乙型肝炎病毒X蛋白的功能研究进展

乙型肝炎病毒（HBV）的慢性感染是引发肝细胞癌的主要危险因子，了解HBV X蛋白在病毒复制及肝细胞基因表达调节中重要的生物学作用对于弄清HBV慢性感染的预后非常重要。本文对X蛋白的反式激活作用，X蛋白对细胞凋亡及在DNA损伤修复中的作用，X相关蛋白的功能及X蛋白的致癌和转化作用等研究进展做较全面的综述。     

白芍提取物治疗抑郁症的实验研究

目的:观察白芍提取物的抗抑郁作用。方法:采用小鼠悬尾、小鼠强迫游泳及利血平拮抗实验。白芍提取物22.5,45,90mg·kg-1ig7d后观察小鼠悬尾不动时间,强迫游泳不动时间及体温变化。结果:白芍提取物45,90mg·kg-1·d-1均可显著缩短小鼠悬尾及强迫游泳不动时间(P0.05),并显著对抗利血平所致的小鼠体温下降(P0.05)。结论:白芍提取物对小鼠具有明显的抗抑郁作用。     

复明片对白内障大鼠血清及晶状体中蛋白含量变化的实验研究

目的研究复明片对白内障大鼠血清及晶状体中蛋白含量变化。方法采用考马斯亮兰CBBG250显色法对模型组、治疗组及对照组大鼠血清及晶状体中蛋白含量进行检测。结果治疗组Ⅰ、治疗组Ⅱ血清中蛋白含量明显低于对照组，差异具有非常显著性（P〈0．01）。治疗组Ⅰ、治疗组Ⅱ血清中蛋白含量明显高于模型组，差异具有非常显著性（P〈0．01）。治疗Ⅰ、治疗组Ⅱ晶状体匀浆中蛋白含量明显低于对照组，差异具有显著性和非常显著性（P〈0．05，P〈0．01）。治疗组Ⅰ、治疗组Ⅱ晶状体匀浆中蛋白含量明显低于模型组，差异具有非常显著性（P〈0．01）。结论复明片有明显降低晶状体蛋白含量作用。     

艾滋病患者胃黏膜与外周血中人类免疫缺陷病毒感染和CD4~+T淋巴细胞数量的区室性差异的探讨

目的 探讨AIDS患者胃黏膜与外周血中HIV感染和CD4~+T淋巴细胞数量的区室性差异.方法 选取AIDS患者35例,对照组为HIV抗体阴性者10例,均进行胃镜检查并收集外周血.PCR法制备地高辛标记HIV-1长末端重复序列(LTR)、gag基因的双链cDNA探针,核酸原位杂交方法观察胃黏膜组织冰冻切片和外周血单个核细胞(PBMC)涂片H1V感染情况,免疫组织化学方法检测CD41T淋巴细胞,数据结果行t检验.结果 AIDS未治疗组胃黏膜中HIV阳性率为(1.67±1.48)%,PBMC中为(19.37±9.23)%.AIDS未治疗组与高效抗反转录病毒治疗(HAART)组各组间的胃黏膜HIV阳性率差异尤统计学意义(t=-0.996,t=-0.794,t=-0.461;P＞0.05).PBMC涂片中,治疗1～4年组HIV阳性率为(4.25±3.47)%,明显低于未治疗组的(19.37±9.23)%(t=3.000,P＜0.05).AIDS未治疗组胃黏膜单个核细胞(MMC)中CD4+T淋巴细胞阳性率为(12.53±8.14)%,PBMC中CD4+T淋巴细胞阳性率为(19.00±9.55)%,HAART1～4年组胃黏膜MMC中CD4~+T淋巴细胞计数为(37.44±18.00)%,仍低于对照组的(50.35±3.41)%(t=-4.620,P＜0.01),但PBMC中CD4+T淋巴细胞计数与对照组比较,差异无统计学意义(t=-2.094,P＞0.05).结论 胃黏膜与外周血中HIV感染和CD4~+T淋巴细胞数量存在区室性差异.     

含新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶基因重组腺病素的构建及鉴定

目的:构建表达新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶(Hemagglutinin-neuramidinase,HN)基因的重组腺病毒,为进一步研究HN基因对消化道肿瘤的抑制作用及分子机制建立基础.方法:用BamHⅠ和XbaⅠ双酶切质粒pVHN,将获得的HN基因片段连接入穿梭质粒pacAd5 CMV K-N pA,构建含HN基因的穿梭质粒pacAd5-HN.利用PacⅠ单酶切对pacAd5-HN和腺病毒基因组质粒(pAd5)进行线性化处理后应用脂质体介导法共转染AAV-293细胞,分别利用蚀斑纯化和RT-PCR、Western blot等方法对重组病毒进行筛选和鉴定,并测定所获得重组病毒的滴度.结果:所构建重组病毒可有效表达HN基因,表达产物分子量约为63 kD,重组病毒滴度为108～1010 PFU/ml.结论:成功构建含HN基因的重组腺病毒,所获得重组病毒的滴度可以满足体内外实验要求.     

