大鼠脑室系统出血模型的建立

目的 探讨建立稳定、制作过程简单、创伤小的大鼠脑室系统出血模型的方法 . 方法 取大鼠自体动脉血立体定向下注入右侧侧脑室建立大鼠腩室系统出血模型,对模型组和对照组大鼠在不同时间点进行神经行为学评分,并观察脑室及室周脑组织病理变化. 结果本方法 模型成功率为88.9%(16/18),注血后6h大鼠出现行为异常,7d后行为异常好转;光镜下观察发现注血后24h模型组大鼠室管膜连续性遭到破坏,细胞间隙增宽,室周脑组织轻度水肿及出现红色坏死神经元. 结论 本研究采用的造模方法 模型稳定,制作创伤小,病理变化接近临床.     

河南汉族缺血性脑卒中患者凝血因子Ⅶ基因R353Q多态性检测

目的:探讨河南汉族人群缺血性脑卒中患者凝血因子Ⅶ(FⅦ)基因R353Q的多态性.方法:应用PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析技术,检测560例健康对照组和512例缺血性脑卒中患者FⅦ基因R353Q多态性.结果:FⅦ基因第353位存在R、Q 2种等位基因,以及R/R、R/Q和Q/Q 3种基因型.患者组Q等位基因频率和R/Q Q/Q型频率低于正常对照组(P＜0.05).结论:河南汉族人群中存在凝血因子Ⅶ基因R353Q多态性,其中Q等位基因可能是缺血性脑卒中的遗传保护因子.     

神经影像模型对短暂症状伴梗死患者预后的预测作用研究

目的 评估基于神经影像特征的综合卒中复发模型（comprehensive stroke recurrence model,CSR）在短暂症状伴梗死（transient symptoms with infarction,TSI）人群中预测短期和长期卒中风险的能力,并与基于临床危险因素的卒中风险预测评分进行比较。      

重组Mash1慢病毒表达载体的构建

目的:克隆小鼠Mash1基因的全长cDNA,构建其慢病毒表达载体Lentivirus-Mash1,为进一步研究Mash1在神经发育及干细胞神经分化中的作用奠定基础。方法:应用RT-PCR从小鼠13d胚胎中扩增出Mash1cDNA片段,经回收纯化与pGEM-T载体连接并转化感受态细菌J M109,通过蓝白筛选、PCR扩增和双酶切鉴定出阳性菌落,并对其进行基因测序。BamHⅠ和XholⅠ双酶切pGEM-T-Mash1和Lentivirus获得的目的基因双粘片段与Lentivirus双粘线性质粒相连接,转化J M109,酶切方法鉴定重组阳性菌落。结果:PCR扩增、酶切分析及序列测定证实成功获取Mash1cDNA克隆;酶切鉴定证实Lentivirus-Mash1含有大小正确的正向Mash1cDNA片段。结论:成功建立了小鼠Mash1cDNA克隆并构建了慢病毒表达载体Lentivirus-Mash1。     

AQP4与脑水肿

水通道蛋白(AQPs)广泛分布于机体不同组织器官中,脑组织中的水通道蛋白主要为AQP4。AQP4蛋白主要在星型胶质细胞和室管膜细胞内表达,尤其在于毛细血管和软脑膜直接接触的胶质细胞上及血管周表达丰富,AQP4的分布特点与其功能密切相关,可能是脑脊液重吸收、渗透压调节、脑水肿形成等生理、病理过程的分子生物学基础。研究AQP4可为脑水肿及水代谢疾病提供分子水平的理论依据,同时为临床治疗脑水肿及水代谢疾病提供一种新途径。     

