γ射线照射前后IEC-6细胞蛋白质组的差异分析

目的　分析γ射线照射后肠上皮细胞系 (IEC 6)细胞蛋白质组的改变。方法　分别提取正常IEC 6细胞和经过 2 5Gy照射后细胞的蛋白样品 ,采用固相pH梯度双向凝胶电泳技术进行分离 ,考马斯亮蓝染色后经PDQuest软件分析双向电泳图谱 ,对部分差异的蛋白点进行胶内酶切、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI TOF MS)测定其肽质量指纹图谱 ,在网上检索数据库鉴定差异蛋白 ,并采用RT PCR间接证实其变化。结果　获得了较好的双向电泳图谱。图像分析显示 :在正常IEC 6细胞中检测到 ( 60 8± 3 9)个蛋白质点 ,细胞照射后的样品中检测到 ( 5 95± 3 1)个蛋白质点 ,其中匹配的蛋白点为 3 96个。对表达差异的 16个蛋白质点进行肽质量指纹图谱分析 ,经数据库检索后初步鉴定为一些与代谢、自由基清除、细胞骨架相关的蛋白。RT PCR证实了ERP2 9基因在照射后增强。结论　电离辐射可以诱导IEC 6细胞蛋白质组发生改变。     

ARROW单腔中心静脉导管用于卵巢癌腹腔化疗的临床观察

目的：了解ARROW单腔中心静脉导管在卵巢癌腹腔化疗中的应用价值。方法：采用美国ARROW公司生产的一次性单腔中心静脉导管穿刺腹腔，对15例卵巢癌患者行35次腹腔化疗。结果：ARROW单腔中心静脉导管均能安全刺入腹腔，无并发症，化疗副反应轻，结论ARROW单腔中心静脉导管用于卵巢癌腹腔化疗简便，安全，病人接受性好。     

土家族迟发性脊椎骨骺发育不良一家系报告

脊椎骨骺发育不良(spondyloepiphyseal dysplasia)是一种罕见的X性连锁隐性遗传病,脊柱发育障碍会引起短躯干性侏儒,患者智力正常,头面部无畸性.国内曾有报道[1,2],但土家族中尚少见报道.     

雌激素受体α在胰岛素致动脉粥样硬化中的作用

目的 探讨在胰岛素诱导动脉粥样硬化发生的过程中,雌激素受体α(estrogen receptor α,ER-α)的作用.方法 ①8周龄Apoe/Lepr基因双敲小鼠按随机数字表法分为对照组和实验组(4 IU胰岛素组),每组4只.HE染色及免疫组化观察小鼠血管动脉斑块形成及α-平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin-α,α-SMA)、ER-α的表达.②用胰岛素及甲基化转移酶抑制剂干预大鼠血管平滑肌细胞,采用RT-PCR及Western blot检测DNA甲基化酶、ER-α的表达,划痕实验及流式细胞仪检测ER-α对血管平滑肌细胞增殖的影响.结果 ①实验组小鼠血管出现动脉斑块,免疫组化结果显示α-SMA、ER-α表达降低(P＜0.05).②与对照组比较,胰岛素处理后血管平滑肌细胞中DNA甲基化酶的mRNA与蛋白表达升高(P＜0.01),而ER-α表达下降(P＜0.01),甲基化酶抑制剂可以消除这种差异,高表达ER-α后,划痕实验及流式细胞仪检测结果显示血管平滑肌细胞增殖减慢(P＜0.05).结论 胰岛素通过促进DNA甲基化酶的表达,诱导ER-α基因甲基化,使ER-α表达下降,最终导致动脉粥样硬化的发生.     

550例COVID-19患者血清IgM和IgG检测结果分析

 目的 分析新型冠状病毒肺炎（COVID-19）患者血清抗体IgM和IgG水平,为临床诊疗提供依据。方法 2020年2月27日—3月5日采用化学发光法定量检测法检测COVID-19确诊住院患者的血清抗体水平,统计分析不同病程（<7 d、7~14 d、>14 d）、不同性别及不同年龄段（<18岁、18~岁、41~岁、>65岁）患者抗体检测阳性率及抗体水平的差异。结果 550例确诊COVID-19患者中,男性253例,女性297例,中位年龄为61（50,69）岁。IgM和/或IgG抗体总体阳性率为92.00%,IgG总体阳性率为91.45%,IgM总体阳性率为76.18%。IgM或IgG阳性率随疾病进程逐渐升高,阳性率从早期的31.25%上升至94.82%。病程超过14 d后IgG抗体阳性率高于IgM抗体阳性率（χ²=49.697,P<0.001）。不同年龄组间抗体阳性率比较,差异有统计学意义（χ²=15.339,P=0.002）,以41~及>65岁年龄组阳性率较高;不同性别组抗体阳性率比较,差异无统计学意义（χ²=0.006,P=0.094）。IgM在发病后1~2周内产生,2~3周内达到峰值,4周以后逐渐降低到正常水平;而IgG在发病后1周左右开始产生,3周左右达到峰值,50 d仍持续保持稳定水平。不同年龄段及不同性别组患者抗体IgM和IgG水平比较,差异无统计学意义（均P>0.05）。结论 IgM或IgG在病程早期的阳性率相对较低,随疾病进程逐渐升高,但抗体水平未呈现出年龄和性别的差异,抗体检测能辅助COVID-19患者的诊断。     

