细胞内共生菌Wolbachia研究进展

Wolbachia是一类广泛共生于节肢动物和线虫体内的立克次体,能够通过细胞质不亲和、孤雌生殖、雄性雌性化和杀雄等多种机制调控节肢动物的生殖行为,并在丝虫发育、生殖和致病过程中发挥重要作用.近年来的研究结果显示Wolbachia在水平基因转移、抗病毒作用、物种进化等方面亦具有重要价值.该文对Wolbachia近年研究成果进行综述,重点介绍其生物学特征、传播方式、对共生宿主的影响作用及其意义,初步探讨了其在媒介生物防治与相关疾病控制中的潜在价值.     

中华按蚊和嗜人按蚊幼虫的糖、脂、蛋白质和酯酶同工酶的比较研究

本文采用IEF电泳法比较研究中华按蚊和嗜人按蚊二龄和四龄幼虫糖、脂、蛋白质和酯酶同工酶.结果表明:两者电泳图式基本相同,但亦存在一定差别。糖、酯,蛋白质和酯酶同工酶区带在中华按蚊二龄幼虫分别为19、14、38和20条,四龄幼虫为19、12、35和21条。嗜人按蚊二龄幼虫分别为20、10、38和18条,四龄幼虫为22、9、35和23条,本文对以上结果进行了初步分析和讨论.     

淡色库蚊抗溴氰菊酯品系CYP4家族新成员基因克隆及序列分析

目的获取淡色库蚊CYP4家族新基因。方法根据CYP4氨基酸保守序列设计一对简并引物，采用RT-PCR的方法，从淡色库蚊抗溴氰菊酯品系四龄幼虫总RNA中扩增出与设计相符的基因片段。利用T／A克隆方法，将获得的基因片段克隆入pGEM-Teasy载体，经PCR鉴定重组成功，测序并进行比对。结果共克隆出36个阳性克隆，将其中9个随机挑取的阳性克隆测序及同源性分析，表明为CYP4家族中9个新的cDNA序列，由GeneBank登录上网；经国际细胞色素P450命名委员会鉴定，属CYP4家族CYP4H、CYP4J亚家族。为进一步研究细胞色素P450的多样性及其与抗药性的关系打下基础。结论克隆9个淡色库蚊基因部分序列，被鉴定属于CYP4家族CYP4H、CYP4J亚家族。     

淡色库蚊细胞色素P450基因的克隆、序列分析及表达差异的鉴定

目的克隆淡色库蚊细胞色素P450（CYP6F1）基因并进行表达差异的鉴定。方法采用RT—PCR技术和RACE策略，从淡色库蚊对溴氰菊酯抗性品系4龄幼虫中克隆细胞色素P450基因（CYP6F1），用相应的软件进行生物信息学分析，并用实时定量PCR和RT—PCR分析敏感、抗性品系蚊的CYP6F1表达水平及对蚊各期CYP6F1进行表达鉴定。结果成功克隆出CYP6F1基因，基因全长1639bp，开放阅读框为1527bp，编码508个氨基酸（GenBank登录号：AY662654）。序列分析显示该基因与已克隆的日本致倦库蚊细胞色素P450基因（AB001324）有99％的同源性，并具有所有的细胞色素P450基因的保守性特征，1个膜锚定信号、2个还原酶结合位点、1个典型的血红素蛋白结合位点和ETLR基序等。实时定量PCR和半定量RT—PCR结果表明，CYP6F1在淡色库蚊对溴氰菊酯抗性品系中表达水平高于敏感品系，且CYP6F1基因在淡色库蚊各个发育阶段有不同的表达。结论CYP6F1基因可能与杀虫剂抗药性相关，并且在淡色库蚊各个发育阶段有不同的表达。     

深切悼念赵慰先教授

我国著名的医学寄生虫学家赵慰先教授1997年4月14日因病在南京逝世,享年80岁。赵慰先教授系中国共产党党员,中国民主同盟盟员,江苏省第六届政治协商委员会委员,南京医科大学寄生虫学教授,博士生导师。赵慰先教授生于1917年12月27日,江苏省扬州市人。1942年毕业于国立江苏医学院医科专业,1946年毕业于国立江苏医学院寄生虫病研究所研究生班,1949年毕业于英国伦敦卫生与热带医学学院热带病卫生研修班。先后担任江苏医学院(后改名南京医学院、南京医科大学)寄生虫学科主任、科研部主任、寄生虫学教研室主任和寄生虫学研究室主任,1991年2月退休…     