急性脑梗塞患者血清肿瘤坏死因子增高

采用放射免疫法测定４５例急性脑梗塞患者血清肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）含量，并与３０例脑动脉硬化患者及２７例健康体检者进行比较。结果表明脑梗塞患者ＴＮＦ水平明显增高，脑梗塞组ＴＮＦ为７．１９±１．６７ｎｇ／ｍｌ，脑动脉硬化组为２．３０±１．０６ｎｇ／ｍｌ，正常对照组为１．４１±０．２３ｎｇ／ｍｌ。脑梗塞组与脑动脉硬化组比较有显著性差异（Ｐ＜０．００１）；与正常对照组比较有极显著性差异（Ｐ＜０．００１）。重型脑梗塞患者血清ＴＮＦ含量亦较轻型患者显著增高。重型ＴＮＦ含量为１１．３２±１．４３ｎｇ／ｍｌ，轻型为６．９０±１．５０ｎｇ／ｍｌ（Ｐ＜０．０５）。提示ＴＮＦ参与脑梗塞的发生、发展全过程，脑梗塞患者血清ＴＮＦ含量测定可作为判断患者病情、治疗及预后的一项免疫学指标。     

突触的可塑性研究：原片胆碱酯酶—银染色法显示运动终板

试图建立光镜下突触可塑性研究新的可靠的染色方法。采用人或大鼠的肌肉标本固定，切片借助组化方法建立运动终板染色法。本染色法能同时显著肌肉，运动终板及运动神经终末结构，并能定量各种神经末梢发芽。本文建立了新的神经肌肉接头染色法，本法省时，操作简单方便，重复性好，为同类研究提供了一个良好的方法。     

短暂缺氧血清剥夺再灌注后神经细胞顿抑现象的研究

目的研究短暂缺氧、血清剥夺复氧复注血清(再灌流)后神经细胞顿抑现象及其可能机制.方法将PC12细胞随机分为正常对照组和缺氧组,每组根据不同的再灌流时间又分为3个亚组(缺氧组分别为缺氧15min再灌流1h组、3h组、6h组,正常对照组各亚组的时间点与缺氧组相对应).测定短暂缺氧血清剥夺再灌流后不同时间点的三磷酸腺苷含量、线粒体膜电位和细胞活性.结果与正常对照组相比,缺氧血清剥夺15min再灌流1h后的三磷酸腺苷含量(1.05±0.34)、线粒体膜电位(41.39±1.242)和细胞活性(0.809±0.087)显著降低(P ＜0.05),且于再灌流6h后基本恢复至正常水平.结论短暂缺氧血清剥夺再灌流后,存在低能量状态,且可完全恢复,表明可能存在神经细胞顿抑现象,其原因可能与再灌流后线粒体呼吸链上的琥珀酸脱氢酶等活性下降及线粒体的膜电位变化等有关.     

急性脑梗死患者血糖水平与临床关系的研究

目的：探讨急性脑梗死患者血糖水平与临床的关系。方法：根据患者入院时的空腹血糖水平随机分为正常血糖组、高血糖A组和高血糖B组，在治疗前、治疗后的第7d和第14d，对神经系统缺损进行评分，并观察血糖、年龄、既往病史积分、并发病积分和临床的关系。结果：急性脑梗死患者的血糖水平越高、其并发病和神经系统缺损评分也越高，其临床疗效也越差。结论：高血糖增加急性脑梗死神经系统损伤和并发病。降糖疗法可能会有力地提高急性脑梗死的临床疗效，而积极预防和治疗高血糖是预防脑梗死的有力措施之一。     

构建hTERT真核表达载体并转染人骨髓间充质干细胞

目的构建含人端粒酶逆转录酶（hTERT）基因的真核表达质粒并转染人骨髓间充质干细胞（hMSC）。方法①目的基因的获得：用RT-PCR法从人食管癌组织中扩增出带有EcoRⅠ酶切位点的hTERT基因片段;②将hTERT基因片段插入pcDNA3.1后转化到大肠杆菌DH5α,阳性克隆酶切鉴定后测序分析;③大量提取质粒,非脂质体法转染hM-SC,并用G418筛选出阳性克隆。结果与结论pcDNA3.1/hTERT重组质粒构建成功,并能在hMSC中整合。