Met-RANTES对内皮细胞与T细胞相互作用的影响

目的：探讨趋化因子拮抗剂Met-RANTES对内皮细胞与异体T细胞趋化、黏附作用的影响.方法：采用T细胞与血管内皮细胞混合培养的方法,观察使用趋化因子拮抗剂Met-RANTES干预前后内皮细胞趋化因子的表达,以及血管内皮细胞对T细胞趋化、黏附率的变化.结果：血管内皮细胞与T细胞混合培养可见内皮细胞表达RANTES、MCP-1及MIP-1α,RANTES的表达率增高.趋化因子拮抗剂Met-RANTES可以显著影响内皮细胞对T细胞的趋化和黏附.结论：趋化因子在淋巴细胞趋化及黏附内皮细胞的过程中发挥着重要作用,而趋化因子拮抗剂Met-RANTES可以显著影响内皮细胞与异体T细胞的趋化与黏附作用.     

LPS诱导肺微血管内皮细胞ICAM-1的表达及NF-κB作用的实验研究

目的研究LPS诱导的肺微血管内皮细胞 (PWVEC)ICAM -1的表达及调控机制。方法100ng/mlLPS刺激PMVEC0h、2h、4h、6h、8h或10ng/ml、50ng/ml、100ng/mlLPS刺激6h ,免疫细胞化学检测PMVECICAM -1的表达。凝胶电泳迁移率变化分析检测NF -κB的活化。并通过加入活化阻断剂PDTC观察对PMVECICAM -1表达的影响。结果PMVECICAM -1的表达与LPS的刺激呈时相 -剂量依赖方式。LPS的刺激迅速活化NF -κB ,60min达到高峰 ,后逐渐下降。PDTC能显著降低ICAM -1的表达 (P<0 .01)。结论LPS刺激诱导NF-κB的活化 ,启动ICAM -1的合成表达。     

PF4与造血及肿瘤关系的研究进展

趋化因子 (chemokine CK)是一组分子量较小的细胞因子家族。近 10年来有关趋化因子及其受体的研究进展迅速 ,研究发现多种 CK对骨髓造血、肿瘤生长均起着重要调节作用 ,其中血小板第四因子 (platelet factor4 ,PF4 )日益受到重视 ,本文就 PF4与造血及肿瘤关系的研究进展做一综述。1　 PF4的理化特生趋化因子根据氨基酸序列中 2个保守的半胱氨酸 (cys)的相对位置而分成 C- C、 C- X- C、 C、 CX3C四个亚族 ,其中PF4属于 C- X- C家族 ,还包括 IL - 8、中性粒细胞激活肽(NAP- 2 )、基质细胞衍生因子 (SDF- 1) ,其 N端不含 EL R(…     

妊高征患者肿瘤坏死因子、白介素6与N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶检测的意义

肿瘤坏死因子(TNF)和白介素6(IL-6)作为炎症介质和免疫调节因子在血管内皮细胞的发生、调控方面起着重要的作用;而妊高征时肾小球毛细血管内皮细胞过度增生,造成肾近曲小管溶酶体的改变,释放N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG),NAG可作为肾脏损害的早期灵敏指标.本研究旨在探讨妊高征患者TNF、IL-6与NAG的相关性及其临床意义.     

大鼠肾小球内皮细胞分离培养和鉴定

1.材料和试剂：（1）材料：SD大鼠1-2月龄,体重50-100g,雌雄各半,由东南大学医学院实验动物中心提供。Mini MACS免疫磁珠细胞分选仪、磁性分离柱LS购自Miltenyi Biotec公司。（2）试剂：Ⅳ型胶原酶、内皮细胞生长因子、胰蛋白酶及转铁蛋白均购自Sigma公司,DMEM培养基购自Gibco公司,异硫氰酸荧光素标记的抗CD34-FITC、抗波形蛋白及抗角蛋白均购自Santa Cruz公司,抗FITC免疫磁珠购自Miltenyi Biotec公司。     

清热化瘀方联合HP-BMSCs移植对脑缺血损伤大鼠CD31表达的影响

目的:观察清热化瘀方联合缺氧预处理(HP)骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对脑缺血损伤大鼠血管新生标志物CD31表达变化及神经功能的影响。方法:将120只大鼠随机为6组:假手术组(SO组)、模型组(MCAO组)、BMSCs移植对照组(BMSCs组)、HP-BMSCs移植组(HP-BMSCs组)、BMSCs移植联合清热化瘀方组(中药对照组)以及HP-BMSCs移植联合清热化瘀方组(中药干预组),各组根据取材时间点又分为7天、14天两个亚组,每个亚组10只大鼠。线栓法建立大鼠大脑中动脉梗阻模型,根据分组情况给予清热化瘀颗粒灌胃及经尾静脉移植BMSCs或HP-BMSCs,参照m NSS评分法进行神经功能评分,采用免疫组化染色法检测血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)及Brdu标记的BMSCs细胞。结果:与MCAO组比较,中药对照组、中药干预组、HP-BMSCs组、BMSCs组神经功能评分显著减少,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。与SO组比较,其它各组CD31表达均显著上调,中药干预组上调的最为明显,差异均有统计学意义(P0.01)。与HP-BMSCs组比较,BMSCs组神经功能评分增加,CD31表达下降,Brdu标记的阳性细胞数较低;中药干预组神经功能评分显著减少,CD31表达明显上调,Brdu标记的阳性细胞数显著增多,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。与中药对照组比较,中药干预组神经功能评分明显减少,CD31表达量显著增加,Brdu标记的阳性细胞数显著增多,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:清热化瘀方联合HP-BMSCs移植可改善脑缺血损伤SD大鼠的神经功能,可能和其促进大鼠脑缺血区血管新生标志物CD31的表达相关。     

