通心络胶囊对血管性痴呆小鼠脑血管储备能力的影响

目的 观察通心络胶囊对血管性痴呆（VD）小鼠脑血管储备功能的影响。方法 用夹闭双侧颈总动脉，同时腹腔注射硝普钠制做VD小鼠模型。通心络灌胃（0.2 g·kg-1·d-1）处理小鼠，生理盐水作为对照。18只小鼠随机分为假手术组（对照组）、模型加生理盐水组（安慰剂组）、模型加通心络组（治疗组）。处理30 d后应用RT-PCR和免疫印迹方法测定小鼠海马部位血管内皮细胞生长因子（VEGF）和一氧化氮合酶（eNOS）的表达。结果 （1）RT-PCR：对照组与安慰剂组的eNOS基因mRNA表达无明显差异，而治疗组eNOS mRNA表达明显增强，与安慰剂组比较差异有统计学意义（P <0.01）。治疗组VEGF mRNA表达明显高于安慰剂组，差异有统计学意义（P <0.01）；（2）Western Blot：安慰剂组的eNOS和VEGF蛋白表达高于对照组（P <0.05），治疗组eNOS和VEGF蛋白表达明显上调，高于安慰剂组，差异有统计学意义（P <0.01）。结论 通心络能明显增强VD模型大鼠海马组织VEGF和eNOS表达，提高其脑血管储备能力,从而减轻VD模型小鼠的缺血性脑损伤。     

胶原水凝胶在HepG2.2.15细胞三维培养中的应用研究北大核心CSCD

目的了解用胶原水凝胶为支架构建HBV转染细胞HepG2.2.15的三维(three-dimensiona,3D)培养模型的应用情况。方法采用扫描电镜(SEM)和原子力显微镜(AFM)观察水凝胶内胶原纤维的结构特征,以胶原水凝胶为支架建立HepG2.2.15细胞3D培养模型。采用倒置显微镜观察细胞形态特征;采用MTS法和钙黄绿素-AM(Ca-AM)染色法检测细胞的增殖活性;采用ELISA法检测细胞HBsAg、HBeAg的分泌;采用荧光探针PCR法检测HBV DNA的表达。结果HepG2.2.15细胞在96孔板胶原水凝胶中能培养45d,在24孔板内培养则长达160d,且生长良好,并能维持转染细胞特性,持续分泌HBsAg、HBeAg和HBV DNA。结论建立的胶原水凝胶HepG2.2.15细胞3D培养模型能长时间维持细胞增殖。     

个体化静脉溶栓治疗的研究进展

缺血性卒中严重影响着人类的生活。静脉重组组织型纤溶酶原激活剂（intravenou s
recombinant tissue plasminogen activator,rt-PA）溶栓治疗是目前被循证医学证明缺血性卒中急性期唯
一有效的方法。然而,在临床实施中,存在一些问题,如时间窗问题、伴随意识障碍问题、年龄问题、
剂量问题等等,提示在规范的基础上需进行个体化治疗,从而提高溶栓的有效性和安全性。本文就
静脉溶栓中涉及个体化方案临床研究的最新进展做一综述。     

脑卒中病理变化的机制：PSD93在血小板活化因子性神经元损害中的作用

目的：探讨PSD93基因是否参与血小板活化因子所致的神经元毒性损伤，以研究血小板活化因子(platelet activating factor，PAF)神经性损伤的分子学机制。方法：实验于2003-05／2004-05在南京鼓楼医院神经科研究室和美国约翰霍普金斯大学Dr．Tao实验室进行。用原代神经元细胞培养系统，PAF处理wild type(野生型)和PSD93 Knockout(基因敲除)小鼠皮质神经元；propidium iodide／calcein AM染色进行细胞凋亡测定。荧光显微镜下数码相机拍照。结果：0．10，0．30和0．60μmol／LPAF对野生型和PSD93基因敲除型两种皮质神经元细胞具有明显的神经元毒性(P&;lt;0．05)。基因敲除型型的小鼠皮质神经元细胞凋亡明显低于野生型(P&;lt;0．01)。结论：PSD93基因敲除型可抑制PAF所致的神经元损害。     

含雌激素中药脑保护作用的实验研究

目的:探讨含雌激素中药对实验动物缺血后脑损伤的保护作用及其临床意义。方法:实验于2004-03/09在南京大学医学院附属鼓楼医院神经科实验室进行。将清洁级SD大鼠30只随机分为两组各15只,分别灌注中药和饮用水7d后,制成缺血再灌注脑损伤模型。在再灌注12,14h时每组各取6只取脑切片,TTC染色,计算梗死面积。另3只取缺血侧皮质,提取蛋白,并作雌激素受体β测定。结果:中药组脑梗死面积再灌注12h时为(40.62±1.68)%、再灌注24h时为(58.89±2.12)%,与对照组[(5.23±1.23)%和(69.86±2.43)%]相比,差异有显著性意义(P<0.05);免疫印迹蛋白测定,中药处理组缺血侧脑皮质雌激素受体表达高于空白对照组。结论:含雌激素中药有明显的脑保护作用。可能通过激活雌激素受体β而具有脑保护作用。     

