福尔蒙瓦膜在DNA形态结构电镜观察中的应用

电镜在核酸的形态结构研究中有重要作用.以往在核酸电镜标本制作中强调用碳膜或火棉胶膜,以保证样品在观察中不被电子束催毁,福尔蒙瓦未受重视.火棉胶膜及碳膜的制备复杂且对有关试剂要求严格,而福尔蒙瓦膜制作简单,比较牢固且能保存较长时间.为此我们用福尔蒙瓦膜为核酸分子的支持膜探讨其在核酸分子形态结构观察中应用的可能性.     

广州市一起志贺氏菌痢暴发的分子流行病学分析

本文对61株福氏2a(Shigella flexneri 2a)分离株进行了耐药谱、质粒图谱、菌落原位杂交和Southern blot分析。结果显示:从广州1992年暴发的一起菌痢流行中分离的30株暴发株和当年在广州分离的28株散发株的耐药谱和质粒图谱相同,而且菌落原位杂交证明它们均有4.7kb的ipaBC基因,Southern blot进一步指出了上述分离株的ipa BC基因位于7.6kb,2.5kb和1.6kb的EcoR Ⅰ片段。从分子水平证明了1992年广州市一起志贺氏菌痢(幅氏2a)暴发为单一克隆株引起,该克隆为当地1992年福氏菌的优势克隆。而福州1991年分离的3株同型菌分属不同的克隆。     

家猪自然感染汉坦病毒与肾综合征出血热关系的分子流行病学调查

目的:为了解家猪在肾综合征出血热(HFRS)疫区的流行病学意义,探索家猪感染汉坦病毒(HV)与HFRS发病的关系。方法:采用间接免疫荧光法(IFA)、反向间接血凝法(RPHA)、免疫酶染色法、RT-PCR检测HV抗原与抗体,同时分离HV。结果:在家猪心、肺、肝、脾、肾等脏器及其血液、尿、粪、唾液等标本中检出HV抗原与抗体,并从多种HV抗原阳性标本分离到HV,证实家猪对HV易感,而且遍及多种脏器组织。以HV抗原阳性的组织、血液及排泄物等二次感染成功。同时从乳猪脾、肺、肾和脑组织检出HV抗原,表明HV似乎可直接进入中枢神经系统参与损伤。结论:家猪具备作为HFRS扩散宿主的先决条件。     

广州东山区2001～2005年饮食服务者病原微生物携带监测

目的了解东山区饮食服务行业人员5年中携带沙门菌的菌群分布及其对13种抗生素的耐药性,为防疫工作提供参考。方法收集该行业2001~2005年参加健康体检者粪便共260552人份,按照食品卫生微生物学检验标准(GB4789·4-94)进行粪便中沙门菌的分离和鉴定;采用K-B纸片法,对分离的沙门菌进行耐药性分析。结果从260552人/份中共分离出沙门菌706株,阳性率为0·271%,其中,7~9月份的阳性率较高,检出菌株数占菌株总数的57·22%。菌群分布是以B群和C2群为主。260株沙门菌对丁胺卡那霉素、庆大霉素、新霉素、妥布霉素和氟哌酸的敏感性较高(96%以上),对红霉素、四环素、羧苄青霉素和链霉素有较高的耐药性,并存在多重耐药株。结论2001~2005年广州东山区饮食服务业人员携带沙门菌阳性率为0·271%,以B群和C2群为主,存在多重耐药菌株。     

产肠毒性大肠杆菌的耐药性和质粒特征

对从广州市某医院儿科病房腹泻儿童粪便中检测获得的４６株产肠毒性大肠杆菌（ＥＴＥＣ）的４种遗传型（ＬＴ－ｈ、ｓＴ－ｐ、ＳＴ－ｈ和ＣＦＡ／Ｉ）菌株，用１４种常用抗生素进行敏感试验和质粒特征分析，结果：在１２４株大肠杆菌中，分别用ＥＴＥＣ的４种￣（３２）Ｐ－ＤＮＡ基因探针检测，总阳性率为３７．１０％（４６／１２４），ＳＴ－ｐ的阳性率最高，占６０．８７％（２８／４６），有三例病人分别受到２株具有不同遗传型ＥＴＥＣ感染。药物敏感试验，多数的菌株对青霉素Ｇ（１００％）、红霉素（７３．９１％）、氨苄青霉素（６９．５７％）和羧苄青霉素（６５．２２％）有抗性，８２．６１％以上的菌株对多粘菌素Ｂ、氟哌酸、庆大霉素和先锋霉素Ｖ是敏感的，４６株ＥＴＥＣ的质粒携带率为６３．０４％（２９／４６），各菌株之间的质粒图谱不尽相同，菌株的质粒携带数１－１１个不等，分子量１．１－７５．６Ｍｄ．发现抗四环素和氯霉素的菌株中，质粒的含量有显著差异（χ￣２＝１５．９９、Ｐ＜０．０１）。     

标准化预告值概念及标化方法探讨

笔者提出标准化预告值（ＳＰＶ）新概念及相应标化方法，本文将不受患病率或样本构成影响，而是在一个指定的标准构成条件下获得的理论预告值定义为标准化预告值，它只随试验的灵敏度和特异度的变化而变化。标准化预告值的意义在于用统一标准去解释、判断和衡量诊断试验的诊断价值。     