补肾活血法治疗退行性骨关节炎临床观察

目的:观察补肾活血法治疗退行性骨关节炎的临床疗效。方法:将48例退行性骨关节炎患者,按照随机数字表法分为2组各24例。对照组给予洛索洛芬钠片口服,观察组给予补肾活血方口服。比较2组治疗总有效率,治疗前后血清血管内皮细胞生长因子(VEGF)和促血管生成素-1(Ang-1)水平。结果:总有效率观察组为91.7%,对照组为62.5%,2组比较,差异有统计学意义(χ~2=5.779,P=0.016)。治疗前,2组血清VEGF、Ang-1水平比较,差异均无统计学意义(P0.05)。与治疗前比较,治疗后2组上述指标均降低(P0.01),治疗后观察组血清VEGF、Ang-1水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P0.01)。2组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(χ~2=0.762,P=0.333)。结论:补肾活血法治疗退行性骨关节炎,可有效减轻患者的疼痛,改善其膝关节功能,疗效确切,其治疗机制可能与降低血清VEGF、Ang-1水平有关。     

蛇床子素通过Akt/eNOS降低氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞凋亡

目的:探讨蛇床子素对低密度脂蛋白诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)凋亡的影响及其机制研究。方法:采用HUVEC细胞,设置正常组、模型组和给药组,细胞培养12 h后,低密度脂蛋白进行细胞损伤,同时给予不同浓度蛇床子素(10、20、40μmol/L)进行干预,应用MTT法检测细胞活力;Annexin V-FITC标记的流式细胞术检测细胞凋亡;检测一氧化氮生成量;免疫印迹法检测p-AKt和p-eN OS蛋白表达水平。结果:与正常组相比,模型组细胞活力和凋亡率有显著差异;与模型组相比,蛇床子素提高细胞活力,抑制细胞细胞凋亡,作用效果呈剂量依赖性,20、40μmol/L蛇床子素均有显著性差异;与模型组相比,20、40μmol/L蛇床子素显著促进细胞一氧化氮合成;蛋白质检测结果显示,与模型组相比,蛇床子素可上调HUVEC细胞中Akt和eN OS蛋白磷酸化水平。结论:蛇床子素能够抑制ox-LDL诱导HUVEC的凋亡而发挥其保护作用,其作用机制可能与其激活Akt/eNOS/NO的信号通路相关。     

Transwell小室共培养条件下微血管内皮细胞对成骨细胞增殖、凋亡的影响

背景 骨微血管在骨稳态维持过程中发挥着重要作用,"血管-成骨耦联"现象已经成为目前临床医学工作者关注的焦点问题,揭示微血管内皮细胞与成骨细胞之间的相互调控关系将为骨相关疾病的临床治疗提供新的思路.目的 探究在共培养条件下,微血管内皮细胞bEnd.3对成骨细胞MC3T3-E1增殖、凋亡的影响.方法 利用Transwell小室建立MC3T3-E1/bEnd.3共培养体系,分别设置对照组(单独培养MC3T3-E1细胞)和共培养组(MC3T3-E1细胞和bEnd.3细胞共同培养).CCK-8实验检测两组MC3T3-E1细胞增殖活性的变化,PI单染流式细胞术检测两组MC3T3-E1细胞周期的变化,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测两组MC3T3-E1细胞凋亡率的变化,Western blotting检测两组MC3T3-E1细胞PCNA、Bax、Cleaved Caspase-3等增殖/凋亡相关蛋白的表达变化情况.结果 与单独培养的MC3T3-E1细胞相比,共培养组的MC3T3-E1细胞增殖活性显著增强(P<0.05),S期细胞比例显著增高(P<0.01),G2/M期细胞比例显著增高(P<0.05),PCNA表达升高(P<0.01),凋亡率下降(P<0.05),Bax和Cleaved Caspase-3表达降低(P<0.05).结论 在Transwell小室共培养条件下,微血管内皮细胞bEnd.3能够显著促进成骨细胞MC3T3-E1的增殖,并抑制其凋亡.     

Sirt1抑制由ox-LDL诱导的人冠状动脉内皮细胞的炎症反应

目的：探讨Sirt1对动脉粥样硬化中人冠状动脉内皮细胞炎症反应的影响。方法：选取人冠状动脉内皮细胞,分别用不同浓度的ox-LDL诱导并筛选出最适浓度建立体外动脉粥样硬化细胞模型;将细胞分为正常对照组、空质粒对照组、空质粒+ox-LDL组、Sirt1过表达+ox-LDL组、Sirt1干扰+ox-LDL组;用荧光显微镜观察质粒转染情况;qPCR和Western Blot验证Sirt1、ICAM-1的表达情况;用ELISA法检测炎症因子IL-1、hs-CRP的表达水平。结果：100 mg/L ox-LDL诱导体外动脉粥样硬化细胞模型效果最佳;与正常对照组和空质粒对照组相比,空质粒+ox-LDL组ICAM-1、IL-1、hs-CRP表达升高;与空质粒+ox-LDL组相比,Sirt1过表达+ox-LDL组ICAM-1、IL-1、hs-CRP表达降低,而Sirt1干扰+ox-LDL组则升高。结论：Sirt1能够抑制人冠状动脉内皮细胞中由ox-LDL诱发的炎症反应。