BRCA1调节乳腺癌细胞黄体酮受体A和B蛋白的表达

目的 研究BRCA1能否在乳腺癌细胞中调节黄体酮受体A和B的表达.方法 在乳腺癌细胞MCF-7中,用lipofectamine 2000转染含有野生型BRCA1 cDNA的pFlag-CMV2-BRCA1 wt质粒或BRCA1特异性的小干扰RNA,过表达BRCA1或敲低BRCA1的表达.转染24 h以后,加入含有100 nmol/L黄体酮完全培养基刺激24 h.提取全细胞蛋白或总RNA,进行Western blotting和RT-PCR检测BRCA1、黄体酮受体A(PRA)和黄体酮受体B(PRB)在蛋白质水平和mRNA水平的表达.结果 在MCF-7细胞中过表达BRCA1,PRA和PRB蛋白的表达下降,而PRA和PRB在mRNA水平无变化;BRCA1的表达被敲低后,PRA和PRB的表达升高.结论 在乳腺癌细胞中,外源性和内源性BRCA1都可以下调PRA和PRB蛋白的表达.     

凋亡抑制蛋白Survivin和血管内皮生长因子在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的 探讨肝细胞癌(HCC)组织中凋亡抑制蛋白Survivin与血管内皮生长因子(VEGF)表达的相关性及其临床意义.方法 应用免疫组织化学方法检测50例HCC组织和20例正常肝组织中Survivin、VEGF蛋白的表达,并将检测结果与临床病理特征进行综合分析.结果 (1)50例HCC组织中Survlvin、VEGF蛋白的阳性表达率分别为64.0％(32/50)、68.0％(34/50),在正常肝组织中的表达率分别为0％(0/20)、10％(2/20),差异有显著性(P<0.05);(2)Survivin、VEGF蛋白表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、分化程度、AFP值均无相关性(P0.05),而与f临床分期及转移相关(P<0.05);(3)Survivin、vEGF蛋白表达呈正相关关系(x2=6.69,P<0.05).结论 Survivin和VEGF蛋白在HCC中表达率较高,为肝癌的分子靶向治疗提供了新的靶点;Survivin和VEGF在HCC中的表达关系密切,测定HCC中Survivin、VEGF蛋白的表达,有助于临床判断病人预后.     

人血小板衍生生长因子BB原核表达及生物学活性鉴定

目的 表达人血小板衍生生长因子(PDGF)BB蛋白并进行生物学活性鉴定.方法 基因扩增方法获得人PDGF-B基因;原核表达PDGF-BB蛋白,并纯化、复性;免疫印迹分析重组蛋白的免疫原性;应用培养的大鼠成骨细胞对其生物学活性进行鉴定.结果 扩增出327bp目的基因,与预期结果吻合,DNA序列分析正确.SDS-PAGE和免疫印记检测表明获得新生蛋白的分子量及免疫原性均与预期符合.体外细胞学鉴定表明,获得的rhPDGF-BB可明显促进大鼠成骨细胞的增殖和DNA复制,表明重组的PDGF-BB具有较好的生物学活性.结论 PDGF-B成熟肽基因克隆成功并成功地在大肠杆菌中实现了高表达.复性后细胞学MTT和FCM鉴定表明获得的rhPDGF-BB具有较好的生物学活性,为生产活性PDGF-BB蛋白及其在促进骨组织和创伤修复方面的进一步功能研究奠定了基础.     

VEGF、HER-2蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义

目的 研究胃癌组织中表皮生长因子受体2(HER-2)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达与临床病理特征及.生存期的关系,探讨其作为胃癌预后指标的可行性.方法 应用免疫组织化学方法检测具有随访资料的103例胃腺癌标本中VEGF、HER-2蛋白的表达,并将检测结果与临床病理特征进行综合分析.结果 (1)103例胃癌组织中VEGF、HER-2蛋白的阳性表达率分别为46.6%(48/103)、31.1%(32/103),在胃正常组织中均无表达;(2)VEGF、HER-2蛋白表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、部位、分化程度均无相关性(P>0.05),而与肿瘤的浸润深度、病理分期、淋巴结转移、远处转移相关(P<0.05);(3)VEGF、HER-2蛋白表达阳性患者中位生存时间分别为12.0、10.1个月,表达阴性患者中位生存时间分别为60.0、64.5个月,表达阳性与阴性患者间生存时间有显著性差异(P<0.05);(4)VEGF与HER-2蛋白联合表达与生存期相关(PVEGF=0.000,PHER-2=0.000,RRVEGF=7.183,RRHER-2=0.129),两者的阳性表达有降低胃癌患者生存时间的危险,VEGF阳性表达的危险度相对较大.结论 测定胃癌组织中VEGF、HER-2蛋白的表达,有助于临床判断病人预后为Avastin和Herceptin等分子靶向治疗药物在胃癌的应用提供了理论依据.     

