人参与西洋参混合样、10份其他人参属样品及其他常见中药材样品的DNA,以确定该方法的特异性。将人参与西洋参样品DNA混合后10倍稀释成不同浓度后进行检测,用以确定该方法的灵敏度。结果 人参及西洋参样品均在特定的荧光通道下出现典型的阳性扩增曲线,人参与西洋参混合样品均同时出现两条阳性扩增曲线,其它对照样品及空白对照均没有出现阳性扩增曲线。灵敏度检测结果显示该方法检测人参及西洋参的最低检测限均为2 pg DNA/反应。结论 本实验建立的双重实时荧光PCR方法能够同时快速、准确、灵敏地鉴别出人参和西洋参。 相似文献
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目的分析多学科会诊(MDT)模式对结肠癌患者术后胃肠功能恢复及并发症的效果评价。方法将2017年1月至12月收治的50例结肠癌患者作为对照组,给予常规干预措施;将2018年1月至12月收治的50例结肠癌患者为观察组,采取MDT模式干预。比较两组患者的胃肠功能恢复情况及一般围手术期指标;干预前和干预后2周,采用世界卫生组织生存质量评估量表(WHOQOL-BREF)评估两组患者的生活质量;术后3天,采用视觉模拟评分法(VAS)评估两组患者腹胀发生情况;比较两组患者术后并发症发生情况。结果观察组患者肛门排气时间、首次排便时间、肠鸣音恢复时间、禁食时间、伤口愈合时间、住院时间、术后下床时间均短于对照组患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。干预后2周,两组患者环境领域、社会领域、心理领域、生理领域及总体健康评分均高于本组干预前,且观察组患者环境领域、社会领域、心理领域、生理领域及总体健康评分均明显高于对照组患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。术后3天,观察组患者的腹胀程度低于对照组患者,差异有统计学意义(P﹤0.05)。观察组患者术后并发症总发生率为6.0%,低于对照组患者的20.0%,差异有统计学意义(P﹤0.05)。结论MDT模式干预可促进患者术后胃肠功能恢复情况,缩短伤口愈合时间及住院时间,降低术后并发症发生率,并改善了患者的生活质量。 相似文献
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9.
目的探讨程序性死亡受体1(PD-1)和程序性死亡受体配体1(PD-L1)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达情况及临床意义。方法选择150例NSCLC患者的NSCLC组织及其癌旁组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测两种组织中PD-1 mRNA和PD-L1 mRNA的相对表达量。采用免疫组织化学染色法检测NSCLC组织中PD-1和PD-L1的表达情况,分析PD-1和PD-L1表达情况与患者临床特征的关系。采用流式细胞术检测NSCLC组织和癌旁组织中CD4^+-PD-1、CD8^+-PD-1、CD14^+-PD-L1、CD68^+-PD-L1的表达水平。结果NSCLC组织中PD-1 mRNA和PD-L1 mRNA的相对表达量分别为(5.03±1.92)和(4.95±1.09),分别高于癌旁组织的(1.72±0.81)和(1.25±0.24),差异均有统计学意义(P﹤0.05)。TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、低分化、有淋巴结转移、有远处转移的NSCLC患者NSCLC组织中PD-1和PD-L1的高表达率均明显高于TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期、高+中分化、无淋巴结转移、无远处转移的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。NSCLC组织中CD4^+-PD-1、CD8^+-PD-1、CD14^+-PD-L1、CD68^+-PD-L1的表达水平均明显高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。结论PD-1和PD-L1在NSCLC组织中高表达,可能成为一种新的生物标志物,PD-1/PD-L1信号通路可能参与了NSCLC的免疫逃逸过程,对其逃逸机制进行研究可以为NSCLC患者的临床治疗提供新靶点。 相似文献