响应面法优化广金钱草多糖的酶法提取工艺

目的研究酶法提取广金钱草多糖的最佳工艺条件。方法在单因素实验的基础上,根据Box-Behnken试验设计原理,采用加权评分法以广金钱草提取物中多糖得率和多糖含量为综合评价指标,建立二次多项式回归方程的预测模型．构建以综合评分为响应值的响应曲面和等高线图,考察酶解温度、酶解时间和酶用量3个主要因素对多糖提取效果的影响以及因素间的交互作用。结果回归模型拟合性良好,置信度较高。酶法提取广金钱草多糖的最佳工艺条件为：料液比1：40,pH5．5,酶解温度49．94℃,酶解时间1．53h,酶添加量为2．00％。主要因素对提取效果的影响程度为：酶解时间〉酶解温度〉酶用量。各因素之间存在交互作用,且达到极显著水平。结论酶法处理可提高广金钱草多糖的提取效率。本实验优选的工艺稳定可行,可为相关生产加工企业提供有益的参考。     

六棱菊的生药学研究

目的:建立六棱菊的生药鉴定方法。方法:利用植物形态、性状、显微、理化鉴别的方法。结果:六棱菊茎皮层存在大型裂隙,茎、叶表皮细胞均有大量非腺毛及少量腺毛存在。结论:为六棱菊药材的鉴别及质量标准制定提供依据。     

22种樟科植物DNA条形码分子鉴定

目的 筛选适合樟科植物的DNA条形码，对采集的22种樟科植物进行鉴定分类。方法 以22种樟科植物为实验材料，提取其DNA，使用不同的DNA条形码引物进行聚合酶链式反应（PCR）扩增，电泳检测后进行双向测序。采用Codon Code Aligner软件对测序峰图和序列进行校对、拼接并去除正反向引物序列。将序列导入DNAMAN，进行多序列对比，查看并分析碱基变异位点。用MEGA计算不同种植物的遗传距离（K2P），根据遗传距离分析变异程度，基于邻接法构建系统进化树。结果 采用3对DNA条形码通用引物对22种樟科植物的DNA进行扩增测序后通过比较基因序列的特异碱基位点成功鉴别出其中20种植物。结论 matK序列能鉴定4个木姜子属植物；rbcL除粗脉桂外，对实验材料中楠属的3个物种都能进行区分；matK+rbcL+rpoB序列结合可鉴别20种樟科植物。其中matK序列对樟科植物鉴定效果最好，结果也表明将DNA条形码对植物进行组合鉴定，效果更佳。从分子角度研究樟科植物之间的亲缘关系，同时也为药用植物资源调查、栽培种植、开发保护利用提供依据。     

盐胁迫蜜环菌Real-time PCR内参microRNA的筛选

目的:在利用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)进行microRNA(miRNA)表达分析的过程中,选择合适的内参miRNA对数据标准化起到重要作用。方法:该文挑选了13个蜜环菌候选miRNA对其前体进行生物信息分析,PMRD预测其前体相似序列,并用RNAfold对候选miRNA前体及其相似序列进行二级结构预测。利用Real-time PCR检测在受盐胁迫前后两种基因型蜜环菌(基因型A,基因型B)miRNA的表达量,并结合geNorm,NormFinder,BestKeeper软件分析其表达稳定性,筛选合适的内参。结果:对候选miRNA的9条前体进行二级结构预测以及特征分析,证明预测的miRNA属于miR家族具有典型的茎-环结构且成熟的miRNA位于其前体的5'或是3'端;geNorm分析表明,基因型A蜜环菌可选择Novel-4*,Novel-9作为内参组合,基因型B可选择Novel-9,Novel-16作为内参组合;NormFinder分析结果显示,Novel-9在基因型A蜜环菌和基因型B蜜环菌中都有较好的稳定性;BestKeeper分析显示Novel-12*在基因型A蜜环菌中稳定性较好,Novel-2*在基因型B蜜环菌中稳定性较好。结论:稳定性最优的内参miRNA为Novel-9,为进一步开展蜜环菌miRNA调控机制研究奠定了基础。     

基于转录组测序揭示适度干旱胁迫对甘草根基因表达的调控

适度干旱胁迫可促进甘草有效成分的积累,提高药材质量。该研究以栽培6个月的甘草根为材料,设置适度干旱胁迫组(土壤相对含水量40%~45%)和对照组(土壤相对含水量70%~75%),分别应用Illumina HiSeq 2000进行转录组双末端测序,分析甘草根响应适度干旱胁迫的差异表达基因。在适度干旱胁迫组和对照组中分别得到80 490 490,82 588 278个Clean reads,经序列拼接和去冗余处理分别得到94 828,305 100个Unigene序列,序列长度的中位数分别为1 007,1 125 nt。差异表达基因分析表明,适度干旱胁迫抑制细胞壁中β-木糖苷酶、天冬酰胺酰内肽酶、GDP-L-岩藻糖合酶等酶的基因表达,可能抑制根细胞的初生壁降解与程序性细胞死亡;促进萜类、黄酮类化合物生物合成的关键酶基因的表达,进而促进甘草有效成分的积累;促进生长素、乙烯、细胞分裂素的生物合成和信号转导,进而促进根的发生和细胞增殖;促进脱落酸、茉莉酸的生物合成和信号转导,进而提高甘草对干旱胁迫的适应能力;抑制赤霉素、油菜素内酯等激素的生物合成和信号转导,进而抑制地上茎的伸长。     

