乌司他丁、大黄对急性胰腺炎大鼠联合治疗效果分析

目的 通过采用乌司他丁与生大黄联合治疗急性胰腺炎大鼠动物模型，寻找治疗急性胰腺炎更好的治疗方法。方法 先建立急性胰腺炎大鼠模型，然后分为四组，分别测定每组血清液粉酶(AMS)肿瘤坏死因子(TNFα)及胰腺标本染色及大概生存时间。结果 A、B、C、D组TNFα、AMS含量及胰腺病理改变呈A，B，C，D，而生存时间显著不同。结论 乌司他丁、大黄联合治疗急性坏死性胰腺炎大鼠效果比单一效果更佳。     

乌司他丁脏器保护机制的研究进展

乌司他丁是救治急危重症患者的常用药物,本文系统阐述了乌司他丁对人体器官潜在的保护效应及其作用机制,如抗炎、抗氧化、免疫调节及抗凋亡作用等,以期为合理应用乌司他丁提供循证医学依据。     

持续静脉泵注利多卡因对脓毒症大鼠急性肺损伤及炎症反应的影响

目的探讨利多卡因对脓毒症大鼠肺损伤及炎症因子表达的影响。 方法采用随机数字表法将60只雄性成年Sprague Dawley大鼠分为假手术组、盲肠结扎穿孔（CLP）组、利多卡因组和乌司他丁组,每组各15只。假手术组大鼠打开腹腔后缝合,其他各组采用CLP法制备脓毒症模型。利多卡因组大鼠在给予10 mg/kg的负荷剂量后,以10 mg·kg^-1·h^-1的剂量通过尾静脉持续泵注利多卡因3h;乌司他丁组大鼠进行CLP的同时,以100 000 U·kg^-1·h^-1的剂量通过尾静脉持续泵注乌司他丁3 h;假手术组和CLP组用等量等渗NaCl溶液代替。于CLP后24 h处死大鼠,采用酶联免疫吸附实验（ELISA）法测定血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）及高迁移率族蛋白B1（HMGB1）表达水平;实时荧光定量PCR检测肺组织HMGB1 mRNA表达水平;苏木素-伊红（HE）染色法观察各组大鼠肺组织病理变化。另取40只大鼠（每组10只）用于观察4组大鼠72 h死亡情况。 结果4组大鼠血清中TNF-α、IL-6、HMGB1及HMGB1 mRNA表达水平比较,差异均有统计学意义（F = 189.886、237.952、175.999、179.491,P均< 0.001）。进一步两两比较发现,与假手术组比较,CLP组、利多卡因组和乌司他丁组血清TNF-α、IL-6、HMGB1及HMGB1 mRNA表达水平均显著升高（P均< 0.05）;与CLP组比较,利多卡因组和乌司他丁组血清TNF-α、IL-6、HMGB1及HMGB1 mRNA表达水平均显著降低（P均< 0.05）;与利多卡因组比较,乌司他丁组IL-6表达水平显著升高（P < 0.05）。HE染色结果显示,假手术组大鼠肺泡大小均匀、结构完整,肺泡上皮细胞形态正常;CLP组大鼠肺泡间隔增厚、间质充血水肿、炎症细胞浸润、肺泡塌陷;而利多卡因组和乌司他丁组病理学改变较CLP组均明显减轻,肺组织轻度水肿,肺泡及肺间质出现少量炎症。四组大鼠死亡构成比（0 /10、9/1、4/6、3/7）比较,差异有统计学意义（χ²=17.500,P < 0.001）。CLP组、利多卡因组和乌司他丁组大鼠死亡构成比均较假手术组显著升高（P均<0.008）;利多卡因组和乌司他丁组大鼠死亡构成比均较CLP组显著降低（P均<0.008）;而利多卡因组和乌司他丁组大鼠死亡构成比比较,差异无统计学意义（P > 0.008）。 结论持续静脉泵注利多卡因可以有效降低脓毒症大鼠炎症因子TNF-α、IL-6及HMGB1的表达,抑制肺组织中HMGB1 mRNA表达量,减轻脓毒症对肺组织的损伤,有效提高动物存活率,其减轻脓毒症炎症反应及肺保护作用疗效与乌司他丁相似。     