高强度聚焦超声联合腹腔镜治疗肌壁间子宫肌瘤

目的 探讨高强度聚焦超声（HIFU）联合腹腔镜肌瘤剔除术（LM）治疗肌壁间子宫肌瘤的效果。 方法 选取LM治疗肌壁间子宫肌瘤患者30例（腹腔镜组）,和HIFU联合LM治疗肌壁间子宫肌瘤患者30例（联合组）,对比两组患者在手术时间、术中出血、肛门排气时间、血红蛋白降低值、下床时间、伤口愈合时间、术后病率、住院时间、疼痛强度、月经恢复时间、排卵率、妊娠率、复发率,探究两种治疗方式的临床效果。 结果 联合组在手术时间、术中出血、肛门排气时间、血红蛋白降低值和术后病率显著低于腹腔镜组（P<0.05）,下床时间、伤口愈合时间、住院时间、疼痛强度、月经恢复时间、排卵率、妊娠率等在两组间的差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 HIFU联合LM治疗肌壁间子宫肌瘤可缩短手术时间、减少术中出血、降低术后病率,值得在临床上提倡。       

香烟烟雾提取物刺激下人支气管上皮细胞内质网应激对线粒体融合功能的影响

目的 探讨在香烟烟雾提取物(cigarette smoking extract,CSE)作用下人支气管上皮细胞(NHBE)中内质网应激对线粒体融合功能的影响.方法 体外培养NHBE,用CCK8法检测CSE不同浓度及不同时间干预对细胞存活率的影响,确定CSE干预的最佳浓度及时间.实验分为4组:对照组,内质网应激抑制剂(4-PBA)组,CSE干预组,4-PBA+ CSE组,并分别给予相应浓度CSE及4-PBA干预.qPCR及Western blot法检测内质网应激特异性蛋白CHOP及线粒体融合蛋白2(MFN2)的表达.结果 细胞的生存率随CSE干预浓度及时间的增加而下降,CSE最佳干预浓度为5％,时间为12 h.与正常对照组比较,CSE干预组CHOP表达增加,MFN2表达下降,差异有统计学意义[mRNA水平上均值差(I-J)分别为4.17,0.67;蛋白水平上均？差分别为3.38,1.26;P值均＜0.05];4-PBA+ CSE组与CSE干预组比较,CHOP表达下降,MFN2表达增加,差异有统计学意义[mRNA水平上均值差(I-J)分别为2.47,0.41;蛋白水平上均值差分别为1.90,0.85,P值均＜0.05].结论 CSE作用下NHBE发生内质网应激,内质网应激通过减少MFN2影响线粒体融合.     

盆腔超声对女童中枢性性早熟的诊断价值

目的探讨盆腔超声对女童中枢性性早熟(CPP)的临床诊断价值。方法选取因乳腺发育初次就诊的女童219例,以促性腺激素释放激素激发试验阳性(黄体生成素峰值5 U/L)为诊断金标准,将患儿分为CPP组128例和单纯性乳腺早发育(PT)组91例,经盆腔超声分别测量并比较两组患儿子宫和卵巢的长径、前后径、横径、体积,以及最大卵泡直径。对超声测量参数与黄体生成素峰值进行相关性分析;绘制超声诊断CPP的受试者工作特征(ROC)曲线,并计算其曲线下面积。结果 CPP组子宫的长径和体积、卵巢的长径和体积,以及最大卵泡直径均显著大于PT组[(2.51±0.43)cm vs.(1.93±0.29)cm,(1.86±1.08)ml vs.(1.06±0.51)ml;(2.58±0.50)cm vs.(2.02±0.51)cm,(1.81±1.09)ml vs.(0.98±0.46)ml;(0.67±0.17)cm vs.(0.21±0.12)cm)],差异均有统计学意义(均P0.05)。CPP组的子宫长径、子宫体积、卵巢长径、卵巢体积及最大卵泡直径与黄体生成素峰值均呈正相关,其ROC曲线下面积分别为0.70、0.81、0.59、0.63及0.88。结论经盆腔超声测量子宫卵巢各形态学参数对CPP有一定的诊断价值,其中以子宫体积和最大卵泡直径的诊断价值最高。     

