人血栓调节蛋白基因编码片段的克隆及在真核细胞中的表达

目的 构建人血栓调节蛋白（hTM）基因真核表达质粒，并导人两种真核细胞[非洲绿猴肾母细胞（COS-7细胞）和脐静脉内皮细胞（HUVECs）]中表达，为临床血栓病的基因治疗提供实验依据和物质基础。方法采用PCR法扩增hTM基因的表达片段，HindⅢ＋EcoR Ⅰ酶切后与pcDNA3．1（＋）／neo质粒连接成pcDNA3．1／hTM。经鉴定确认后，由阳离子脂质体包裹转染COS-7细胞及HUVECs，RT-PCR和免疫组化法分别检测转染后细胞hTM的mRNA及蛋白的表达。结果双酶切及测序鉴定均证实hTM基因表达片段被成功克隆，pcDNA3．1／hTM经脂质体介导能有效地转染COS-7细胞和HUVECVs。结论成功构建pcDNA3．1／hTM重组质粒，并且能在两种真核细胞中高效表达，为进一步的基因治疗和对TM抗凝机理研究提供了物质基础。     

腔内预衬在人工血管内皮化中的应用

目的介绍腔内预衬在人工血管内皮化中的应用. 方法收集近年相关文献并加以综合分析. 结果腔内预衬包括:化学预衬(胶原、纤维结合素、层粘连蛋白、聚左旋赖氨酸、明胶和细胞外基质等),预凝 (血浆、血液、血清和纤维蛋白凝胶等),化学结合(肝素、精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸和植物凝集素)和表面修饰.大多数预衬物都能明显提高内皮细胞黏附. 结论腔内预衬能促进人工血管内皮化,但对浓度和孵化时间还需进一步研究.     

创伤与免疫

近年来,创伤后免疫功能的变化日益受到重视,在分析创伤并发症如致命性败血症和成人呼吸窘迫综合症等原因时,已注意到机体防御机能这一重要因素。在外科领域内探讨创伤,手术和麻醉对免疫功能的影响,是极重要的。 创伤后免疫的一些变化 创伤(手术、外伤、烧伤等)达到一定严重程度,可影响机体的免疫系统,使免疫机能降低。 (一)非特异性免疫改变 损伤早期,中性粒细胞功能就受到抑制。     

希罗达一线治疗晚期或复发性结直肠癌

目的　评价希罗达 一线治疗中国人晚期或复发性结直肠癌的疗效及安全性。方法6 0例晚期或复发性结直肠癌患者均给予希罗达 口服 ,每日 2次 ,餐后服用 ,12 5 0mg·(m2 )·-1次 -1,连续服用 14d后停药 7d。治疗周期为 2 1d ,至少治疗 2个周期。结果　本组部分缓解 (PR) 14例 ,病情稳定 (SD) 2 4例 ,疾病进展 (PD) 15例 ,总有效率 2 3.3% ,中位生存期为 14 .7个月 ,1年生存率为 6 3.9% ,2年生存率为 33.4 %。Ⅲ、Ⅳ级不良反应主要为腹泻 4例 ,贫血 2例 ,手足综合征 1例。Ⅰ、Ⅱ级不良反应为皮肤色素沉着 2 0例 ,手足综合征 18例 ,腹泻 10例。结论　希罗达 治疗中国人晚期或复发性结直肠癌疗效肯定 ,患者耐受性良好。     

泰素、奥沙利铂动脉介入治疗进展期胃癌

紫杉醇（paclitaxel）是抗微管蛋白药物，美国FDA已正式批准其为治疗晚期乳腺癌和卵巢癌的第一线或第二线用药。临床研究表明，紫杉醇是治疗肺癌、头颈部癌、食管癌、胃癌、结直肠癌的有效化疗药物。日本已将紫杉醇（泰素）作为胃癌化疗的第一线用药。重庆医科大学附属第一医院外科2001年3月-2004年10月以泰素（taxol）＋奥沙利铂（oxalipatin）动脉介入治疗进展期胃癌11例，取得较好的近期疗效。     

急性下肢深静脉血栓形成的溶栓抗凝治疗

急性下肢深静脉血栓形成 (acutedeepveinthrombosisolowerlimbs ,ADVT)是一种常见的外科疾病 ,若不及时治疗可引起患肢静脉功能不全 ,遗留严重后遗症。若并发肺栓塞则可危及生命。ADVT的药物治疗至今是临床难题。近年来新药不断出现 ,但单药应用疗效不理想。 2 0 0 2年 11月～     