腺病毒介导的RNAi技术抑制Peroxiredoxin Ⅰ的表达

目的:为深入研究PeroxiredoxinⅠ(Prx-Ⅰ)基因与肿瘤细胞放射敏感性的关系,构建基于腺病毒的抑制Prx-Ⅰ基因表达的RNAi载体。方法:从质粒载体pAVU6-Prx切下包含U6启动子在内的表达盒,连接到腺病毒穿梭载体pAdTrack,然后在大肠杆菌中重组为完整腺病毒DNA,并将其转染293包装细胞制备腺病毒颗粒,再利用腺病毒感染目的肿瘤细胞,干扰其Prx-I基因的表达。结果:成功地将U6表达盒连接到穿梭载体,获得重组的腺病毒DNA,并制备出高滴度病毒。将病毒感染肿瘤细胞SW480以后可以明显抑制Prx-Ⅰ基因的表达,并使细胞受辐射后的细胞凋亡比例增大。结论:基于腺病毒的RNAi干扰是有效的,这为进一步在体内探讨肿瘤放疗增敏机制奠定了基础。     

重组VIP腺病毒载体的构建及其在293细胞的表达

目的 构建血管活性肠肽重组腺病毒载体,以期用于体内实验研究.方法 利用RT-PCR扩增小鼠大脑VIP mRNA,亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV,在pAdeasy内同源重组,筛选阳性克隆,酶切、测序鉴定正确,线性化后脂质体法转染293 细胞进行包装、扩增,利用报告基因EGFP对病毒滴度进行监测.PCR、免疫荧光鉴定pAdeasy-VIP感染293 细胞后VIP基因的表达,ELISA检测重组病毒转染后293细胞上清中的表达.结果 测序、酶切证实VIP基因重组腺病毒载体构建成功.RT-PCR,免疫荧光检测pAdeasy-VIP病毒感染的293细胞,均有VIP的表达.与对照组相比,重组病毒转染后293细胞上清中VIP多肽的表达明显增高.结论 成功构建了含小鼠VIP基因的重组腺病毒载体,并成功表达VIP多肽.     

血流感染病原微生物诊断技术的研究与应用

血流感染(BSI)是指病原微生物侵入血液循环并在体内繁殖的一种全身感染性疾病。近年来因其高发病率及病死率而受到越来越多的关注,如何实现BSI致病菌的快速检测及其药敏结果的准确回报,是长期困扰临床的问题。血培养是诊断BSI病原微生物的"金标准",但其阳性率低且结果报告周期长,因此需探索新的技术以弥补此缺陷。近年来,微生物多种诊断技术,如阳性报警时间、核酸杂交技术、核酸扩增技术、质谱检测技术、基因芯片和测序技术等逐步从研究阶段走向BSI病原微生物诊断的临床应用阶段。本文旨在对BSI病原微生物基于全血标本和基于血培养的检测技术进行综述,为BSI病原微生物快速诊断和治疗提供方法学依据。     

简化MISSED评分对急诊科脓毒症休克患者预后的评估价值

目的:探讨简化MISSED评分(sMISSED评分)在急诊科对脓毒症休克患者的应用价值。方法:回顾性分析我院急救创伤部2016-08—2018-06期间收治的110例脓毒症休克患者的临床资料,以入院后28 d患者生存状态为观察终点,使用受试者工作曲线下面积(AUC)评价sMISSED评分、APACHEⅡ评分,SOFA评分预测患者预后的价值,采用Kaplan-Meier生存分析法分析患者生存情况。结果:sMISSED评分、APACHEⅡ评分、SOFA评分预测脓毒症休克患者预后的AUC分别是0.712(95%CI:0.608～0.816),0.788(95%CI:0.698～0.879),0.748(95%CI:0.651～0.845),sMISSED评分2～3组病死率明显高于0～1分45.3%(29/64) vs 19.6%(9/46),χ~2=7.847,P=0.005。两组行生存分析采用Kaplan-Meier法,差异有统计学意义(P=0.002)。结论:sMISSED评分简单实用,在急诊科对评估脓毒症休克预后及危险分层有一定价值。     

新疆地区胸痛中心POCT检测心肌肌钙蛋白质量控制现状调查

目的了解新疆地区胸痛中心床旁快速检验(POCT)检测心肌肌钙蛋白(cTn)的质量控制情况,为规范胸痛中心POCT的临床应用提供依据。方法新疆生产建设兵团临床检验中心于2018年5月20-30日对新疆地区的9家三级甲等医院胸痛中心POCT检测cTn质量控制情况进行调查。参与调查的人员包括胸痛中心负责人、医生和护士,医院检验科负责人,POCT厂家工程师。采用问卷和电话交流相结合的方式进行调查,内容包括分析前、分析中和分析后相关环节的质量控制情况。结果 9家胸痛中心有2家只在急诊科配备检测cTn的POCT仪器,其余7家在胸痛中心内部多个科室配备有POCT,且有2家胸痛中心存在同时使用2个不同品牌POCT的情况。在9家胸痛中心中,仅有1家医院开展了POCT检测cTn室内质量控制工作,仅1家参加原国家卫生和计划生育委员会临床检验中心的室间质量评价计划。5家胸痛中心的cTn结果无规范的结果报告方式。6家胸痛中心的POCT以厂家工程师不定期维护保养为主。结论新疆地区胸痛中心POCT检测cTn缺乏质量管理规范,未能发挥检验学科在胸痛中心建设中的作用。