异丙酚通过NLRP3/IL-1β信号通路影响脂多糖诱导的肺泡巨噬细胞M1/M2表型分化

目的研究异丙酚对脂多糖诱导的肺泡巨噬细胞的免疫应答影响及相关机制进行初步探讨。方法分离大鼠原代肺泡巨噬细胞(AMs),并将细胞分为4组:对照组(control组:常规培养AMs),脂多糖组(LPS组:加入终质量浓度为1 000 ng/L脂多糖),异丙酚组(P组:加入终浓度为25μmol/L异丙酚),脂多糖+异丙酚组(LPS+P组:加终质量浓度为1 000 ng/L的LPS和25μmol/L异丙酚)。4组细胞常规培养24 h后,应用ELISA检测4组细胞培养上清液中IL-1β、IL-10、TNF-α的含量;细胞流式实验检测4组细胞表面F4/80、CD16/32、CD206分子表型所占比例;免疫磁珠分选F4/80+细胞,并利用RT-PCR检测细胞中iNOS、CD206的mRNA表达变化;最后应用RT-PCR及Western blot实验检测4组细胞中NLRP3/IL-1β信号通路中NLRP3、IL-1β及Caspase-1的mRNA及蛋白表达变化。结果 ELISA实验显示,异丙酚能够明显抑制LPS所诱导的AMs对促炎因子IL-1β、TNF-α的分泌,且促进细胞对抑炎因子IL-10的分泌;细胞流式及RT-PCR实验结果显示,异丙酚能够明显抑制LPS所诱导的AMs向M1型巨噬细胞分化,并促进细胞向M2型巨噬细胞分化;RT-PCR及Western blot实验结果显示,异丙酚能够明显抑制LPS所诱导的AMs中NLRP3/IL-1β信号通路中NLRP3、IL-1β及Caspase-1的m RNA及蛋白表达。结论异丙酚能够通过下调NLRP3/IL-1β信号通路抑制LPS所诱导的AMs向M1表型的分化,并促进细胞向M2表型的分化。     

干扰素-γ受体1部分缺陷病临床及分子特征分析

目的本研究纳入1例8月龄时发生播散性卡介苗病的女性患儿,旨在探讨IFNGR1缺陷病的临床及分子特征。方法总结1例常染色体显性遗传IFNGR1部分缺陷病患儿临床资料,Q-RT-PCR检测IL-12-IFN-γ轴功能,流式细胞术检测PHA刺激的T细胞表面IFNGR1蛋白表达,Sanger测序法分析IFNGR1基因。结果患儿常规免疫功能无异常。患儿抗凝血经BCG+rhIFN-γ同时刺激后IL-12B的表达水平比单独使用BCG刺激略有增加(P0.05),但较健康对照显著降低(P0.05);IFNGR1蛋白表达高于健康对照。基因测序发现患儿IFNGR1第6外显子存在c.819_822del4(p.N274Hfs*2)杂合突变,父母均无此突变。结论常染色体显性遗传IFNGR1基因部分缺陷病极为罕见,易发生播散性分枝杆菌感染,应尽早检测IL-12-IFN-γ轴功能、相关蛋白表达并行基因分析确诊。     

SMILE术中角膜帽下地塞米松平衡液冲洗与否的早期临床观察

目的观察飞秒激光小切口角膜基质透镜取出术(SMILE)中角膜帽下地塞米松平衡液冲洗与否对术后视觉质量及角膜组织结构形态的影响。方法选择拟进行双眼SMILE手术的24例(48眼)纳入研究,每例患者随机选取一眼透镜取出后,行地塞米松平衡液冲洗角膜帽下基质腔隙(实验组),对侧眼不冲洗(对照组)。分别于术后第1天、第7天及1个月对比观察两组的裸眼视力、屈光状态、角膜中央厚度(CCT)、眼压(NCT);同时利用共焦显微镜及前段光学相干断层扫描(OCT)检查对比观察两组角膜上皮细胞、神经纤维、基质细胞、内皮细胞形态结构。采用配对t检验比较两组的裸眼视力、屈光状态等各指标有无差异。结果术后第1天、第7天及1个月两组间裸眼视力比较:实验组为4.99±0.07、5.06±0.08、5.05±0.06;对照组为5.01±0.07、5.05±0.08、5.06±0.09;3个时间点两组间裸眼视力均无统计学差异(P均>0.05);术后第1天、第7天及1个月的屈光度(SE,D):实验组为0.03±0.49、0.1±0.37、0.02±0.4;对照组为0.09±0.54、0.19±0.48、0±0.52,3个时间点两组间SE比较均无统计学差异(P均>0.05)。共焦镜检查不同时间点比较:角膜上皮层细胞密度[术前(4578.73±268.40,4539.57±329.25)个/mm^2,术后第1天(4565.21±247.31,4627.23±271.03)个/mm^2,术后第7天(4640.01±246.79,4517.71±281.43)个/mm^2];角膜内皮细胞密度[术前(2541.50±259.59,2443.52±305.58)个/mm^2,术后第1天(2387.01±248.55,2495.27±238.52)个/mm^2,术后第7天(2484.49±223.71,2482.53±323.82)个/mm^2],术前术后两组间均无统计学差异(P>0.05);角膜上皮下神经纤维丛术前术后两组间比较无明显变化;切削界面高反光物两组间比较没有明显差异;角膜前基质细胞密度[术前(789.51±67.17,802.03±67.94)个/mm^2,术后第1天(889.37±60.62,912.27±95.87)个/mm^2,术后第7天(796.67±75.03,818.39±59.65)个/mm^2]在术后第1天、第7天较术前均有增加,但两组之间没有统计学差异(P>0.05),术后1 d两组前基质细胞较术前增加,有统计学差异(P<0.05);角膜后基质细胞术后各时间点两组间比较无统计学差异(P>0.05)。角膜OCT在术后1 d、7 d两组在角膜帽下均未出现明显层间间隙和积液,两组间角膜中央厚度无统计学差异(P>0.05)。结论SMILE术中地塞米松平衡液角膜帽下冲洗对术后裸眼视力、屈光度及角膜组织结构形态无明显影响。     