单克隆抗体 M26～32 腹水有效免疫球蛋白的亚类及等电点的分析

单克隆抗体杂交瘤细胞株Ｍ２６～３２的高滴度腹水，用ＭｏｎｏＱ阴离子交换树脂层析柱进行纯化，并用培养的恶性疟原虫和食蟹猴疟原虫抗原片对纯化后的各管作免疫荧光测定（ＩＦＡ）。对纯化后单抗的有效万分进行Ｉｇ亚类检测和等电聚焦电泳分析，结果证实Ｍ２６～３２单抗的有效成分为ＩｇＭ，等电点（ＰＩ）为４．７～４．８５。     

我国三地域中华按蚊蛋白质、游离氨基酸和同工酶的比较研究

中华按蚊是我国疟疾和丝虫病的重要传播媒介。我国不同地理区域,中华按蚊的生态习性和传病作用存在差异,形态上则难以区别。国内有学者提出一个重要问题;即我国的中华按蚊究竟是一个种、抑或是由多个近缘种组成的复合体,许多学者已运用各种现代技术研究了中华按蚊的分类,本研究采集哈尔滨、北京和南宁三地郊区牛房饱吸血的中华按蚊雌蚊为实     

淡色库蚊细胞色素P450 CYP4E2r6基因的克隆、表达及鉴定

目的克隆并表达鉴定淡色库蚊细胞色素P450(CYP4E2r6)基因。方法根据昆虫细胞色素P450氨基酸保守序列设计一对简并引物，采用RT—PCR，从淡色库蚊四龄幼虫mRNA中扩增出目的基因片段。产物经T—A克隆、测序、比对，在抗性品系高表达的CYP4E2r6亚克隆入原核表达载体pGEX-6P1，在大肠杆菌BL21中进行原核表达。将细菌总蛋白进行SDS-PAGE及Western blot鉴定。结果14个阳性克隆中9个为CYP4新序列，由GenBank登录上网(GenBank／NCBI CB074944—51、CB270837，2003年)；经鉴定属CYP4家族CYP4H、CYP4E、CYP4J亚家族；CYP4E2r6基因已成功表达。结论获得的CYP4E2r6融合表达蛋白为进一步研究CYP4基因与抗药性之间的关系奠定基础。     

用遗传操纵防治蚊媒的研究进展

近年,由于蚊媒对杀虫剂的抗药性等多种原因,致使现有蚊媒防治措施的实施受到限制。因而人们把蚊媒病的防治策略转到了遗传操纵上,其目的是减少和替代目标种群,改变其作为疾病媒介的特性。早在30多年前研究者就在遗传防治方面展开了研究,通过改变媒介昆虫的染色体,产生大量绝育雄虫然后将其释放到野外,以控制种群数量,达到防治目的。但是,由于实践操作上的限制而被否定。近年来,随着分子生物学技术的发展,遗传防治被赋予了新的涵义,例如利用转基因技术,对媒介昆虫进行基因转化,定向地改变生物学性状,培育对病原体不易感、自身繁殖能力或传媒能力下降、对杀虫剂敏感性增加等性状的新型转基因昆虫,然后释放至自然界,最终达到控制危害的目的。     

几丁质合成酶1与蚊抗药性相关研究

目的探讨几丁质合成酶1与蚊抗药性之间的相关性。方法采用实时定量PCR的方法验证实验室和现场不同抗性品系几丁质合成酶1的表达差异。另外,溴氰菊酯短期诱导前后几丁质合成酶1的表达水平也得到验证。结果几丁质合成酶1在不同抗性水平蚊之间存在差异表达。接触杀虫剂前后,几丁质合成酶1的表达水平也存在差异。结论几丁质合成酶1与蚊抗药性水平之间存在相关性。