40例乙型肝炎患者HBV逆转录酶基因耐药突变分析与表达载体构建

目的 分析40例慢性乙型肝炎患者血清中HBV逆转录酶区基因耐药相关突变,构建突变基因重组表达载体用于表型耐药分析.方法 从服用抗HBV核苷(酸)类似物的患者血清中提取病毒DNA,PCR扩增HBV RT全长基因,克隆到pGEM-Teasy载体中,随机挑选3～5个克隆进行DNA序列测定,以DNASTAR软件分析RT基因内与核苷(酸)类似物耐药相关的常见突变位点.用Xho Ⅰ和Nco Ⅰ双酶切pGEM-Teasy-RT及pTriEx-HBV(C)构建1.1表达载体,测序正确后转染Huh7细胞,检测HBsAg和HBeAg表达水平.结果 40例患者均分别检出拉米夫定、阿德福韦、恩替卡韦耐药相关的单一或联合突变;成功克隆了96条HBV RT基因,分别带有上述核苷(酸)类似物耐药相关变异的序列;挑选主要突变组合形式的40条RT基因构建pTriEx-HBV(C)1.1表达载体,转染Huh7细胞48 h后在培养上清中检测到HBsAg和HBeAg,表明表达载体构建成功.结论 本研究成功进行了临床患者HBV耐药相关突变分析与突变体重组表达载体构建,为进行表型耐药分析打下了基础.     

大鼠腹腔和静脉给予羟丙基-β-环糊精毒性比较实验研究

目的 给大鼠连续iv和ip羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD),观察是否产生蓄积毒性反应,确定毒性反应的靶器官及损害程度,并比较在试验剂量下2种给药方式毒性表现的差异.方法 给大鼠ip HP-β-CD 200 mg/kg、iv 54 mg/kg,连给30 d.观察一般状态反应,检测血液学、血液生化学、组织病理学等指标.结果 除ip给予HP-β-CD 200 mg/kg的动物表现出不同程度的腹膜刺激症状外,动物一般状况良好,体质量、进食量、血液学及血液生化学指标均无异常.但组织病理学观察可见,2种给药方式的动物肾脏均出现皮质部分肾小管上皮明显空泡化、细胞肿胀、胞浆呈疏松淡染的圆形空泡状;肺脏均出现肺泡及间隔内有泡沫细胞.结论 HP-β-CD ip给药剂量为200mg/kg、iv给药剂量为54 mg/kg,连给30 d,表现出明显的肾脏毒性和肺脏毒性,毒性表现程度无明显差异;ip给药对腹膜有刺激性.     

砷诱导人T淋巴细胞表达HMG2基因的克隆研究

目的为了解三氧化二砷诱导人T淋巴细胞的差异表达基因,探讨砷对淋巴细胞基因转录的影响机制.方法在体外用三氧化二砷处理人Jurkat T淋巴细胞(5μmol/L,24h)后,应用抑制性消减杂交技术(SSH)和克隆技术构建差异表达的cDNA文库,用PCR技术和测序技术鉴定阳性克隆.结果用SSH技术构建了由三氧化二砷诱导的Jurkat T淋巴细胞的差异表达基因的正向消减cDNA文库.经测序分析结果显示,该文库中含有高泳动类蛋白2(HMG2)基因片段,同源性98%.结论我们的研究结果提示三氧化二砷(5μM,24h)可诱导HMG2的转录,它在砷诱导淋巴细胞凋亡机制中可能起着重要的作用.     

产科因素对压力性尿失禁的发生及盆底肌力的影响

目的：探讨不同产科因素对压力性尿失禁的发生和盆底肌力的影响。方法采用国际尿控协会推荐的国际尿失禁标准问卷,对701例在新疆医科大学第一附属医院产科分娩并进行产后复查的初产妇进行问卷调查,按分娩方式分为阴道妥娩组（161例）和选择性剖宫产组（540例）,了解其孕期及产后6 w 尿失禁的发生情况,并测定盆底肌肉收缩及舒张功能,分析与尿失禁发生及影响盆底肌力有关的产科因素。结果701例产妇中有42例（5．99％）在产后6 w 左右出现了尿失禁症状;产后尿失禁的发生与分娩方式、新生儿体质量、孕前体质量、体质指数相关（P ＜0．05）;阴道分娩组、选择性剖宫产组的尿失禁发生率分别为11．18％（18/161）、4．44％（24/540）,两组差异有统计学意义（P ＜0．05）;阴道分娩组中与产后尿失禁发生有关的因素有新生儿体质量、孕前体质量和体质指数（P ＜0．05）,而与孕周、年龄、第二产程时间均无明显相关性。阴道分娩组的产后盆底肌力检测数值低于选择性剖宫产组,差异有统计学意义（P ＜0．05）。结论阴道分娩、新生儿体质量、孕前体质量、体质指数增加与产后压力性尿失禁的发生有关;阴道分娩、选择性剖宫产2种分娩方式均影响产后盆底肌力,阴道分娩可以明显降低产后盆底肌力。     

多功能穿刺模拟人与学生标准化病人结合教学模式在诊断学实践教学中的应用

目的探讨多功能穿刺模拟人与学生标准化病人（SSP）结合教学模式在诊断学实践教学中的应用效果。方法在四大穿刺术教学中,实验组采用多功能穿刺模拟人与SSP结合教学模式,对照组采用多功能穿刺模拟人教学模式。通过对两组四大穿刺术考核成绩和问卷调查比较多功能穿刺模拟人与SSP结合教学模式和单纯多功能穿刺模拟人教学模式的教学效果。结果实验组学生在考核成绩、综合能力等方面明显优于对照组。结论多功能穿刺模拟人与SSP结合教学模式能有效弥补单纯多功能穿刺模拟人教学的缺陷,值得推广应用。