江苏省2012年柯萨奇病毒B组3型分离株全基因序列分析

目的探讨2012年江苏省手足口病（HFMD）患者临床样本中分离得到的3株柯萨奇病毒B组3型（CVB3）病毒的全基因序列特点。方法采集江苏省东海县和邳州市2012年HFMD患儿的咽拭子或肛拭子样本16份,经Vero细胞分离培养得到3株CVB3病毒,利用RT-PCR扩增CVB3全长基因。利用DNAStar软件包的MegAlign进行核苷酸序列分析,构建系统进化树,并对CVB3的毒力位点进行比较。结果扩增得到覆盖CVB3全基因组的3个片段,拼接后为CVB3全基因组,分别命名为DH09Y/JS/2012、DH16G/JS/2012和PZ23Y/JS/2012。同源性分析结果显示,该3株分离株之间同源性为87.6%~98.9%,与原型株（Nancy）的核苷酸同源性分别为80.5%、80.4%和81.2%。3个毒株均属于D2亚型。邳州市分离株和东海县2株毒株VP1区的同源性为91.8%~92.3%,分属于D2a和D2b两个不同分支。3株分离株除5′UTR的GUAA/GCAA模序和VP2的151位氨基酸外,其余毒力位点与近年引起心肌炎、无菌性脑膜炎等重症CVB3流行株一致。结论引起2012年江苏省HFMD的CVB3为D2亚型,不同地区流行D2a和D2b两个分支,此次分离株主要毒力位点与近年来CVB3流行株一致。     

疣状胃炎的研究现状

疣状胃炎(verrucosa gastritis , VG)又称豆疹状胃炎、慢性糜烂性胃炎,是胃炎的一种特殊类型,在悉尼系统中隶属隆起糜烂性胃炎类别.目前国内对于疣状胃炎的研究取得了一定的进步,但其病因、发病机制及治疗仍在进一步探讨中.     

不同时期分离的鼠伤寒沙门氏菌全基因组学分析研究

目的：了解不同时期分离鼠伤寒沙门氏菌的基因组多态性。方法：采用solexa高通量测序技术对 12株分离于1954-1980年与2018-2020年的鼠伤寒沙门氏菌标准菌株进行全基因组测序,以此进行菌株的多位点序列分型(MLST)分析;应用生物信息分析软件对测序菌株基因组的基因功能注释,并对预测的毒力基因、耐药基因、插入元件(IS)、前噬菌体和CRISPR序列进行比较分析。通过比较基因学分析拟合泛基因组和核心基因组积累曲线,与来源于其他国家已发表的代表性菌株构建系统发育分子进化树。结果：不同时期分离的12株鼠伤寒沙门氏菌的染色体全基因组序列大小无明显差异,约为4.8 Mbp。 共发现5种不同MLST型别,以ST19为主(66.6%)。注释结果显示每株鼠伤寒沙门氏菌基因组含有大量 (＞20个)耐药基因;同时也发现不同菌株基因组之间毒力基因、IS、前噬菌体和CRISPR序列数量不尽相同;比较基因学分析证实鼠伤寒沙门氏菌核心基因组相对稳定,而泛基因组所含基因持续增加、高度可变。系统发育进化树显示,来源不同时期和国家的15株分离菌株形成3个不同进化分支,分子进化聚类与菌株的分离年代和地域无明显相关性。结论：解析了12株不同时期分离的鼠伤寒沙门氏菌标准菌株的全基因组序列,发现不同时期分离的菌株基因组数据和分子进化无明显相关性,这些结果不仅为后续探究鼠伤寒沙门氏菌耐药机制与遗传进化规律等研究奠定基础,同时也对标准菌株监管提供科学数据支持。     

PM2.5通过TLR4破坏自噬流加重Raw264.7巨噬细胞炎症反应

目的 探讨PM_2.5对Raw264.7巨噬细胞自噬及炎症反应的影响及机制。方法 CCK-8检测PM_2.5对Raw264.7巨噬细胞活性的影响,透射电镜观察自噬结构;Ad-mCherry-GFP-LC3B转染细胞后荧光显微镜观察自噬通量,以探讨PM_2.5对巨噬细胞活性和自噬流的影响。再设置对照组、PM_2.5组、雷帕霉素（Rap,自噬诱导剂）组、羟氯喹（HCQ,自噬抑制剂）组、PM_2.5+HCQ组、PM_2.5+TAK-242[Toll样受体4（TLR4）抑制剂]组。Western blot法检测自噬相关蛋白,包括微管相关轻链蛋白3比值（LC3Ⅱ/Ⅰ）、p62、组织蛋白酶B（CTSB）、溶酶体膜蛋白2（LAMP2）和炎症相关蛋白,包括Toll样受体4（TLR4）、核苷酸结合域样受体蛋白3（NLRP3）的表达水平;酶联免疫吸附试验检测相关炎性因子白细胞介素（IL）-1β、IL-18、IL-10分泌水平。结果 Raw264.7巨噬细胞活性随着PM_2.5浓度的增加和作用时间的延长而降低。透射电镜观察到PM_2.5组有较多自噬空泡和双膜自噬体,自噬溶酶体少见,且荧光显微镜下PM_2.5组绿色荧光淬灭不明显,Merge后黄红色荧光比值高于对照组和Rap组（P<0.05）。相较于对照组,PM_2.5组NLRP3、LC3Ⅱ/Ⅰ、p62、CTSB、IL-1β、IL-18的表达上调,LAMP2、IL-10表达下调（P<0.05）,而HCQ抑制自噬的同时,促进NLRP3、IL-1β、IL-18的表达,抑制IL-10表达（P<0.05）。相较于对照组、PM_2.5组和HCQ组,PM_2.5+HCQ组NLRP3、IL-1β、IL-18的上调及IL-10下调更为显著（P<0.05）。此外,PM_2.5组TLR4表达高于对照组,TAK-242抑制TLR4后NLRP3、LC3Ⅱ/Ⅰ、p62、CTSB、IL-1β、IL-18的表达较PM_2.5组下调,LAMP2和IL-10的表达上调（P<0.05）。结论 PM_2.5可呈时间和浓度依赖性地降低巨噬细胞活性;且PM_2.5诱导Raw264.7巨噬细胞发生自噬,但阻断自噬流,加重巨噬细胞炎症反应,且该过程可能由TLR4介导。     

