淡色库蚊对溴氰菊酸抗药性品系cDNA表达文库的构建和初步鉴定

目的构建淡色库蚊对溴氰菊酯抗药性品系cDNA表达文库.方法应用定向克隆技术将相应cDNA片段插入λExCell/NotⅠ/EcoRⅠ/CIP载体的NotⅠ和EcoRⅠ双酶切位点;并用PCR对插入片段大小进行分析.结果获得含4.72×105个重组子的cDNA表达文库,重组率为100%,插入片段大小平均约1.1kb.结论所建文库容量及插入片段大小适合进一步研究.     

两个标准化cNDA差减文库的构建

目的 构建2个标准化cDNA差减文库，方法 以淡色库蚊对溴氰菊酯抗药性品系为Tester、敏感性品系为Driver，进行正向抑制性差减杂交；以敏感吕系为Tester、抗性品系为Driver，进行反向抑制性差减杂交，分别将获取的2组抑制性差减杂交产物克隆入质粒表达载体（Pin-Point^TMXa-1TVector)，并以PCR扩增鉴定插入片段。结果 获得2个标准化cDAN差减文库，其中抗性相关基因（抗性品系高表达或特异表达）文库含523个重组子，敏感相关基因（敏感品系高表达或特异表达）文库含286个重组子，插入片段大小平均约360bp。结论 所建的2个差减文库适合做进一步研究。     

砷剂防治哮喘气道炎症的分子机制：砷剂对丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶基因表达作用的研究

目的：研究三氧化二砷对T细胞丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶(mitogen-activated protein kinase phosphatase，MKP-1)基因表达的影响，探讨砷剂治疗哮喘气道炎症的分子机制。方法：本研究采用定量PCR的技术研究Hut-78 T细胞在不同浓度三氧化二砷(5μmol／L和1μmol／L)作用下，在不同时间段(3min，10min，20min，30min及1h)，T细胞内MKP-1 mRNA的表达水平。结果：Hut-78细胞在经过砷剂处理后，细胞内MKP-1 mRNA水平在10min即呈现上升的趋势。5μmol／L砷剂20min组和1 μmol／L砷剂20min组细胞内MKP-1 mRNA水平均明显高于对照组(t=5．947，P=0．001；t=2．561，P=0．035)，而在30min时。所诱导MKP-1 mRNA水平均达到高峰，其后均呈下降的趋势。而在时间段20min和1h，5μmol／L砷剂组要高于1 μmol／L组(t=3．056，P=0．0223：t=3．501，P=0．0128)。结论：三氧化二砷对MKP-1的基因表达具有上调作用；MKP-1为三氧化二砷作用的早期反应基因之一；砷剂对MKP-1的作用呈时间和剂量相关：小剂量的砷剂可能在哮喘的治疗和预防上具有重要的应用价值。     

血吸虫病抗独特型抗体疫苗及NP30/短程抗体检测试剂盒

作者采用创新途径制备并筛选出日本血吸虫单克隆抗独特型抗体(anti-id)NP30,证实NP30系肠相关抗原(GAA)的内影像分子,为虫卵肉芽肿形成的致敏原,可替代虫源性抗原用于血吸虫病疫苗及免疫诊断的研究,研制出血吸虫病抗独特型抗体疫苗、免疫增强剂及NP30/短程抗体检测试剂盒。证实NP30对多个品系小鼠(BALB/c、C57BL/6、ICR、昆明种)具有较好的保护作用,减虫率达到39.53％～50.46％,主动免疫山羊可诱导42.78％     

德国小蠊酯酶同工酶谱及六种杀虫剂对其抑制试验的初步探讨

德国小蠊酯酶同工酶共有33条带,初步证实pI6.70、5.80、5.75、5.70、5.43.5、40、5.20、5.17、5.13、5.04、5.01、4.99、4.96、4.79、4.60为胆碱酯酶,pI7.10、6.34、6.26、6.18、4.28、4.13为羧酸酯酶,pI7.90、7.00、6.11、6.03、6.00、5.97、5.92、5.87、5.38、5.16、4.85、4.75为芳族酯酶。其中以pI5.43、5.40、5.38、5.20、5.17、5.16、5.04、5.01、4.96、4.85、4.79、4.75为主带。六种杀虫剂主要抑制胆碱酯酶,尤以敌敌畏、溴氰菊酯最显著。     

抗溴氰菊酯淡色库蚊酯酶同工酶IEF初步分析

本文采用等电聚焦法电泳（ＩＥＦ）初步比较分析了ＬＣ５０分别为０．０２４，２．５８和２１．２７ＰＰＭ的敏感品系与抗溴氰菊酯品系淡色库蚊的酯酶同工酶，结果显示各谱带没有质的区别，但在ＰＩ５．６２，ＰＩ５．８０这两条主带宽度有交叉变化现象，这提示淡色库蚊抗溴氰菊酯的抗性产生可能与基因的表达调控有密切关系，这可为今后研究蚊虫抗性的产生机理提供有价值的参考。     

蛔虫感染或抗原佐剂免疫产生的MHC限制性抗体组分的比较

免疫组分的遗传限制在发展抗线虫疫苗时是一个值得考虑的重要问题。已经证实,在线虫感染时,主要组织相容性复合物(MHC)可限制对抗原的免疫应答。然而,这在其它致敏途径,如加佐剂,是否也是如此,至今了解甚少。本文用猪蛔虫-小鼠和大鼠模型,比较了猪蛔虫感染与猪蛔虫分泌抗原及体抗原辅以佐剂免疫的抗体应答的特异     

抗溴氰菊酯淡色库蚊RNA电泳图谱初步分析

采用酸性异硫氰胍－酚－氯仿－步法提取了抗溴氰菊酯淡色库蚊成虫ＲＮＡ。经琼脂糖凝胶电泳，该ＲＮＡ呈现５Ｓ、１８Ｓ和２５Ｓ三条主带。对２５ＳｒＲＮＡ进行了讨论。     

嗜人按蚊不同发育阶段蛋白质二维电泳图谱的比较研究

嗜人按蚊卵、二令幼虫、四令幼虫、蛹和成虫蛋白质经二维电泳后分别显示多肽斑点160、266、296、266和234个。除了二令和四令幼虫分别显示4个和8个分子量大于94KD的多肽斑点外,其它多肽斑点均分布在94KD以下范围,其中尤以30KD以下为多。它们集中在pH6.68以下和pH8.35以上两个区域内。