RUNX3全长和不同结构域原核表达载体的构建及其重组蛋白表达

目的：构建RUNX3全长和不同结构域的原核表达载体并表达其重组蛋白。方法：以pcDNA3.1-myc-RUNX3为模板,采用PCR法扩增RUNX3全长和各个结构域片段,通过EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点将RUNX3全长和不同结构域定向插入谷胱甘肽转移酶（GST）融合表达载体pGEX-4T-2中,在大肠杆菌(E.coli) BL21中诱导其融合蛋白表达,SDS-PAGE电泳检测其蛋白表达情况。结果：EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切后得到与预期大小相符的FL（1 245 bp）、ΔRunt(843
 bp)、Nter（159 bp）、Runt（402 bp）和Cter（684 bp）5个载体片段。SDS-PAGE电泳检测,RUNX3全长及各个结构域截短GST-RUNX3截短融合蛋白（GST-FL、GST-Runt、GST-Nter和GST-Cter）相对分子质量分别为72 000、40 000、32 000和51 000。 结论：成功构建RUNX3全长和各个结构域截短的GST标签的原核表达载体,并实现其重组蛋白在原核细胞中的表达。
     

针刺治疗偏头痛的系统评价和Meta分析

目的:应用Meta分析方法,系统评价针刺治疗偏头痛的疗效和分析国内外评价疗效差异的原因。方法:检索Pubmed、Cochrane Library、中国生物医学文献数据库(CBM)等数据库,筛选针刺治疗偏头痛的随机对照临床试验(randomized controlled trials,RCT),应用Cochrane协作网提供的Rev Man 5.0软件进行统计分析。结果:本研究共纳入12篇高质量的、以假针刺组为对照的RCT。Meta分析结果显示:针刺治疗结束时,真针刺和假针刺组的有效率分别为49.5%和43.3%,两组之间有统计学差异(OR=1.28,95%CI:1.02~1.61,P=0.03);随访结束时,两组的有效率分别为47.7%和38.5%,两组间无统计学差异(OR=1.33,95%CI:0.70~2.51,P=0.39)。对国内及国外临床试验进行亚组分析发现,在治疗结束及随访结束时,国内试验针刺组的有效率均显著高于假针刺组(P<0.05),而国外临床试验均显示两组间无统计学意义(P>0.05)。结论:上述结果提示在治疗期间针刺对偏头痛具有一定疗效,但治疗停止的随访期间针刺的疗效不显著。国内外临床试验在设计及执行等方面差异较大,今后尚需更多科学严谨的、符合中医特点的高质量RCT来验证针刺治疗偏头痛的疗效。     

RNA干扰YWHAZ基因对结肠癌HCT-8细胞增殖的影响

目的:探讨中RNA干扰YWHAZ基因对结肠癌HCT-8细胞增殖的影响,阐明其作用机制。方法:构建靶向基因YWHAZ的siRNA载体重组质粒pGPU6/GFP/Neo-YWHAZ-792、pGPU6/GFP/Neo-YWHAZ-733、pGPU6/GFP/Neo-YWHAZ-612和pGPU6/GFP/Neo-YWHAZ-505作为RNA干扰质粒组,同时设立阴性对照质粒组(pGPU6/GFP/Neo-shNC质粒);采用荧光定量PCR检测YWHAZ mRNA的表达水平和表达抑制率;采用MTT法检测HCT-8细胞的增殖率。结果:倒置荧光显微镜下观察,细胞转染率为60%。荧光定量PCR检测,RNA干扰组YWHAZ mRNA表达水平低于阴性对照组(P<0.01),平均抑制率为52.86%。MTT检测,与阴性对照组比较,RNA干扰质粒组细胞增殖率明显降低(P<0.01),平均细胞增殖率为68.75%。结论:干扰YWHAZ可抑制该基因的转录,并抑制HCT-8细胞的增殖。     