负性共刺激分子Tim-3和Galectin-9在子宫颈脱落细胞中的表达

目的:了解负性共刺激分子T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(Tim-3)和半乳糖凝集素-9(Galectin-9)在不同病变的子宫颈脱落细胞中的表达情况,以探讨负性共刺激分子与子宫颈癌发生、发展的关系。方法:收集2015年8月至2015年10月于西安交通大学第一附属医院妇产科就诊患者子宫颈脱落细胞标本84例。其中正常子宫颈(NC)17例、低级别鳞状上皮内病变(LSIL)22例、高级别鳞状上皮内病变(HSIL)25例、子宫颈鳞状细胞癌(CC)20例。免疫细胞化学检测Tim-3、Galectin-9蛋白在子宫颈脱落细胞中的表达。结果:免疫细胞化学检测显示Tim-3在NC和异常子宫颈脱落上皮细胞的胞核和胞浆中均有表达,其在NC、LSIL、HSIL、CC中的表达率分别为82.35%、59.09%、52.00%、30.00%,HSIL和CC与NC相比差异有统计学意义(P0.05)。Galectin-9表达于NC和异常子宫颈脱落上皮细胞的胞核中,NC、LSIL、HSIL、CC中的表达率分别为23.53%、36.36%、60.00%、85.00%,HSIL和CC与NC相比差异有统计学意义(P0.05)。在人乳头瘤病毒(HPV)感染的子宫颈脱落细胞中,Tim-3呈高表达(P=0.000),Galectin-9(P=0.015)呈低表达。结论:在NC、LSIL、HSIL、SCC的脱落细胞中Tim-3表达逐级降低、Galectin-9表达逐级增高,这一表达模式可能与子宫颈病变进展和HPV感染有关。     

X- 连锁迟发性脊椎骨骺发育不良一家系TRAPPC2 基因变异分析

目的分析由TRAPPC2基因变异致X连锁迟发性脊椎骨骺发育不良(SEDT-XL)的临床及基因变异特点。方法回顾分析1个SEDT-XL家系的临床资料及基因检测结果。结果先证者,9岁2个月,因生长缓慢就诊,语言、运动及智力发育正常。身高115 cm(-3SD),臂间距109 cm,上部量56 cm,下部量59 cm,体质量21 kg,招风耳,尖下颌,牙列不齐,颈短,脊柱侧弯,心肺腹未见异常。采集先证者及其父母和舅舅的外周血行全外显子测序,结果显示先证者TRAPPC2基因4号外显子区域存在1个半合子变异c.115delC,导致氨基酸改变p.Q39Sfs*3。该半合子变异来自其母亲,其舅舅存在相同的半合子变异位点。结论 TRAPPC2基因4号外显子区域c.115delC突变为该家系SEDT-XL的致病原因。     

自身免疫性甲状腺疾病患儿血清FasL、IL-17水平及与甲状腺抗体的相关性

目的检测自身免疫性甲状腺疾病(AITD)患儿血清脂肪酸合成酶配体(Fas L)、白细胞介素-17 (IL-17)及甲状腺自身抗体水平,探究它们之间的相关性。方法选取2017年1月-2019年1月丽水市中医院和日照市中医医院收治的AITD患儿97例,其中桥本甲状腺炎(HT) 41例、格雷夫病(GD) 56例,同期招募50名健康志愿者作为对照组。采集各受试者静脉血,酶联免疫吸附法(ELISA)检测个受试者血清可溶性脂肪酸合成酶配体(s Fas L)、IL-17水平,化学发光法检测血清甲状腺自身抗体Tg Ab、TPOAb水平,Pearson检验分析s Fas L、IL-17与各因子相关性。结果与健康儿童比较,HT组和GD组患儿血清s Fas L、IL-17、Tg Ab、TPOAb抗体水平均显著增高(P<0. 05); Pearson分析显示,HT、GD患儿血清s Fas L水平与IL-17、Tg Ab、TPOAb水平呈正相关(P<0. 05),血清IL-17水平与s Fas L、Tg Ab、TPOAb水平呈正相关(P<0. 05)。结论 AITD患儿体内存在高s Fas L水平和高IL-17水平,二者呈正相关,可能共同参与AITD疾病发生。