消旋卡多曲对老年大鼠脑内淀粉样蛋白水平的影响

目的探讨消旋卡多曲对老年大鼠脑内β-淀粉样蛋白的水平的影响。方法 30只老年SD大鼠随机分为空白对照组,消旋卡多曲高剂量组,消旋卡多曲低剂量组。消旋卡多曲高、低剂量组,连续4 w,1次/d,给予不同剂量消旋卡多曲灌胃,空白对照组灌以等量20%PEG400溶液。灌胃结束后,酶联免疫吸附法(ELISA)测定大脑及外周血中Aβ1⁴0、Aβ140、Aβ1⁴2和脑啡肽酶(NEP)的含量,病理检查观察大脑海马区的病理改变情况。结果 ELISA结果显示,与空白对照组相比,消旋卡多曲各剂量组脑组织Aβ142和脑啡肽酶(NEP)的含量,病理检查观察大脑海马区的病理改变情况。结果 ELISA结果显示,与空白对照组相比,消旋卡多曲各剂量组脑组织Aβ1⁴0、Aβ140、Aβ1⁴2水平较对照组显著升高(P<0.05),NEP水平有下降的趋势,仅高剂量组差异有显著性(P<0.05);空白对照组与消旋卡多曲各剂量组在外周血液中Aβ142水平较对照组显著升高(P<0.05),NEP水平有下降的趋势,仅高剂量组差异有显著性(P<0.05);空白对照组与消旋卡多曲各剂量组在外周血液中Aβ1⁴0、Aβ140、Aβ1⁴2和NEP的含量均无明显差异(P>0.05);病理检查发现消旋卡多曲各剂量组大脑海马CA3区及齿状回神经元较空白对照组明显减少。结论超量应用消旋卡多曲可促使脑组织中Aβ水平升高,有增加老年大鼠AD发病风险的可能。     

附子与山茱萸配伍对慢性心力衰竭大鼠的影响

目的探讨附子与山茱萸配伍对慢性心力衰竭大鼠增效减毒作用。方法 ip盐酸阿霉素构建大鼠慢性心力衰竭模型,分别给予附子提取物、山茱萸提取物和附子-山茱萸提取物3周后,检测动物血清脑钠素(BNP)含量,心肌细胞Ca2+-ATP酶和Na~+,K~+-ATP酶活性,镜下观察左心室组织病理学形态变化。结果造模3周后,模型组大鼠普遍出现腹水、消瘦、稀便、弓背等症状体征;左心室射血分数(EF)和左心室短轴缩短率(FS)明显下降;血清BNP水平显著升高;左心室组织出现心肌纤维断裂及心肌细胞变性、坏死等病理改变。连续ig给予附子-山茱萸提取物3周后,大鼠症状及体征明显改善,血清BNP水平下降,心肌细胞Na~+,K~+-ATP酶活性升高,左心室组织病理学形态有明显改善。附子提取物和山茱萸提取物分别连续给药3周,上述指标未见明显改善。结论附子与山茱萸配伍可能通过提高心肌细胞Na~+,K~+-ATP酶活性,改善慢性心力衰竭的心肌能量代谢障碍,提高心力衰竭的心肌活性,起到增效减毒作用。     

实验室病原菌检测能力的自我评估

目的 通过国际实验动物科学协会(ICLAS)提供的盲样对本实验室微生物检测能力进行自我评估.方法 将ICLAS提供的7个盲样接种到血平板培养并纯化,依次通过革兰染色、氧化酶试验和触酶试验选择相应的梅里埃生化条上机进行鉴定.对于上述方法无法确认的样品则采用PCR和基因测序的方法进一步鉴别.结果 对7个盲样进行分析后,最终确认1号为金黄色葡萄球菌,2号为铜绿假单胞菌,3号为肺炎链球菌,4号为欣氏鲍特菌,5号为粘质沙雷菌,6号为牛棒状杆菌,7号为嗜肺巴斯德杆菌,检测结果与ICLAS提供结果一致.结论 本实验室病原菌检测质量可靠,实验人员的检测水平合格.     