CXCR4、PI3K和AKT在三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231中的表达

目的 探讨CXCR4、PI3K及AKT在三阴性乳腺癌细胞株中的表达及其相关性.方法 采用过表达CXCR4质粒pcDNA3.1-CXCR4和沉默子siRNA-CXCR4分别转染三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231,分为目的转染组和无关转染组,同时设立空白对照组.Western blot和qRT-PCR技术检测转染后CXCR4、PI3K、AKT蛋白和mRNA的表达.结果 转染pcDNA3.1-CXCR4后,与空白对照组及无关转染组比较,目的转染组CXCR4、PI3K和AKT蛋白及mRNA表达水平升高(P＜0.05);转染siRNA-CXCR4后,与空白对照组和无关转染组相比,目的转染组CXCR4、PI3K和AKT蛋白及mRNA表达水平下降(P＜0.05).结论 在三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231中CXCR4可调节PI3K及AKT的表达.     

中国西部地区城市青少年肠易激综合征现况调查

目的 分析中国西部地区城市中小学生肠易激综合征(IBS)的患病率及分布特征.方法 采用多级整群随机抽样方法 ,于2005年5月～2006年1月期间对中国西部地区12 291名城市中小学生进行IBS流行病学问卷调查.结果 ①符合Manning及罗马Ⅱ诊断标准的IBS期间患病率分别为58.00%及23.40%,以高中生居多,男女患病率差异无统计学意义(P>0.05);②因腹痛、不适或大便习惯改变而就诊学生中,符合Manning标准的有806名(11.31%),符合罗马Ⅱ标准的有482名(16.75%).结论 IBS是中国西部地区城市中小学生的常见病及多发病,患病率随学龄段的增长而上升.     

小儿先天性心脏病快通道手术后早拔管的体外循环影响因素分析

目的通过对快通道心脏麻醉(FTCA)管理策略下的体外循环(CPB)手术患儿围术期资料的统计分析,建立小儿FTCA术后早拔管时间的界值,进一步分析影响小儿FTCA策略的CPB因素。方法回顾性分析2 859例先天性心脏病术中接受FTCA管理的病例,对术后呼吸机支持时间经对数转换后进行聚类分析以建立小儿FTCA策略的术后早拔管时间界值,FTCA的影响因素分析采用χ2检验和多因素逐步Cox回归分析。结果术后呼吸机支持时间的聚类分析显示:术后12 h为早拔管与非早拔管组的分界值,54.56%的患儿拔管时间<12 h,为早拔管组;45.44%的患儿拔管时间≥12 h,为非早拔管组。据此标准,患儿术后早拔管率:不同CPB时间(≤30、31～60、61～90、91～120、>120 min)组分别为83.1%、66.3%、42.5%、28.7%和26.8%,组间差异有统计学意义(P<0.01);不同主动脉阻断时间(0、1～30、31～60、61～90、>90 min)组分别为55.6%、71.8%、46.4%、27.6%和20.9%,组间差异有统计学意义(P<0.01);不同CPB温度(常温、浅低温、中低温、深低温)组分别为...     

老年卒中患者急性期血压变化及其与短期预后的关系

目的 探讨老年卒中患者急性期血压变化特征及其与30 d预后的关系.方法 采用前瞻性队列研究方法,连续登记2008年1月-2010年6月入院的老年卒中患者275例,其中脑梗死202例,脑出血73例.连续记录入院后7d的血压,在发病30d时评价预后.按照急性期7d内平均收缩压（120～139、140～159、160～179、180～199、＞200 mm Hg）和舒张压（＜69、70～79、80～89、90～99、＞100 mm Hg）水平分别分为5个亚组,比较入院时和30 d时的改良Rankin量表评分（mRS）、美国国立卫生研究院卒中量表评分（NIHSS）.结果 ①275例患者中,有66例预后差,其中脑出血组22例,脑梗死组44例,两组比较差异无统计学意义（P=0.200）.两组急性期7d内不同平均收缩压的30d预后差者的5个亚组预后比较,筹异有统计学意义（P＜0.05）.而急性期7 d内,不同平均舒张压水平的30 d预后差者,5个亚组比较,除70～79 mm Hg与80～89 mm Hg两组间差异无统计学意义外（P＞0.05）,其余各亚组之间预后比较差异有统计学意义（P＜0.05）.②平均收缩血压在160～179mmHg者,mRS（中位数2）和NIHSS（中位数7）评分较低,相应30d改善显著（mRS中位数差值为2,NIHSS中位数差值为4）;平均舒张压＞100 mm Hg,提示预后差,mRS和NIHSS评分30d改善的比较,不同舒张压亚组两两比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.脑出血组平均舒张压在70～90mmHg范围内,往往预后较好;腩梗死组在70mm Hg以下者,预后最好.结论 老年卒中患者急性期7 d内平均收缩压在160～179mm Hg之间,30 d的预后较好;急性期平均舒张血压不能预测病情的严重程度,但可反映30 d预后转归的倾向.     