帕金森病病因及发病机制的进展研究

帕金森病的病因及发病机制十分复杂,由多因素参与,目前认为病因包括年龄、遗传,发病机制包括氧化应激损伤、兴奋性神经毒性、同型半胱氨酸、免疫炎性反应、线粒体功能缺陷及细胞凋亡及自噬作用等方面,本文将从这几个方面展开综述。     

骨髓间充质干细胞体外转化为神经细胞的环境特征

目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养条件,体外定向诱导传代骨髓间充质干细胞向神经干细胞转化并进一步向神经细胞分化的环境,并对分化的神经元进行鉴定。方法:实验于2005-08/2007-03在南京大学医学院附属鼓楼医院科研部完成。①选用健康SD大鼠,分离纯化并培养大鼠骨髓间充质干细胞。②应用流式细胞仪检测细胞表面抗原的表达,通过免疫表型鉴定骨髓间充质干细胞.③贴壁培养诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化,分为对照组和诱导剂组,对照组中不加诱导剂,诱导剂组分两步诱导:首先加入含终浓度均为10μg/L的表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子诱导分化剂,连续培养12 d:然后应用20μg/L的脑源性神经营养因子和1μmol/L的全反式维甲酸继续诱导6 d,分别收集诱导1 d,6 d,12 d,18 d的细胞进行细胞免疫荧光鉴定。结果:①传代第3代骨髓间充质干细胞为梭形成纤维样细胞,均一稳定的表达与间充质干细胞相关的表面抗原标记物CD29,CD44,CD90、阳性率分别为98.88%,96.90%.95.86%,但极少表达造血细胞标志CD34。②经碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子诱导12 d后诱导剂组巢蛋白阳性表达率为(89.24±2.12)%,而对照组细胞未表达巢蛋白。③经脑源性伸经营养因子和全反式维甲酸联合诱导6 d后,诱导剂组均可见微管相关蛋白2阳性细胞,大部分细胞转变为神经元样细胞形态;对照组微管相关蛋白2阴性.细胞形态仍为梭形成纤维样细胞。结论:实验采用并改良了全骨髓贴壁法,操作简单快速.细胞活性好,是一种较为理想的分离和纯化骨髓间充质干细胞的方法.骨髓间充质干细胞可分化成神经干细胞,进一步诱导分化为神经细胞。     

血浆同型半胱氨酸水平及其代谢酶N5,N10亚甲基四氢叶酸脱氢还原酶基因多态性与Binswanger病的关系

目的探讨血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平及其相关代谢酶N5,N10亚甲基四氢叶酸脱氢还原酶(MTHFR)基因多态性与Binswanger病(BD)的关系。方法应用荧光极化免疫法测定77例BD患者和71名健康体检者(健康对照组)的血浆Hcy水平,采用多聚酶链反应限制性片段长度多态性检测MTHFR基因C677T多态性。结果BD组患者血浆Hcy水平为(19.83±2.23)μmol/L,显著高于健康对照组的(13.03±3.79)μmol/L(P<0·01)。BD组和健康对照组间MTHFR各基因型分布和等位基因频率比较差异无显著性(均P>0·05)。各基因型之间血浆Hcy含量差异亦无显著性(均P>0·05)。结论BD患者血浆Hcy水平明显高于健康人,高Hcy血症可能参与了BD的发病过程;而MTHFR基因多态性与BD可能无明显关系。     

自血光量子及脉络宁治疗对脑梗塞病人自由基代谢和血液流变学的影响

应用自血光量子及脉络宁治疗３４例脑梗塞病人，以观察其治疗前后血自由基水平和血液流变学指标的变化。结果脑梗塞患者发病后血自由基增高，抗自由基物质活性降低，血液流变学检测值异常增高；治疗后自由基代谢及血液流变学指标均显著改善。提示自血光量子及脉络宁治疗，对脑梗塞患者有显著抗自由基及改善血液流变学作用     

自血光量子及脉络宁治疗对脑梗塞病人自由基代谢和血液流变…

应用自血光量子及脉络宁治疗３４例脑梗塞病人，以观察其治疗前后血自由基水平和血液流变学指标的变化。结果脑梗塞患者发病后自由基增高，抗自由基物质活性降低，血流流变学检测值异常增高；治疗后自由基代谢及血液流变学指标均显著改善。