139例硅油取出术临床分析

目的 探讨硅油取出术的临床应用和手术风险控制方法。方法 对139例（139眼）玻璃体切除术联合硅油充填患者行主动持续负压吸引硅油取出术,观察术后患眼玻璃体腔和视网膜情况,分析术后眼压控制与视网膜再脱离的关系。结果 139例患者均顺利完成手术,其中135例（97.12%）术后玻璃体腔清、视网膜保持复位,4例（2.88%）术后发生视网膜再脱离;32例（23.02%）术后发生低眼压,其中4例术后发生视网膜再脱离患者术后均发生低眼压,28例术后未发生视网膜再脱离患者术后发生低眼压,低眼压发生率比较差异有统计学意义（100% vs 20.74%,χ2=13.77,P<0.01）。结论 主动持续负压吸引硅油取出术安全、可靠,术中和术后适当的眼压维持是硅油取出术成功的重要因素。     

腰丛-坐骨神经联合阻滞在老年危重患者下肢手术中的应用价值

目的:探讨神经刺激仪引导下腰丛-坐骨神经联合阻滞在老年危重患者单侧下肢手术中的应用。方法:57例拟行单侧下肢手术且合并症较多的老年患者,按入院时间随机分成腰丛-坐骨神经联合麻醉组(A组),腰-硬联合麻醉组(B组),全身麻醉组(C组)。记录麻醉前、麻醉后5、15、30、60min的心率、收缩压、舒张压、血氧饱和度变化及不良反应。结果:麻醉30min内,B、C组患者收缩压明显降低,需要行升压处理,A组血压维持基础水平,无明显变化;B组发生恶心、呕吐3例,尿潴留10例,腰背痛5例;C组发生术后认知功能障碍4例,A组未见发生。结论:神经刺激仪引导下腰丛-坐骨神经联合阻滞,成功率高,血流动力学稳定,并发症少,镇痛时间较长,是危重老年患者单侧下肢手术较好的麻醉选择。     

肝硬化结肠壁增厚的C表现及其临床意义

目的：分析肝硬化患者结肠壁增厚的CT影像特征，评价其与肝硬化进展程度的关系。材料与方法：69例肝硬化中，39例为CT增强扫描，30例为平扫。分析CT像上结肠壁增厚（＞3mm）的征象、发生率、分布情况，并统计分析其与肝功能分级（Child-Pugh)的关系，100例正常者为对照组。结果：44.9%肝硬化患者显示结肠壁增厚，与对照组（22%）比较有统计学意义。其中77.4%主要发生于右半结肠，22.6%为全结肠受累，表现为环状同心型增厚或结肠袋的结节状增厚；66%的患者强化不明显。肝硬化结肠壁增厚在肝功能A、B、C各级中的发生率分别为34%、58%及75%，其发生、发展与Child-Pugh分级成正相关，主要与白蛋白水平负相关。结论：结肠壁增厚常见于失代偿期肝硬化，右半结肠为最好发部位，与肝硬化严重程度相关。白蛋白水平降低及门脉高压可能为其发生的主要原因。     

上海市某区基本药物制度实施后的现状、问题及思考

目的:了解基本药物制度实施后对上海市某区各级医疗机构医务人员工作及居民就医行为和满意度产生的影响.方法:采用定量和定性相结合的方法,对上海市某区各级医疗机构在基本药物制度实施后的现状、问题及医务人员与就诊居民的行为和满意度开展调查.结果:基本药物目录与基层需求存在差距,药品价格优惠不明显,部分药品质量明显下降,少数基本药物尤其是急救药品易出现缺货断货现象,二三级医院对基层医疗机构合理使用基本药物影响较大.结论:合理调整基本药物目录;完善药品招投标、质量监督、配送和流通领域监管体系;加大二、三级医疗机构优先使用基本药物的考核力度.     

芳香开窍药嗅吸剂在治疗创伤性蛛网膜下腔出血脑血管痉挛中的应用研究

目的：观察由芳香开窍药组成的嗅吸剂治疗创伤所引起的蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的疗效。方法：22例经颅多普勒（TCD）检查显示大脑中动脉（MCA）≥120cm.s-1颅脑外伤致外伤性蛛网膜下腔出血住院成人患者随机分为治疗组：12例,对照组：10例,全部患者入院后均给予常规治疗,治疗组入院第2d起给予芳香开窍嗅吸剂雾化吸入,两组分别于入院后第2d、第3d、第5d、第7d、第9d、第11d行颅多普勒TCD检查脑血流变化。结果：治疗组经鼻腔给药途径吸入芳香开窍药治疗脑血管痉挛后脑血流速度6d后明显改善,同对照组比较,差异有显著性（P〈0.05）。结论：经鼻雾化吸入芳香开窍药可以达到缓解颅脑损伤合并蛛网膜下腔出血时脑血管痉挛的效果,其机制可能是药物除可以通过鼻黏膜及肺部丰富的毛细血管吸收外,还可以直接通过鼻黏膜-脑脊液途径进入脑脊液,突破或绕过血脑屏障,将药物靶向脑部达到缓解颅脑损伤合并蛛网膜下腔出血时脑血管痉挛的效果。