脐带间充质干细胞对重度烧伤大鼠肾脏保护作用的研究

目的：观察脐带间充质干细胞（UCMSCs）移植对大鼠严重烧伤后肾脏损伤的影响,为干细胞应用于烧伤后的脏器保护研究奠定基础。方法：获取并分离培养孕大鼠UCMSCs并用流式细胞技术鉴定细胞表面抗原。48只SD大鼠随机分为4组：正常对照组（n=12）、生理盐水组（n=12）、乌司他丁组（n=12）和UCMSCs组（n=12）。正常对照组不作任何处理,立即活杀取材;其余3组制备20％TBSAIII度烧伤模型（98℃,12s）,于伤后48h分别静脉注射生理盐水0．1ml／g（生理盐水组）、乌司他丁1．6×105U／kg（乌司他丁组）和UCMSCs106／k（uCMSCs组）,于给药后7、14d观察大鼠肾脏组织病理学,免疫组化法观察组织凋亡相关蛋白Bcl-2的表达,并进行血尿素氮（BUN）、肌酐（cr）水平的测定。结果：烧伤后7、14d的组织病理学观察显示,干细胞移植后的大鼠烧伤后肾脏组织充血、肿胀等病理学改变较乌司他丁组及生理盐水组有所减轻,随时间延长减轻更加明显;免疫组化观察显示UCMSCs组伤后7d和14d肾组织中Bcl-2的表达较乌司他丁组和生理盐水组明显增多,表明肾组织抗凋亡能力增强。大鼠烧伤后BUN和Cr均较正常对照组显著升高。乌司他丁治疗组除14dBUN较生理盐水组升高外,其余时间BUN和Cr均明显下降。UCMSCs组伤后7和14d两肾功能指标均明显下降,与生理盐水组和乌司他丁组比较差异均有显著性（P〈0．05）,显示干细胞治疗对肾功能有明显改善作用。结论：UC—MSCs移植可有效减轻重度烧伤后大鼠‘肾脏组织的损伤并改善肾脏功能。     

乌司他丁对急性坏死性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障的保护作用

目的 观察乌司他丁干预急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠后血TNF-α、二胺氧化酶(DAO)及肠黏膜组织紧密连接蛋白-1( zonula occludens-1,ZO-1)表达水平的变化,探讨其可能机制.方法 按完全随机法将SD雄性大鼠随机分为假手术组、ANP组及乌司他丁组.采用5％牛磺胆酸钠逆行注入胆胰管的方法制模.制模后6、24h取血检测TNF-α、DAO活性,胰腺及回肠组织常规病理检查,RT-PCR及免疫组化法检测回肠组织ZO-1 mRNA及蛋白的表达.结果 术后6h,ANP组胰腺大片坏死,大量炎细胞浸润;回肠黏膜绒毛上皮坏死、血管出血、炎细胞浸润.乌司他丁组的胰腺及回肠组织损伤较ANP组减轻.假手术组、ANP组、乌司他丁组术后6h的血TNF-α水平分别为(10.83±0.96)、( 181.89±4.93)、(128.23±2.40) ng/L;DAO活性分别为(354.79±3.67)、(117.21±5.58)、(282.98±9.12) U/L;回肠组织ZO-1蛋白表达量分别为(10.00±1.87)、(1.20±0.84)、(5.80±2.86)分;Z(O)-1 mRNA表达量为0.878±0.015、0.466±0.023、0.778±0.033.ANP组血TNF-α水平较假手术组明显升高,DAO活性、回肠组织ZO-1 mRNA及蛋白表达较对照组明显降低(P值均＜0.05);乌司他丁组的血TNF-α水平较ANP组降低,DAO活性、回肠组织ZO-1 mRNA及蛋白表达较ANP组明显升高(P值均＜0.05).结论 乌司他丁可能通过抑制TNF-α的过度释放、提高血浆中DAO活性,从而上调回肠组织中ZO-1 mRNA和蛋白表达,进而保护肠黏膜屏障.     