广金钱草生殖生物学探索

目的:考察广金钱草生殖生物学特征,为该药材的资源开发与利用提供参考。方法:通过野外观测、室内分析及人工套袋授粉等方法研究广金钱草的繁育系统、开花习性、传粉方式及花粉-胚珠比、杂交指数等生殖生物学特性。结果:广金钱草的花为两性花,开花高峰时间9:30~11:00,日开花数量随开花天数的变化近似于正态分布曲线,单花花期1~2 d,种群开花历时45 d;柱头在花即将开放到开后8 h内均具有可授性;花粉-胚珠比8 000±1 225;杂交指数4;人工套袋试验显示以自交为主,异交亲和;传粉昆虫为双翅目的蜂类和膜翅目的蝇类。结论:广金钱草繁育系统以自交为主,异交亲和,需要传粉者。     

降真香化学成分及药理作用研究进展

降真香为我国海南、广东、广西、云南等省区的特色地道药材,被《全国中草药汇编》,《中国药用植物图鉴》,《中国民间生草药原色图谱》等典籍所收载,主要含有生物碱、酚类及挥发油类化合物,降真香叶具有芳香气味,可以治疗感冒、咳嗽,熟果可食,果肉味甜,微带麻舌感,并可入药助消化,根可止血定痛、消肿生肌、平气喘,树脂具有解热、止痢等作用。现代药理研究表明,降真香具有抗肿瘤、抗菌及细胞毒性等生物活性。本文主要针对降真香主要化学成分和药理活性的研究概况进行综合阐述,为进一步对其资源综合利用和开发提供参考。     

广金钱草种子的化学成分和DPPH自由基清除活性研究

目的 对广金钱草Desmodium styracifolium种子的化学成分及其清除DPPH自由基活性进行研究。方法 采用硅胶、聚酰胺、Sephadex LH-20凝胶柱色谱等色谱方法进行分离纯化,通过NMR、MS等波谱数据进行结构鉴定。比较不同极性提取物总黄酮的量及其对DPPH自由基的清除活性。结果 从广金钱草种子的不同极性萃取部位中分离得到10个化合物,分别鉴定为豆甾醇(1)、邻苯二甲酸二正丁酯(2)、儿茶素(3)、苯甲酸(4)、麦芽酚(5)、3-O-乙酰基-(-)-表儿茶素(6)阿福豆苷(7)、3'-甲氧基-表儿茶素(8)、山柰酚-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(9)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(10)。结论 其中化合物4～6、8为首次从山蚂蝗属植物中分离得到,化合物2、3、7、9为首次从广金钱草中分离得到。广金钱草种子的各段萃取物均表现出一定的DPPH自由基清除活性。     

土壤因子对艾纳香有效成分的影响研究

目的:研究艾纳香有效成分与土壤因子的相关性,筛选影响其含量的主导因子。方法:GC测定艾纳香中l-龙脑的含量,紫外-可见分光光度计测定总黄酮的含量,理化分析法测定土壤因子,应用相关分析、逐步回归分析及灰色关联度分析对土壤因子与有效成分的关系进行综合分析。结果:艾纳香中l-龙脑含量与有效硫呈显著负相关(P<0.05),总黄酮含量与p H、碱解氮、交换性钙、交换性镁呈显著负相关(P<0.05);经逐步回归分析发现,影响l-龙脑含量的主导因子为有效硫,影响总黄酮含量的主导因子为p H;经灰色关联度分析发现,p H为影响艾纳香有效成分的重要因子,其次为碱解氮和有效硫。结论:无论是选择适宜产地还是施肥,都应重视和考虑氮、硫及土壤p H对艾纳香质量的影响。     

2016~2018 年广东省佛山地区育龄妇女细小病毒B19 的感染情况分析

目的　回顾性分析2016 年1 月~ 2018 年12 月佛山地区育龄妇女细小病毒B19（human parvovirus B19, HPVB19 ）感染情况的变化趋势,为临床诊断和治疗提供依据。方法　采用酶联免疫吸附法对佛山地区9 846 例育龄妇 女进行血清HPVB19 IgM 的检测,并对检测结果进行数据统计学分析。结果　在9 846 例育龄妇女中,血清HPVB19 IgM 的阳性率为7.35%,2016~2018 年的血清IgM 阳性率分别为9.59%,5.24% 和6.76%,三年间的阳性率差异有统计 学意义（χ2=48.61,P<0.01）。通过对2016~2018 年各个季度数据的分析发现:第二和第三季度血清HPVB19 IgM 的阳 性率显著高于第一和第四季度,不同季节之间的阳性率差异有统计学意义(χ2=16.78,P<0.01);在不同年龄段之间育龄 期妇女HPVB19 IgM 的阳性率差异无统计学意义(χ2=2.52,P=0.28)。结论　佛山地区育龄妇女HPVB19 的感染率较高, 孕前检测应着重HPVB19 的检测。