蓝莓对四氯化碳所致急性肝损伤大鼠肝组织GCLCmRNA及蛋白表达的影响

目的：探讨蓝莓对四氯化碳（CCl4）所致急性肝损伤大鼠肝组织γ‐谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ‐GCS）催化亚基（GCLC）mRNA及蛋白表达的影响。方法将50只雄性Wistar大鼠分为5组,即空白组、模型组、蓝莓汁低剂量预防组（蓝低组,10．0g／kg）、蓝莓汁高剂量预防组（蓝高组,20．0g／kg）、联苯双酯预防组（联苯双酯组,0．15g／kg）,每组10只,连续灌胃7d,1次／天,其后用CCl4复制大鼠急性肝损伤模型。光镜下观察大鼠肝脏病理学变化,全自动生化分析仪测定血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）及天冬氨酸氨基转移酶（AST）活性,酶联免疫吸附法检测肝匀浆中丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、还原型谷胱甘肽（GSH）活力及含量,分别采用反转录PCR（RT‐PCR）、免疫组织化学法、Westernblot检测大鼠肝组织中GCLCmRNA及蛋白表达。结果蓝低组、蓝高组和联苯双酯组大鼠肝细胞变性及坏死程度显著轻于模型组（P＜0．05）,血清ALT、AST及肝匀浆MDA均显著低于模型组（P＜0．01）,而肝匀浆CAT、SOD、GSH均显著高于模型组（P＜0．01）,肝组织GCLCmR‐NA及蛋白表达均显著高于模型组（P＜0．01）。3组相比,蓝高组与联苯双酯组效果相似,略优于蓝低组。结论蓝莓对CCl4诱导的大鼠急性肝损伤有一定预防作用,可能与上调大鼠肝脏GCLC表达,减轻氧化应激性肝损伤有关。     

泪腺炎患者血清性激素变化及其与γ-IFN、IL-4的相关性

目的 观察泪腺炎患者血清中雌二醇(estradiol,E2)、睾酮(testosterone,T)、泌乳素(prolactin,PRL)水平的变化,并探讨这种变化与血清中γ-干扰素(γ-interferon,γ-IFN)、白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)变化的关系.方法 收集42例2013年11月至2014年10月我院确诊为泪腺炎的患者炎症期(炎症期组)与炎症缓解期(缓解期组)的血清,40例同年龄段于我院体检的正常人血清作为正常对照组,采用电化学发光法检测血清中E2、T、PRL的水平,酶联免疫吸附法测定血清中γ-IFN、IL-4水平.结果 泪腺炎患者炎症期组血清E2、PRL水平分别为(64.12±35.92) ng·L-1和(17.63±8.59) μg·L-1,显著高于缓解期组的(43.16 ±26.57)ng·L-1和(10.30±5.59) μg·L-1及正常对照组的(41.92±21.68)ng·L-1和(9.08±2.61) μg·L-1,差异均有统计学意义(均为P＜0.05);炎症期组与缓解期组血清T分别为(0.80±1.36) μg·L-1和(0.79±1.42) μg·L-1,与正常对照组的(1.76±2.49) μg·L-1相比差异均有统计学意义(均为P ＜0.05).炎症期组血清γ-IFN、IL-4水平分别为(353.12±108.36)ng·L-1和(1200.43±314.69)ng·L-1,显著高于缓解期组的(192.68±43.16)ng·L-1和(919.38±227.16)ng·L-1及正常对照组的(190.93±36.40)ng·L-1和(853.37±172.31)ng·L-1,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).E2与γ-IFN、IL-4水平呈正相关(均为P＜0.05);T与γ-IFN、IL-4水平呈负相关(均为P＜0.05);PRL与γ-IFN、IL-4水平呈正相关(均为P＜0.05).女性患者炎症期组血清γ-IFN水平为(344.46±112.06)ng·L-1,高于男性的(292.98±71.27)ng·L-1(P＜0.05),E2/T比值为665.36,明显高于男性的13.91(P ＜0.05).结论 泪腺炎患者血清中性激素E2、PRL的升高、T的降低及E2/T比例失调可能介导Th1、Th2细胞免疫通路的平衡紊乱从而致病.女性体内高水平的雌激素可能是导致女性易患自身免疫性疾病的主要原因.     

大剂量丙种球蛋白联合纳洛酮治疗乙型脑炎疗效分析

目的：观察大剂量丙种球蛋白联合纳洛酮治疗乙型脑炎的疗效。方法安康市中心医院2012年6月至2014年9月收治的95例乙型脑炎患儿随机分成两组。对照组47例,给予常规综合治疗(抗病毒治疗+营养支持+对症治疗);研究组48例,在常规综合治疗的基础上,给予丙种球蛋白静脉输注1g·kg-1·d-1联合纳洛酮(0.01~0.02)mg/kg治疗。结果研究组患儿平均退热时间、抽搐时间及意识障碍持续时间较对照组明显缩短(t值分别为4.526、3.371、4.487,均P<0.01);研究组较对照组呼吸衰竭发生率明显降低(χ2=14.341,P<0.05);研究组治愈率显著高于对照组(χ2=19.234,P<0.01)。结论丙种球蛋白联合纳洛酮治疗乙型脑炎较单纯综合治疗更为有效,能够显著降低死亡率,提高治愈率,减少后遗症的发生,应在临床治疗中普遍推广及应用。     