Production of Interleukin‐10 by Combining a Granulocyte and Monocyte Adsorption Carrier With Ulinastatin

Interleukin (IL)‐10 is an anti‐inflammatory cytokine mainly produced by monocytes and is essential for the induction of anti‐inflammatory intestinal macrophages with macrophage colony‐stimulating factor (M‐CSF). Thus, IL‐10‐ and M‐CSF‐rich conditions in colonic tissues seem to contribute to the improvement of pathological conditions in patients with inflammatory bowel diseases (IBD). We have already reported that ulinastatin, a serine protease inhibitor, increases M‐CSF production during granulocyte/monocyte (GM) adsorption to cellulose acetate (CA) beads (carriers for Adacolumn therapy). However, the effects of ulinastatin on IL‐10 production have not been clarified. The aim of the present study was to clarify the effects of ulinastatin on IL‐10 production during GM adsorption by in vitro experiments. Peripheral blood was divided into four groups: (Control) no ulinastatin added, no contact with CA beads; (1) no ulinastatin added, contact with CA beads; (2) ulinastatin added, no contact with CA beads; and (3) ulinastatin added, contact with CA beads. After incubation, IL‐10 in the plasma was measured. Compared with the level in the Control group, plasma IL‐10 was significantly higher only in group 3, in which ulinastatin was added in the presence of CA beads, but did not increase in the absence of CA beads. These results suggest that ulinastatin synergistically increases IL‐10 production with monocyte adsorption stimuli. By increasing not only M‐CSF but also IL‐10, a combination of ulinastatin and Adacolumn therapy may improve clinical efficacy for the treatment of IBD in terms of the induction of anti‐inflammatory intestinal macrophages.     

乌司他丁联合血必净治疗老年重症肺炎的临床研究

目的:探讨乌司他丁联合血必净治疗老年重症肺炎的疗效。方法:将160例老年重症肺炎患者随机分为对照组(A组)、乌司他丁组(B组)、血必净组(C组)、乌司他丁+血必净联合组(D组)各40例,A组予常规治疗,B组、C组、D组在A组基础上分别给予静脉滴注乌司他丁、血必净、乌司他丁和血必净7 d。比较各组治疗前后血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、降钙素原(PCT)水平、动脉血气分析,抗生素使用时间、机械通气时间、ICU住院时间和28d生存率。结果:D组治疗后TNF-α、IL-6、PCT显著下降,PaO_2、PaO_2/FiO_2升高程度及P(A-a)O_2下降幅度明显大于其他三组;抗生素使用时间、机械通气时间、ICU住院时间明显少于其他三组,28 d生存率则明显高于其他三组,P均0.05。结论:乌司他丁联合血必净辅助治疗老年重症肺炎疗效显著。     