脾肠联合移植对大鼠小肠移植免疫耐受的影响

目的　探讨脾肠联合移植对小肠移植免疫耐受的诱导作用。方法　选用SD大鼠为供体、Wistar大鼠为受体 ,进行异位全小肠和脾脏联合移植。实验分 3组 ,每组 6只。A组 :小肠移植非免疫干预组 ;B组 :受体脾切除 ,脾肠联合移植组 ;C组 :小肠移植环孢霉素A(CsA)治疗组。术后 3、5、7、10d取移植小肠回肠段 0 .5～ 1.0cm进行病理学检查 ,用病理图像分析系统测量黏膜厚度 ,绒毛高度和隐窝深度。采用TdT介导的脱氧核苷酸原位末端标记法 (TUNEL)检测 3、5、7d移植小肠黏膜细胞凋亡 ,评价移植小肠急性排斥反应损伤程度。结果　A、B两组均有不同程度的急性排斥反应损伤 ,但A组高于B组 ,移植后 3、5、7d分别属于轻、中、重度排斥 ,10d黏膜基本完全脱落。B组移植后 3、5d符合轻度排斥 ,7d中度以下排斥 4只 ,重度排斥 2只 ,10d中度排斥 2只 ,重度 4只 ,但仍可见黏膜层。C组移植后 10d 1只出现轻度排斥其余未见明显损伤。黏膜厚度、绒毛高度和隐窝深度B组明显高于A组 ,黏膜上皮细胞凋亡数目较A组低。结论　受体脾切除 ,脾肠联合移植可减轻移植小肠急性排斥反应损伤 ,诱导一定程度的小肠移植免疫耐受     

动脉粥样硬化闭塞性疾病的基因治疗

采用文献检索方法对动脉粥样硬化闭塞性疾病的基因治疗价值进行分析并加以综述。可选择的主要基因为促进血管再生和改善脂质代谢障碍的基因 ;转基因载体包括病毒性和非病毒性 ;转基因技术包括体外和体内转基因 ,后者包括开放外科、经皮注射和导管技术。血管再生可能导致的肿瘤生长和载体引起的危害是潜在的并发症。动脉粥样硬化闭塞性疾病的基因治疗有良好的前景 ,但动脉粥样硬化闭塞性疾病的特征性、发病机制还有待深入研究 ,载体和转基因技术还有待发展以提高安全性和效率。     

抑癌基因PTEN/MMAC1/TEP1编码蛋白和血管内皮生长因子在胃癌组织表达的相关性及其意义

目的 探讨胃癌组织中抑癌基因PTEN/MMAC1/TEP1(以下简称PTEN)蛋白与血管内皮生长因子(VEGF)的表达关系及其在胃癌生物学行为和血管生成的作用。方法 应用免疫组织化学SP法检测35例胃癌及8例慢性胃炎组织中PTEN和VEGF蛋白的表达水平及CD_(34)标记的微血管密度(MVD)。结果 (1)与慢性胃炎组比较,胃癌组PTEN蛋白表达呈显著下降(t=2.45,P<0.05)而VEGF与MVD表达均显著增强(t=2.21,2.30,P<0.05);进展期胃癌PTEN蛋白表达显著下调(t=1.85,P<0.05),而VEGF表达呈明显上调(t=1.46,P>0.05),但差异无显著性;(2)PTEN蛋白表达下调主要与胃癌淋巴结转移(t=2.92,P<0.05)、浸润深度(t=1.85,P<0.05)、年龄(t=2.26,P<0.05)、TNM分期(t=1.77,P<0.10)有较密切的关系;PTEN蛋白阴性表达者MVD较阳性者显著增加(t=2.60,P<0.05),且两者呈显著负相关(γ=-0.363,P<0.05)。(3)VEGF表达与胃癌浆膜浸润、淋巴结转移及TNM分期均显著正相关(t=4.38、2.28、2.27,P<0.01、0.05、0.05),VEGF阳性表达者MVD显著增加(t=3.35,P=0.02),且两者呈显著正相关(γ=0.512,P<0.05);(4)胃癌PTEN蛋白阴性表达者VEGF表达较阳性者显著上调(t=-1.99,P=0.055),两者呈显著负相关(γ=-0.403,P<0.05)。结论 胃癌PTEN基因编码蛋白失表达可能通过上调VEGF表达途径,增强     

自体静脉移植替代输精管的实验研究

以12头雄性猪为对象，进行了静脉移植替代输精管的可行性及移植静脉段超微结构变化的实验研究。结果显示：12头雄性猪行自体静脉移植替代输精管后，精子输送通畅。术后所采精液的精子数量、质量与术前相比无显著差异（P＞‘0．05），且精液品质优良。移植静脉段动态超微结构观察发现，内皮细胞的退变在术后第1周就有表现，以后退变逐渐加重，并出现细胞脱落，术后5～8周内皮细胞退变、脱落最重，11、12周以后静脉内皮细胞逐渐修复。中膜平滑肌细胞在术后1－2周有轻度退变，3～8周为细胞退变最重的时期，9周以后平滑肌细胞逐渐恢复正常，移植静脉段无坏死、挛缩和管腔闭塞，有可能长期保持精子输送通畅。