放射卫生学教学中对参与式教学法的应用和体会

正核能、放射性核素及各种放射装置在生产和生活中特别是医疗卫生领域中得以广泛应用,对工作人员、公众及其后代有效进行辐射防护的需要催生了放射卫生学。此课程涵盖了众多概念、标准、原则和具体防治措施,内容虽然具有较强的条理性和实用性,但枯燥、不容易理解和记忆。在本校大部分专业(包括核医学、检验医学、影像医学、预防医学、临床医学等)都需要进行相关课程的学习。如何进行教学改     

体外辐射模拟P53依赖的小鼠肠干细胞损伤研究

目的 建立6 Gy小鼠肠干细胞体外辐射模型,模拟在体P53依赖的肠干细胞辐射损伤修复过程.方法 分离C57BL/6(野生型)、P53-/-小鼠小肠隐窝,分别于基质胶内接种进行3D培养,24 h后予X线6 Gy照射.比较两组隐窝克隆出芽过程和照后6d克隆存活率.对野生型隐窝克隆用RT-PCR检测照后24 h内不同时间点P53靶基因Bax、Bbc3、Mdm2、P21、Bcl2l1以及肠干细胞特征性基因Lgr5、Olfm4、Ascl2的表达.结果 C57BL/6和P53-/-小鼠小肠隐窝于接种后48 h出芽,在接种后96 ～ 120 h形成类器官样结构.6 Gy辐照可诱导C57 BL/6隐窝细胞24 h内大量死亡,完全抑制克隆出芽,仅(43.84 ±5.73)％的克隆存活;而对P53-/-小鼠隐窝出芽时间无影响,且有(83.69±5.89)％隐窝克隆存活,显著高于对照组(P＜O.01).在野生型隐窝克隆中,P53下游靶基因的表达可被辐射迅速激活,并在24 h内维持高水平,而干细胞特征性基因在12h迅速下降,24 h到达最低水平.结论 6 Gy照射小鼠小肠隐窝能较好地模拟在体P53依赖的促凋亡因素对肠干细胞的损伤.     

听教学示范课的体会

听教学示范课是青年教师提高教学技能的重要手段。听课之前需有准备、有目的,听课时需关注示范教师的课堂教学环节、教学艺术和课堂教学组织,听课后需根据自身情况做好总结与分析。     

粒细胞集落刺激因子动员自体干细胞对放射性肺损伤的防治作用

目的 研究粒细胞集落刺激因子（G-CSF）动员自体干细胞对放射性肺损伤的防治作用。方法 75只C57 BL/6实验小鼠采用随机数表法分为健康对照组、单纯照射组及治疗组。采用胸部单次照射剂量14 Gy建立放射性肺损伤模型,治疗组照前以重组人粒细胞集落刺激因子（G-CSF,250 μg·kg^-1·d^-1,连续5 d）行自体骨髓干细胞动员,照射后逐日动态观测小鼠一般状况、死亡率,主要于3、4个月时相点通过组织学结合图像分析等方法,比较研究肺损伤及防治效应。结果 胸部局部照射14 Gy是造成小鼠放射性肺纤维化的适宜剂量。单纯照射组小鼠死亡率为37.5%,死亡时间主要在照后11周。治疗组及健康对照组全程无动物死亡。照射后3个月肺系数（肺/体重）单纯照射组（10.8±1.49）和治疗组（8.53±1.55）较健康对照组（5.83±0.45）明显升高（F=23.20,P<0.05）,但治疗组较单纯照射组减小（P<0.05）。病理组织学变化3个月时主要为肺组织的变性、坏死及炎细胞浸润伴成纤维细胞及局灶性纤维增生;4个月时肺泡及间质炎减轻,而纤维增生及胶原沉积则愈加明显,但治疗组的病理变化均较单纯照射组为轻。组织学评分肺泡炎在3个月时单纯照射组、治疗组均与健康对照组存在差异（F=11.93,P<0.05）,纤维化评分在3、4个月时相点单纯照射组、治疗组均较健康对照组升高（F=28.73、16.85,P<0.05）,但治疗组较单纯照射组降低,4个月时存在差异（P<0.05）,天狼猩红染色结合图像分析测定胶原含量（IOD值）4个月较3个月升高,3、4个月单纯照射组各为4 653±1 018、11 174±1 999,治疗组为2 380±314、6 687±661,较健康对照组的251±54、2 001±264明显升高（F=17.70、17.79,P<0.05）,但治疗组升高程度较单纯照射组明显降低（P<0.05）。结论 采用照射前G-CSF行自体干细胞动员可减轻放射性肺损伤,降低死亡率,提示其对放射性肺损伤的防治具有正向作用。     

研究生助教参加防原医学实验教学的实践与思考

实验教学是防原医学教学的重要组成部分,加强实验教学有利于培养学员实际操作能力、综合分析能力和创新性思维能力.当前研究生担任实验助教在高校正逐步开展,但存在很多问题.从研究生的角度,对实验教学设立研究生助教的作用和意义,存在的问题及对策作初步探讨.     