DHA促NGF诱导的PC12细胞分化与BMPs通路关系的研究

目的探讨DHA对神经生长因子NGF诱导PC12细胞的分化作用及其对BMP通路的影响。方法分别用100μg·L-1NGF和100μg·L-1NGF+10μmol·L-1DHA处理PC12细胞,并在3、6、9 d进行免疫荧光染色,观察细胞突起长度和突起数目的变化;气相色谱法分析3、6、9 d NGF+DHA组与NGF组PC12细胞的DHA含量;Western blot法检测NGF+DHA组与NGF组中BMP4、BMP7、BMPR-Ⅱ和pSmad 1/5/8蛋白的表达。结果 NGF+DHA处理组与NGF组相比,突起数目和突起长度明显增多和增长(P<0.01);胞内的DHA含量明显增加(P<0.01);BMP4、BMP7、BMPR-Ⅱ和p-Smad 1/5/8蛋白的表达升高(P<0.05)。结论 DHA能促进NGF诱导的PC12细胞分化,其机制可能与上调BMPs蛋白表达有关。     

中国大陆柯萨奇病毒A组16型全基因参照序列的初步建立和分析

目的建立中国大陆柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)流行株的全基因参照序列。方法从GenBank中获得CoxA16中国大陆分离株的所有全基因序列和氨基酸序列,用DNAstar/MegAlign软件对所得序列进行多序列比对和进化分析,按照参照序列标准拟定CoxA16的全基因参照序列和氨基酸序列,并与参考序列进行比对分析。结果中国大陆分离的CoxA16毒株全基因序列共8株,分离于2005-2009年,其中2008年5株,广东省5株;通过序列比对获得了大陆CoxA16全基因和氨基酸参照序列;参考毒株间核苷酸序列同源性介于79.0%～98.8%,氨基酸序列同源性为94.3%～99.9%,与参照序列的核苷酸同源性为79.7%～97.0%,氨基酸同源性介于95.1%～99.5%之间,同源性最低的为2008年安徽阜阳的FY18株。结论比对分析了中国大陆CoxA16毒株全序列,成功建立了中国大陆CoxA16全基因和氨基酸参照序列。     

禽流感H5N1亚型病毒感染BALB/c小鼠的免疫应答

目的 研究禽流感H5N1病毒感染BALB/c小鼠后对宿主细胞免疫功能和细胞因子水平变化的影响,探讨禽流感H5N1病毒感染哺乳动物的免疫发病机制.方法 选用鹅源禽流感H5N1病毒感染BALB/c小鼠,采用流式细胞仪检测血液和脾脏T淋巴细胞及其亚群的变化,采用ELISA检测血液中细胞岗子(IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-18、IL-10、IL-2)及禽流感H5N1病毒特异性抗体的变化.结果 禽流感H5N1病毒感染可引起对宿主短暂的、可恢复的细胞免疫功能损伤:血液CD3+、CD4+、CD8+ T淋巴细胞数量于染毒后第2～4天下降(第4天为最低值),脾脏T淋巴细胞数最于染毒后第5～8天下降(第6天为最低值),然后均逐渐恢复到正常水平.染毒后血液细胞因子变化表现为:血清IFN-γ、TNF-α水平下降,IL-4、IL-18、IL-10水平上升,IL-2水平无明显变化.从感染第7天开始检测H5N1禽流感特异性抗体为阳性,抗体水平逐渐升高至实验结束的感染第14天.结论 H5N1禽流感病毒感染可引起宿主T细胞免疫功能低下是其主要的免疫病理改变之一,细胞因子表达失平衡或过多的表达都可能对宿主产生免疫病理损伤.

Abstract：

Objective To study the cell immunity and eytokines responses to avian influenza A H5N1 virus infections in a BALB/c model to better understand the pathogenesis of H5N1 avian influenza disease. Methods Two hundred and twenty BALB/c mice of the infected group were inoculated with 0.1 ml (10-4.875 TCID50) of A/Goose/Guangdong/NH/2003 ( H5N1 ) virus intra-nasally. Fifty control mice received noninfectious allantoic fluid and another fifty control mice received normal sodium. Blood and spleen samples were collected from the live mice every 24 h during the 14 d post-infection. The changes of CD3 + T cells , CD4 + T cells, CD8 + T cells for cell immunity in blood circulation and spleen were detected by flow cytometry. And the cytokines and antibody responses in blood circulation were detected by ELISA. Necropsy was performed on mice that died during the experiment and those euthanized at end of study. Results Avian influenza A( H5N1) virus infections can make damages to the cell immune system transiently. The CD3 + T cells, CD4 + T cells, CDS + T cells declined at 24 days post infection in blood circulation and declined at 5-8 days in spleen, then recovered to the normal level gradually. The eytokines responses to the infections can be detected: the level of IFN-γ,TNF-α declined, IL-4, IL-18, IL-10 increased, and IL-2 changed little. The antibody increased rapidly from day 7 post infection until the end of the study (day 14 post infection). Conclusion Collectively, avian influenza A(H5N1) virus can cause cell immunity deficiency and an imbalance in the level of eytokines, which may contribute to the unusual severity of disease caused by the H5N1 avian influenza virus.     

