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81.
82.
目的 构建同时携带白细胞介素2(IL-2)和NK4基因的真核表达载体(pIRES-IL-2-IRES-NK4),观察其在防治肿瘤中的潜在应用前景.方法 根据Pubmed上公布的IL-2及NK4 mRNA序列,设计扩增IL-2及NK4 cDNA的特异性引物,以PBV220-IL-2质粒和PCAGGS/hNK4质粒为模板,分别扩增IL-2及NK4基因,并将IL-2及NK4基因分别克隆在真核表达载体pIRES-SEQ的XhoI、MLuI位点和SalI、NotⅠ位点.获得同时携带IL-2和NK4基因的重组真核表达质粒pIRES-IL-2-IRES-NK4.该重组质粒转染肝癌细胞HepG2后,检测目的基因的转染表达及表达产物对HepG2细胞增殖的影响.结果 通过对构建质粒克隆进行测序及酶切,证实携带IL-2和NK4双基因的真核表达质粒pIRES-IL-2-IRES-NK4构建成功.用pIRES-IL-2-IRES-NK4转染HepG2细胞后24 h后在荧光显微镜下可观察到细胞有较强的绿色荧光表达,48 h时荧光更强;逆转录聚合酶链反应结果表明转染pIRES-IL-2-IRES-NK4质粒细胞的IL-2及NK4基因表达明显增强.酶联免疫吸附测定检测结果表明,转染组细胞较对照组细胞培养上清中IL-2及NK4蛋白表达水平明显增强.转染组48 h后的IL-2、NK4蛋白表达水平为2.139、1.956 mg/L,明显高于未转染组的0.492、0.620 mg/L.四甲基偶氮唑盐法结果表明转染真核表达质粒pIRES-IL-2-IRES-NK4的细胞表达上清,有明显抑制肝癌细胞HepG2增殖的活性,且有剂量效应关系.结论 本研究成功构建了同时携带IL-2和NK4基因的重组真核表达质粒pIRES-IL-2-IRES-NK4,该质粒可有效转染肝癌细胞,且转染细胞表达上清有明显抑制肝癌细胞HepG2增殖的活性,提示该重组质粒有潜在防治肿瘤的应用前景. 相似文献
83.
目的 应用超声测定重症急性胰腺炎(SAP)的早期胃肠功能.方法 入选23例重症急性胰腺炎(SAP)和20例慢性呼吸衰竭急性发作患者,禁食12 h后,经胃管注入300 mL生理盐水,采用胃窦单切面法,测定并计算出胃排空速率(GER)和胃动力指数(MI),以箱型图比较两组之间差异.结果 SAP患者GER和MI均较慢性呼吸衰竭明显减低,差异有统计学意义(P<0.001).结论 超声实时测定胃窦部运动可以在一定程度上评价SAP患者胃肠功能障碍的严重程度. 相似文献
84.
目的建立小鼠结核分枝杆菌耐利福平株静脉感染小鼠模型。方法 30只BALB/c雌性小鼠经尾静脉感染结核分枝杆菌耐利福平株每只106CFU,观察小鼠一般状况,并分别在感染后6周、10周、14周处死小鼠,进行脾、肺组织病理切片、抗酸染色、计脏器荷菌数。结果感染后小鼠体重呈逐渐上升趋势,脏器病理变化随时间推移由急性炎症逐渐转为慢性炎症反应,抗酸染色均为阳性,脏器荷菌数与感染剂量相对应,并至少可持续14周。结论成功建立了小鼠结核分枝杆菌耐利福平株静脉感染动物模型,为其进一步用于结核病防治研究奠定了一定的基础。 相似文献
85.
86.
目的:探讨葡萄胎(HM)组织中印迹基因H19 mRNA表达情况,了解其与HM的关系。方法:实时荧光定量PCR检测36例完全性葡萄胎、25例部分性葡萄胎、21例早孕绒毛组织中H19 mRNA表达。结果:完全性葡萄胎和部分性葡萄胎组织中H19 mRNA表达水平[(0.16±0.14)和(0.19±0.18)]均明显低于早孕绒毛中H19 mRNA表达水平(1.28±1.95)(P=0.017,P=0.021)。结论:印迹基因H19与葡萄胎发生具有一定的相关性。 相似文献
87.
目的通过调查重庆市部分产妇关于婴幼儿喂养的知识、态度、行为现况,为母婴保健宣传项目的开展提供有效参考和指导。方法对重庆医科大学附属第一、二医院妇产科住院产妇进行问卷调查,询问产妇对婴幼儿喂养相关知识的了解程度,以及与喂养相关的态度和行为情况。结果产妇对婴幼儿喂养方面的知识平均得分率为(61.40±0.21)%,产妇对于哺乳相关知识掌握较好,但对婴幼儿营养相关疾病预防了解较少。正性的关于婴幼儿喂养的态度和行为产妇的比例并不高,尤其是纯母乳喂养的比例仅23.25%,超过半数的人对喂养没有信心。结论重庆产妇关于婴幼儿喂养方面的知识、态度和行为情况并不理想,喂养方面的健康宣教有待进一步改进和加强。 相似文献
89.
目的:建立毛细管色谱法测定盐酸青藤碱中三氯甲烷的残留量。方法:采用DB-624毛细管色谱柱(30 m×0.32 mm,涂层厚1.8μm),载气为氮气,进样口温度为200℃,柱温为65℃,检测器温度为230℃,FID为检测器,顶空进样法,水为溶剂,平衡温度70℃,平衡时间45min。结果:三氯甲烷在0.1845~18.45μg·mL-1范围内呈良好的线性关系(r=0.9995);平均回收率为98.2%,RSD为2.2%(n=6);最低检出限为36.9 ng·mL-1。结论:该方法灵敏、简单、准确,可用于测定盐酸青藤碱中三氯甲烷的残留量。 相似文献
90.
目的 调查研究河北省亚麻蝇属昆虫的种类、分布及区系特征.方法 采用昆虫分类学原理和方法 .结果 在河北省发现亚麻蝇属昆虫21种.结论 河北省亚麻蝇属昆虫种数约占该属全国已知种数的50.00%,属于古北区系. 相似文献