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱和HPV基因测序分型检测阴道自取样本用于子宫颈癌筛查的有效性研究

目的评价不同保存形式的阴道自取样本联合激光辅助解析/飞行时间质谱技术(MALDI-TOF)和HPV基因测序分型检测技术(SEQ HPV)用于宫颈癌筛查的有效性。方法 319例研究对象来自北京大学深圳医院门诊和子宫颈癌筛查项目中因异常宫颈细胞学和(或)高危型HPV阳性者需行阴道镜检查的妇女。采集液体载体、FTA固体卡和POI固体卡三种形式的阴道自取样本三份和医取样本一份。四种样本分别行PCR法(Cobas 4800)、MALDI-TOF和SEQ HPV法高危型HPV检测。结果 (1)MALDI-TOF检测阴道自取样本与Cobas4800检测医取样本比较,高危型HPV的一致率:液体载体88.58%,FTA卡83.04%,POI卡87.89%;对应的HPV16/18的一致率为97.58%、93.77%和97.23%;检测CIN2及以上病变(CIN2+)的敏感度为93.44%、88.52%和95.08%。(2)SEQ HPV检测阴道自取样本与Cobas 4800检测医取样本比较,高危型HPV的一致性:液体载体89.62%,FTA卡86.85%,POI卡89.97%,对应的HPV16/18的一致为97.23%、95.50%和97.23%;检测CIN2+的敏感度为96.72%、93.44%和96.72%,两者比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论与Cobas 4800检测医生取宫颈细胞样本比较,MALDI-TOF和SEQ HPV两种方法用于自取阴道宫颈脱落细胞样本高危型HPV的检测一致性较高;对于高级别宫颈病变,其筛查灵敏度无显著差别。     

母牛分枝杆菌疫苗联合生长激素改善AIDS患者免疫重建不良的效果研究

目的 研究母牛分枝杆菌疫苗联合生长激素改善获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者免疫重建不良的效果.方法 选取患者135例作为研究对象,随机分为4组,A组肌肉注射母牛分枝杆菌疫苗,B组肌肉注射重组人生长激素,C组采用安慰剂治疗,D组肌肉注射母牛分枝杆菌疫苗+重组人生长激素.疗程为48周,治疗后分别检测各组患者体内静脉血纯...     

龙岩市某地环境重金属含量水平调查

[目的]为了解龙岩市某区域内一般环境中重金属污染情况,为今后防治提供科学依据.[方法]对调查区域内的环境随机定点,采集样品进行Pb、Cd、Cu、Cr、Zn、Hg、As含量分析.[结果]土壤中Pb为2.5～127.1 mg/kg.超标严重,超标率为86.4%(19/22).其他金属镉Cd为0.067 2～0.545 mg/kg、Cu为8.4～40.4 mg/kg、Cr为2.5～127.1 mg/kg、zn为28.5～460.4 mg/kg、Hg为0.001～0.572 mg/kg、As为0～2.62 mg/kg;稻、鱼、鸡、鸭、猪中,Cr为0～27.4mg/kg,超标严重,超标率为86.49%(32/37).鱼中铬最高含量27.4 mg/kg.是标准的13.7倍.其他金属Pb为0～0.117mg/kg、Cu为0～0.525 mg/kg、Cd为0～0.303 mg/kg、Zn为2.78～37.9 mg/kg、Hg为0～0.009 2 mg/kg、As为0～0.13 mg/kg;水中各金属都未检出.[结论]调查区域内一般环境中重金属含量有的己严重超过国家相关的标准,能引起人群的慢性毒害,应引起有关部门的重视.