同型半胱氨酸和金属硫蛋白对血管内皮细胞的影响

目的 :观察同型半胱氨酸 (Hcy)血症时小鼠肝、心、肾组织金属硫蛋白 (MT)含量的变化 ,以及MT对Hcy损伤内皮细胞的影响。 方法 :①昆明种小鼠 12只 ,分为对照组和高Hcy组 ,高Hcy组小鼠腹腔注射Hcy(16μmol/kg) ,复制高Hcy血症模型 ,对照组同法注入等量生理盐水。以Cd 血红素饱和法测肝、心和肾组织MT水平。②培养人血管内皮细胞 ,分为空白对照组 ,单用Hcy(1mmol/L)组及MT(2× 10 -5mol/L)和Hcy(1mmol/L)同时应用组 ,孵育人血管内皮细胞 6h测定细胞存活率、培养液乳酸脱氢酶 (LDH)活性和蛋白漏出量。结果 :Hcy组小鼠肝、心和肾组织MT水平较对照组分别增加 2 10 %(P <0 .0 1)、133%(P <0 .0 5 )和 6 0 %(P <0 .0 1)。MT +Hcy组培养的内皮细胞存活率较Hcy组培养的内皮细胞升高 13.9%(P <0 .0 1) ,培养液LDH和蛋白漏出量较Hcy组分别降低 2 7.1%(P <0 .0 5 )和 31.4%(P <0 .0 1)。结论 :Hcy诱导小鼠肝、心、肾组织MT生成 ,MT拮抗Hcy的细胞损伤作用。     

融合表达的副溶血弧菌不耐热性溶血毒素包涵体复性的研究

目的 构建融合表达载体，获得具有生物活性的副溶血弧菌不耐热性溶血毒素。方法 克隆tlh基因，构建表达载体pET32a ／tlh，融合表达副溶血弧菌不耐热性溶血毒素，用8mol／L的尿素溶解包涵体．亲和层析纯化目的蛋白．采取逐步透析、降低蛋白浓度、加人氧化还原剂等复性方法。结果 复性蛋白具有溶血活性及免疫原性。结论 通过克隆tlh基因，构建融合表达载体pET32a -tlh，采取纯化、复性方法，获得具有融血活性及免疫原性的副溶血弧菌不耐热性溶血毒素。     

广州地区扎幌样病毒的检出及基因型分析

目的：了解广州腹泻儿童是否存在扎幌样病毒(Sapporo—like virus，SLV)感染。方法：在2003年秋冬季腹泻流行期间在南方医院儿科收集临床诊断为病毒性腹泻患儿的粪便标本，并采用半套式反转录聚合酶链反应(RT—PCR)方法检测。纯化阳性标本PCR产物并测序，然后将其同GenBank中的参比毒株序列比较。结果：收集的169份标本中有1份SLV(CH03354)PCR扩增阳性，检出率为0．59％，同源性分析表明该毒株属于SLVGⅠ—1群。结论:广州地区存在SLV所致感染，本次实验检出毒株基因型与安徽毒株不同，说明我国不同地区可能存在不同的SLV基因型。     

海水环境创伤弧菌感染的病理学研究

目的观察总结海水环境中感染创伤弧菌（vibrio vulnificus，Vv）后局部组织和器官的病理学特点，为临床Vv感染的诊治提供一定的实验依据。方法128只SPF级昆明小鼠，随机分成4组，每组32只，分别为海水Vv菌液浸泡组（A组）、等渗盐水Vv菌液浸泡组（B组）、单纯无菌海水浸泡组（c组）以及单纯无菌致伤组（D组）。每组又随机分成0，6，12，24h4个不同时间组，每组8只。D组小鼠仅无菌致伤，A、B、C组小鼠在无菌致伤后按分组设计均浸泡于相应液体中45～60min。于不同时段对各组局部肌组织及主要脏器组织进行取材、制片、HE染色和观察；采鼠尾血进行Vv的分离培养。结果A组创伤组织的损伤最为严重：0h时，可见肌纤维变性、溶解和断裂，但炎症反应不明显；12h时肌组织溶解坏死更加明显，肌间隙增宽，渗出及出血明显，并伴有大量中性粒细胞浸润；24h时，肌组织大片溶解坏死，微脓肿形成。总体来讲，Vv感染的A、B两组要比未感染的c、D两组病变严重，而组织修复过程也要缓慢。海水菌液浸泡组脱离浸泡后24h时仍无好转趋势，并且该组部分小鼠Vv血培养结果为阳性。Vv血培养阳性的小鼠其主要脏器也出现不同程度的损伤，以肺和肾脏的广泛出血性损伤为主。结论在海水环境中Vv经由皮肤伤口侵入后，其伤口往往表现为感染早、发展快且病变严重的特点。感染组织病理学特点为组织大片的溶解坏死和大量中性粒细胞浸润并伴有脓腔形成；Vv可经伤口人血，引发败血症，并导致小鼠肺、肾等多脏器的损伤。