重组真核表达载体pEGFP-N1/PDGF-A的构建及真皮干细胞的转染

目的克隆血小板衍生生长因子A链(plateletderivedgrowthfactorAchain,PDGFA)基因,以增强型绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)载体pEGFPN1为骨架,携带PDGFA基因进入真皮间充质干细胞(dermisdrivedmesenchymalstemcells,DMSCs),为采用转入PDGFA基因的DMSCs修复创面奠定基础。方法采用RTPCR二步分离法,以人肝癌细胞系(SMC7721)的总RNA为模板,扩增PDGFA基因的全长cDNA编码序列,克隆入载体pMD18T,随后又将PDGFA基因亚克隆入pEGFPN1载体中,构建PDGFA基因的真核表达载体pEGFPN1/PDGFA,并采用Fugene6介导转染技术将PDGFA基因导入DMSCs。结果克隆到PDGFA基因的全长cDNA序列,经测序验证,其序列与GenBank所报告的该基因的序列完全一致。结论成功地将PDGFA基因克隆到pEGFPN1载体中,并实现了PDGFA基因在DMSCs的表达。     

头颈部肿瘤放疗相关口腔并发症和治疗

放疗是头颈部肿瘤患者常见的治疗方式。头颈部放疗常会导致口腔颌面部并发症, 因该部位组织结构复杂, 发病机制多样, 现有的治疗方案和研究进展较为局限。本文重点对最常见的放射性口腔黏膜炎、放射性唾液腺损伤及放射性龋齿进行系统总结, 回顾了现有发病机制假说、治疗及研究进展, 以期为深入研究相关病理机制和新的预防、治疗手段提供一定的参考。     

异体骨髓间充质干细胞在骨髓嵌合小鼠体内分化为肝细胞的实验研究

目的 探讨小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)在体内分化为肝细胞的可行性.方法 雌性C57BL/6J小鼠全身一次性接受10Gy 60Coγ射线照射后立即接受同品系绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)转基因小鼠骨髓间充质干细胞移植.移植后1周、1、3个月取骨髓嵌合小鼠肝脏,石蜡切片行GFP抗体免疫组化,冰冻切片在荧光显微镜下观察GFP阳性细胞在肝内分布.石蜡切片行GFP抗体和白蛋白(albumin,Alb)抗体以及GFP抗体和细胞角蛋白18(cytokeratin 18,CK18)抗体免疫荧光双标染色法,以此检测GFP阳性细胞在受体小鼠肝内的分化情况.结果 移植后1周、1、3个月骨髓嵌合小鼠肝内皆可见GFP阳性细胞,且有随时间减少的趋势,并都可见GFP和Alb双阳性细胞.结论 异体骨髓间充质干细胞可在骨髓嵌合小鼠体内分化为表达Alb和CK18的肝细胞,为肝组织的再生和修复提供了新思路.     

电离辐射诱导小鼠小肠隐窝和绒毛的基因表达分析

目的 通过基因表达的芯片分析方法,观察电离辐射引起的小鼠小肠上皮隐窝和绒毛基因表达的改变,探讨隐窝细胞的DNA损伤和修复、细胞周期调控的特点.方法 20只5周龄C57/BL6小鼠雄性20～22 g,随机分组,对照组不经电离辐照,处理组经12 Gy电离辐射全身照射后,于4、8、24 h分离小肠隐窝和绒毛上皮细胞,用cDN...     

γ射线照射前后IEC-6细胞蛋白质组的差异分析

目的　分析γ射线照射后肠上皮细胞系 (IEC 6)细胞蛋白质组的改变。方法　分别提取正常IEC 6细胞和经过 2 5Gy照射后细胞的蛋白样品 ,采用固相pH梯度双向凝胶电泳技术进行分离 ,考马斯亮蓝染色后经PDQuest软件分析双向电泳图谱 ,对部分差异的蛋白点进行胶内酶切、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI TOF MS)测定其肽质量指纹图谱 ,在网上检索数据库鉴定差异蛋白 ,并采用RT PCR间接证实其变化。结果　获得了较好的双向电泳图谱。图像分析显示 :在正常IEC 6细胞中检测到 ( 60 8± 3 9)个蛋白质点 ,细胞照射后的样品中检测到 ( 5 95± 3 1)个蛋白质点 ,其中匹配的蛋白点为 3 96个。对表达差异的 16个蛋白质点进行肽质量指纹图谱分析 ,经数据库检索后初步鉴定为一些与代谢、自由基清除、细胞骨架相关的蛋白。RT PCR证实了ERP2 9基因在照射后增强。结论　电离辐射可以诱导IEC 6细胞蛋白质组发生改变。