哮喘患儿体内EOS、IgE、IL-4及IFN-γ水平的检测及临床意义

目的：探讨哮喘患儿体内嗜酸性粒细胞(eosinophil,EOS)、免疫球蛋白E(IgE)、白介素4(IL-4)及γ干扰素(IFN-γ)水平的检测及临床意义,为临床疾病的诊断和治疗提供依据。方法抽选湖北省鄂州市鄂钢医院2012年11月至2013年6月收治的95例哮喘患儿(哮喘组,其中急性发作期47例、缓解期48例),并抽选同期在本院体检的79例健康患者为对照研究(健康组),采用肺功能仪测定两组的肺功能,并采用痰液诱导、酶联免疫吸附法( ELISA)分别测定患儿痰液中的EOS百分率及血清中IgE、IL-4、IFN-γ水平。结果哮喘组患儿的1秒用力呼气容积(FEV1)/用力肺活量(FVC)的比值(FEV1%)为(69.67±6.63)%,明显低于健康组的(102.27±11.93)%,差异具有统计学意义(t=22.750,P<0.001);哮喘组患儿的FEV1占预计值百分比为(70.45±9.62),明显低于健康组的(90.13±6.34),差异有统计学意义(t=15.582,P<0.001)。哮喘组患儿的痰EOS百分率、血清中IgE、IL-4水平均高于健康组(t值分别为321.962、82.644、76.913,均P<0.05),哮喘组患儿的IFN-γ水平明显低于健康组(t=30.207,P<0.001)。急性发作期哮喘患儿的痰EOS百分率及血清中IgE、IL-4水平均高于缓解期哮喘患儿的(t值分别为15.752、40.762、31.162,均P<0.05),急性发作期哮喘患儿的IFN-γ水平明显低于缓解期哮喘患儿的(t=35.892,P<0.05)。结论血清中IL-4、IgE水平及痰液中EOS百分率升高、血清IFN-γ水平降低,与哮喘的发生、发展密切相关,对其治疗及病情判断具有重要价值。     

反式白藜芦醇对β－淀粉样肽致痴呆大鼠的保护作用

目的：观察反式白藜芦醇（ TR）对β－淀粉样肽（Aβ25－35）致痴呆大鼠海马旁回的保护作用。方法先将SD大鼠分为3,20月龄2大组,然后再分为假手术组、模型组、低与高剂量实验组。用Aβ25－35制痴呆模型后,实验组灌胃给TR 10,40 mg? kg－1? d－1,假手术组、模型组均给予0．9％NaCl（1 mL／100 g）,连续10 d。用实时定量PCR法检测8组大鼠海马及皮质半胱氨酸蛋白酶－3（caspase－3）、DNA聚合酶γ的表达。结果模型组与假手术组的caspase－3、DNA聚合酶γ表达水平比较差异有统计学意义（ P＜0．01）,说明造模成功。 TR对caspase－3、DNA聚合酶γ表达水平的下调非常显著（ P＜0．01）。模型组3月龄较20月龄大鼠的caspase－3表达量明显增高（ P＜0．05）。实验组3月龄与20月龄大鼠caspase－3表达量差别有统计学意义（ P＜0．05）。结论 TR对损伤的大鼠海马周围皮层神经元有保护作用。     

替米沙坦诱导大鼠肝细胞自噬促进肝脏胆固醇代谢的机制研究

目的探讨替米沙坦诱导大鼠肝细胞自噬对肝脏胆固醇代谢的影响及作用机制。方法将肝脏原代细胞分为正常对照组(Con)、替米沙坦1μmol/L组(Tel 1组)、替米沙坦3μmol/L组(Tel 3组)、替米沙坦10μmol/L组(Tel 10组)、替米沙坦10μmol/L联合PPARγ抑制剂GW 9662组(Tel+G组)。Tel 1、Tel 3、Tel 10组分别按1、3、10μmol/L浓度加入替米沙坦,Tel+G组加入10μmol/L替米沙坦及PPARγ抑制剂GW9662,培养24 h。检测肝细胞胆固醇浓度,Western blot法检测微管相关蛋白轻链3(LC3)、自噬蛋白区域(Beclin-1)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、雷帕霉素靶分子(mTOR)表达水平。结果 Tel 3、Tel 10组胆固醇水平低于Con、Tel 1组(P<0.05)。Tel 1、Tel 3、Tel 10组LC3Ⅱ/Ⅰ比值、Beclin-1蛋白水平依次升高(P<0.05)。与Con、Tel 1组比较,Tel 3、Tel 10组p-AMPK/AMPK蛋白比值升高(P<0.05),p-mTOR/mTOR蛋白比值降低(P<0.05)。与Tel 10组比较,Tel+G组胆固醇水平、p-mTOR/mTOR蛋白比值升高(P<0.05),LC3II/I比值、p-AMPK/AMPK蛋白水平降低(P<0.05)。结论替米沙坦可通过诱导大鼠肝细胞自噬影响肝脏细胞胆固醇代谢,其机制可能与激活AMPK/mTOR途径和上调PPARγ有关。     