乌司他丁在体外循环中对肺保护作用的临床研究

目的研究乌司他丁在体外循环(CPB)心脏直视手术中对肺损伤的保护作用。方法选择40例心脏手术患者随机分为两组(各20例),试验组给乌司他丁2万U/k(g麻醉诱导后CPB前静脉推注一半,另一半预充体外循环机内),对照组不给药。分别于麻醉诱导前(T1),阻断升主动脉30m(inT2),CPB结束后1(hT3)、24(hT4)、36(hT5)取桡动脉血标本,动态检测两组患者各时间点肿瘤坏死因子-(aTNF-a)和白细胞介素-10(IL-10);麻醉诱导前(T1),CPB结束后1(hT3)、24(hT4)和36(hT5)测定动脉血气,对比观察术后肺泡-动脉血氧分压差(A-aDo2)及呼吸指数(RI)。术后1h、12h、36h常规拍胸片,以胸片中有明显斑片状阴影、肺不张为阳性,对比观察肺部并发症发生率。结果①两组一般资料差异均无统计学意义(P>0.05)。②CPB开始后,两组桡动脉血TNF-a、IL-10进行性增高。TNF-a于CPB结束后1h达到最高,后逐渐下降,但仍高于CPB前,对照组增高更显著(P<0.01)。IL-10于CPB结束后24h达到最高,后逐渐下降,但仍高于CPB前,试验组增高更显著(P<0.05)。③对照组T3、T4、T5的A-aDo2及RI明显高于试验组。试验组与对照组比较,术后肺泡-动脉血氧分压差及RI低(P<0.01)。④肺部并发症发生率:实验组:明显斑片状阴影2例,没有肺不张发生;对照组:明显斑片状阴影4例,肺不张1例。结论在体外循环过程中,乌司他丁可以通过抑制炎症因子TNF-a的产生,上调抗炎因子IL-10的释放,减轻肺损伤,改善术后肺功能。     

二尖瓣置换术患者ICAM-1变化及乌司他丁的抑制作用

将20例择期行二尖瓣置换手术患者随机分为两组，观察组应用乌司他丁(12000U／kg，于麻醉诱导后静注)，对照组不加乌司他丁。分别在麻醉诱导后、体外循环30分钟、手术结束时、术后1、2天抽取桡动脉血标本，用ELISA法测定血清中的细胞间粘附分子-1(ICAM-1)。结果 两组血清ICAM-1基础值均在正常范围内，体外循环开始30分钟两组ICAM-1水平均下降，与基础值有显著差异，但两组间无显著差异；手术结束和术后第1天，对照组血清ICAM-1值逐渐上升并超过基础值，观察组逐渐下降至基础值；手术后第2天，对照组血清ICAM-1开始下降但仍超过基础值，观察组无变化，两组对比有显著差异。认为乌司他丁能明显抑制二尖瓣置换术患者血清ICAM-1的表达，从而有效降低患者由体外循环引发的炎症反应。     

心脏瓣膜置换术患者围术期乌司他丁对基质金属蛋白酶9的影响

目的观察乌司他丁对心脏瓣膜置换术患者围术期基质金属蛋白酶9的影响,以了解乌司他丁对体外循环所致的肺损伤是否具有保护作用。方法40例择期心脏瓣膜置换术患者,随机分为2组(每组20例)。乌司他丁组按12ku/kg体重计算乌司他丁用量,分别在麻醉诱导和心肺转流开始时按6ku/kg静注乌司他丁共两次,对照组用等量生理盐水替代,用法同乌司他丁组。分别于麻醉诱导前,心脏直视手术体外循环10min,30min,心脏直视手术体外循环后1h,3h,6h抽取桡动脉血,用ELISA法测定血浆基质金属蛋白酶9的浓度。同时测定诱导前,心脏直视手术体外循环后1h,3h,6h等时间点的肺死腔率和血浆肺泡动脉血氧分压差。结果两组患者年龄、体重、性别比、体表面积、血红蛋白、红细胞压积、术前心肺功能,病种,总转流时间、主动脉阻断时间,手术类别和手术时间的变化均无统计学意义。心脏直视手术体外循环10min至循环后6h两组基质金属蛋白酶9均较麻醉诱导前明显升高(P<0.05),均在心脏直视手术体外循环达高峰。循环后1h至6h至两组肺死腔率,肺泡动脉血氧分压差均较诱导前明显升高(P<0.05),肺死腔率在体外循环后1h达高峰,肺泡动脉血氧分压差在体外循环后3h达高峰。乌司他丁组体外循环30min至体外循环后6h时基质金属蛋白酶9和循环后1h至6h肺死腔率,肺泡动脉血氧分压差均明显低于对照组(P<0.05)。结论乌司他丁能明显减轻心脏瓣膜置换术患者围术期基质金属蛋白酶9的过度释放,减轻术后早期肺死腔率和肺泡动脉血氧分压差,对改善肺氧合保护肺功能有一定的作用。