上海市2003～2007年道路交通伤院前急救流行病学调查

目的 探讨上海市2003～2007年道路交通伤院前急救流行病学特征.方法 以上海市急救中心同期的院前急救病例数据库和全市人口数据为基础,对其中的道路交通伤相关资料进行回顾分析.结果 五年中上海市中心城区共实施院前急救585 298人次,其中道路交通伤38 472例,由2003年的4.51%逐年增加至2007年的8.32%,其中男性所占比例呈逐年上升趋势.道路交通伤者以中年人为主,青年人受伤率逐年下降,而老年人受伤率逐年增加.道路交通伤院前急救的高峰时点和高峰时段分别为每日14:27～15:07和7:49～21:49.结论 上海市道路交通伤院前急救有其自身的流行病学特点,加强高危人群交通安全教育,合理配置院前急救资源,逐步建立一个较为完善的全市道路交通伤监测网络,都有助于减少道路交通伤的发生.     

全国城市中小学生焦虑情绪流行病学调查

目的 调查分析我国城市中小学生焦虑性情绪倾向的患病率和分布特征,探讨其与肠易激综合征(IBS)的关系.方法 采用多级整群随机抽样方法,对我国6个省及2个直辖市中51 956名中小学生进行流行病学问卷调查.结果 被调查人群中有26.75%的人有焦虑性情绪倾向.其中男性为21.78%,女性为31.93%,两者差异有统计学意义(P《0.01);在儿童焦虑性情绪筛查表(SCARED)5个领域的分值比较中,IBS倾向学生高于非IBS倾向学生;因IBS症状就诊的学生高于未就诊学生(均P《0.01).结论 焦虑性情绪倾向患病率随年龄的增长而上升;良好的家庭环境和学校教育能够有效降低焦虑程度.精神心理因素在IBS发病中起重要作用.     

慢性心力衰竭合并贫血患者的临床特征及预后

目的探讨慢性心力衰竭合并贫血的临床特点及其预后。方法168例慢性心力衰竭患者,按血红蛋白(Hb)水平(男性Hb<120 g/L、女性Hb<110 g/L诊断为贫血)分为贫血组和非贫血组,比较两组患者的临床特点及心功能情况。此外,比较轻度与严重心力衰竭组的贫血发生率、贫血与慢性心力衰竭的严重程度和病死率的关系。结果冠状动脉性心脏病和高血压病是慢性心力衰竭的主要病因,分别占心力衰竭患者的51.8%和26.2%。总贫血发生率为18.5%,其中严重心力衰竭组为32.4%,显著高于轻度心力衰竭组的8.2% (P<0.05)。随访24个月,轻度心力衰竭组的病死率为5.2%,显著低于严重心力衰竭组的15.5%(P<0.05)。贫血组的病死率为25.8%,显著高于非贫血组的5.8%(P<0.01)。贫血组的血清肌酐水平为(123.41±52.22)μmol/L,显著高于非贫血组的(91.67±29.13)/μmol/L(P<0.05)。结论冠状动脉性心脏病和高血压病是慢性心力衰竭的主要病因,慢性心力衰竭患者常合并贫血,贫血程度与心力衰竭的严重程度有关,合并贫血的心力衰竭患者的病死率升高。