中国大陆EV71病毒分离株的分子流行病学研究

目的了解1987-2010年中国大陆肠道病毒71型（EV71）分离株的分子流行病学特点及其种系进化、基因分型和遗传变异性。方法从GenBank/NCBI上获得中国大陆来源的具有完整VP1或近似完整VP1基因的核苷酸序列信息的413株EV71毒株进行分析,采用MEGA5.0软件,构建系统进化树,计算相同或不同基因型及基因亚型毒株的核苷酸与氨基酸的相似性。结果 1987-2010年,中国大陆20个省、市或地区均分离到具有完整VP1序列的毒株,且2008年以来数量陡增;中国大陆流行的主要是C型,只有2008年安徽和2009年湖北发现了A型;各基因型在43、58、142、164、167、184、240、249、292等氨基酸位点发生了特异性变异;从健康人体内分离的HQ129932毒株与其他序列比较,氨基酸无特异性变异。结论 C型株可能具有更强的传染力;氨基酸位点变异对于EV71病毒进化有重要意义;VP1基因与疾病的严重程度无明显关联;应加强C4a亚型疫苗候选疫苗株对其他基因型毒株的交叉保护作用研究。     

恒河猴大脑注射Aβ1-42 和Thiorphan对胆碱能神经元影响的研究

目的 观察颅内灌注Aβ1-42和Thiorphan给药后恒河猴基底、核大脑皮质等部位胆碱能神经元的改变.方法 将恒河猴4只,分为对照组(1只)与实验组(3只),对照组开颅后只注射0.9%氯化钠溶液,实验组开颅后先注射Thiorphan到猕猴的基底核和大脑皮质消耗已存在的Neprilysin,然后再缓慢的注射孵育好的纤丝状Aβ1-42,再植入含有Thiorphan的微渗透泵到基底核.免疫组织化学方法检测大脑切片胆碱乙酰转移酶(ChAT)免疫反应活性及阳性神经元数量及形态学改变.结果 给药后实验组恒河猴基底核、皮质等部位的胆碱能神经元数量减少和ChAT水平降低.结论 Aβ1-42和Thiorphan联合颅内给药后损害大脑基底核、皮质等部位的胆碱能神经元.     

注射用头孢曲松钠溶血性、局部刺激性和过敏反应一致性评价

目的 采用溶血性、血管刺激性试验、肌肉刺激性试验和全身主动过敏试验（ASA）检测受试物注射用头孢曲松钠与市售对照品（罗氏芬）局部毒性和过敏性,进行一致性评价。方法 分别采用肉眼观察法和分光光度法进行体外溶血性试验;以受试物或市售对照品临床iv最高浓度（93 mg·mL^-1）连续4 d耳缘静脉推注给药进行新西兰兔血管刺激性试验;以临床im最高浓度（238 mg·mL^-1,给药体积1 mL）连续4 d右后肢股四头肌im给药进行新西兰兔肌肉刺激性试验;采用传统豚鼠ASA进行过敏性试验,致敏剂量分别0.5、1.5 mg·kg^-1,激发剂量分别为1.0、3.0 mg·kg^-1。结果 肉眼观察法和分光光度法均显示受试物及市售对照品无体外溶血和红细胞凝聚作用;临床等效剂量的受试物及市售对照品均无血管刺激性;最大给药浓度的受试物及市售对照品在末次给药后72 h均有重度肌肉刺激性,恢复期结束时受试物组与市售对照品组动物注射部位肌肉均见纤维化等正常修复现象;受试物及市售对照品均可见弱阳性全身致敏作用,结果具有一致性。结论 受试物注射用头孢曲松钠与市售对照品局部毒性反应和过敏反应情况基本一致,可用于临床。     

BMPs 在中枢神经系统发育和神经保护中的作用

骨形态发生蛋白（Bone morphogenetic proteins,BMPs）是转化生长因子-β（transforming growth factor -β）超家族的成员,现已经发现 BMPs 很多亚型 BMP 分子在神经系统的不同区域呈持续性表达,但是表达在空间和时间具有差异性,提示不同亚型 BMPs 的功能在神经系统也存在差异。本文主要就 BMPs 在中枢神经系统发育中的作用和神经保护功能作一综述。