硼替佐米通过PPARγ途径抑制肺动脉平滑肌细胞TRPC蛋白的表达

目的验证蛋白酶体抑制剂硼替佐米(Bortezomib,BTZ)对调节肺动脉平滑肌细胞瞬时受体通道蛋白表达的影响,探讨其对调节瞬时受体通道蛋白表达的分子机制。方法原代培养大鼠肺动脉平滑肌细胞,将细胞分为常氧组、常氧+BTZ组、低氧组及低氧+BTZ组,60 h后,通过免疫印迹法测定PPARγ、TRPC1、6蛋白的表达。另将原代培养的肺动脉平滑肌细胞分为低氧组、低氧+BTZ组、低氧+BTZ+T0070907组,60 h后,通过免疫印迹法测定TRPC1、6蛋白的表达。结果(1)与常氧组相比,低氧组、低氧+BTZ组细胞TRPC1蛋白的相对表达量分别为(158±11)%和(112±8)%,低氧+BTZ组细胞TRPC1蛋白表达量相较于低氧组明显降低(P<0.05);(2)与常氧组相比,低氧组、低氧+BTZ组细胞TRPC6蛋白的相对表达量分别为(146±9)%和(107±6)%,低氧+BTZ组细胞TRPC6蛋白表达量相较于低氧组明显降低(P<0.05);(3)与常氧组相比,低氧组、低氧+BTZ组细胞PPARγ蛋白的相对表达量分别为(65±7)%和(98±6)%,低氧+BTZ组细胞PPARγ蛋白表达量相较于低氧组明显升高(P<0.05);(4)与低氧组相比,低氧+BTZ组、低氧+BTZ+T0070907组,TRPC1蛋白的相关表达量分别为(65±7)%和(92±9)%,低氧+BTZ+T0070907组细胞TRPC1蛋白表达量相较于低氧+BTZ组明显升高(P<0.05);(5)与低氧组相比,低氧+BTZ组、低氧+BTZ+T0070907组TRPC6蛋白的相关表达量分别为(71±5)%和(97±7)%,低氧+BTZ+T0070907组细胞TRPC6蛋白表达量相较于低氧+BTZ组明显升高(P<0.05)。结论硼替佐米通过抑制低氧诱导的肺动脉平滑肌细胞PPARγ的下调,调节TRPC蛋白的表达。     

CXCR3阻断剂Genistein对大鼠胰腺移植后排斥反应的影响

目的 探讨Genistein对大鼠移植胰腺急性排斥反应的影响以及作用机制.方法 以Wistar和SD大鼠为供体,SD大鼠为受体,建立胰腺移植模型.分成同种系移植组、异种系移植组和Genistein治疗组(在异种系移植后每天腹腔注射Genistein 10 mg/kg体重,共7 d),每组lO只.术后7 d切除移植物行病理学观察及CXCR3免疫组化染色,抽血检测血清IFN-γ、IL-2浓度.结果 同种系移植组移植物无急性排斥反应,无CXCR3表达.血清IFN-γ、IL-2浓度分别为(2.76±0.66)pg/ml和(11.83±1.86)pg/ml;异种系移植组的移植胰腺发生强烈的镜下排斥反应,CXCR3强阳性表达,血清IFN-γ、IL-2浓度分别为(32.64±2.52)PS/ml和(29.59±1.71)PS/ml,较同种系移植组显著升高(P<0.05);Genistein治疗组的移植胰腺排斥反应减轻,CXCR3弱阳性表达,血清IFN-γ、IL-2浓度分别为(15.94±1.95)Pg/ml和(22.62±1.76)ps/ml,较异种系移植组显著降低(P<0.05),但高于同种系移植组(P<0.05).结论 Genistein通过阻断CXCR3的表达,可有效减轻胰腺移植后急性排斥反应.     

猪囊尾蚴抗原cC1与γ-干扰素融合蛋白在大肠杆菌中的表达

目的： 构建含猪囊尾蚴抗原ｃ Ｃ１ ｃ Ｄ Ｎ Ａ 与猪γ 干扰素（ Ｉ Ｆ Ｎ γ） 的融合表达载体。方法： 从已克隆的含人猪囊尾蚴共通抗原ｃ Ｃ１ 的质粒中, 用 Ｐ Ｃ Ｒ 方法扩增出含酶切位点及接头的ｃ Ｃ１ 和 Ｉ Ｆ Ｎ γｃ Ｄ Ｎ Ａ, 两ｃ Ｄ Ｎ Ａ 经接头融合后构建成融合形式的原核表达载体转入大肠杆菌 Ｘ Ｌ Ｂｌｕｅ。结果： 经酶切分析, 表明重组载体中含１５ｋｂ 插入片段。 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 显示一５２ ｋ Ｄａ 的诱导产物。结论： 猪 Ｉ Ｆ Ｎ γ和猪囊尾蚴抗原ｃ Ｃ１ 融合ｃ Ｄ Ｎ Ａ 在大肠杆菌中获得表达。