Phoenix-100全自动微生物鉴定/药敏系统检测肠球菌方法评估

目的 用Phoenix-100全自动微生物鉴定／药敏系统（简称Phoenix-100系统）检测肠球菌并评估此检测系统。方法 收集50株临床分离肠球菌，用Phoenix-100系统进行鉴定及药敏试验，通过与API鉴定系统、药敏纸片法和E-test法[筛选耐万古霉素肠球菌（VRE）]比较，对Phoenix-100系统进行评估。结果 与API鉴定系统相比，Phoenix-100系统鉴定肠球菌的一致率为90．0％。与药敏纸片法相比，Phoenix-100系统检测肠球菌对庆大霉素（筛选耐高浓度氨基糖苷类抗生素肠球菌）、氨苄西林、环丙沙星、红霉素、呋喃妥因、万古霉素和肽可霉素药敏结果的完全符合率分别为94．0％、94．0％、88．0％、94．0％、70．8％、64．0％和92．0％。与E-test法相比，Phoenix-100系统筛选VRE的完全符合率为84．O％；未出现极大错误，大错误率为12．0％，小错误率为4．0％。结论 用Phoenix-100系统检测肠球菌是一种简便、快速和比较准确可靠的方法。     

2012年上海地区细菌耐药性监测

目的了解2012年上海市细菌耐药性监测结果。方法采用纸片扩散法（K—B法）对上海地区29所医院的临床分离菌进行药敏试验,其中包括17所三级医院和12所二级医院。采用CLSI2012年版标准判断结果。结果总计76407株临床分离菌,革兰阳性菌占26．6％,革兰阴性菌占73．4％。耐甲氧西林金葡菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的平均检出率分别为52．1％和77．0％。MRSA和MRCNS在二级医院和三级医院的平均检出率分别为67．3％、82．9％和48．3％、76．1％。葡萄球菌属中未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株。685株儿童非脑膜炎分离株中青霉素敏感、中介和耐药肺炎链球菌（PSSP、PISP和PRSP）的检出率分别为72．7％、13．7％和13．6％,75株成人分离株的检出率分别为92．0％、5．3％和2．7％。发现万古霉素耐药屎肠球菌26株、粪肠球菌3株。首次在二级医院中发现万古霉素耐药粪肠球菌2株、屎肠球菌4株。根据表型推测,多数万古霉素耐药肠球菌（VRE）为VanA基因型。大肠埃希菌、克雷伯菌属（肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌）和奇异变形杆菌中产ESBLs的检出率分别为60．1％、35．8％和38．9％。上述3种细菌中的ESBLs菌株的检出率在二级医院和三级医院的检出率分别为65．6％、32．5％、51．5％和58．7％、36．6％、32．8％。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,对亚胺培南和美罗培南的总耐药率分别为6．1％和4．1％。铜绿假单胞菌、不动杆菌属对亚胺培南和美罗培南耐药率分别为28．4％、23．2％和50．6％、55．1％。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌中有少数菌株对所有测试药物耐药的泛耐药株（替加环素和多黏菌素未测）。分离自尿液标本中的肠球菌属细菌和大肠埃希菌对磷霉素的耐药率低。结论细菌耐药性仍对临床构成严重威胁,尤其是二级医院中某些细菌的耐药率高于三级医院,应引起严重关注。     

光滑假丝酵母菌氟康唑耐药机制研究

目的探讨光滑假丝酵母菌CDR1、CDR2、SNQ2和ERG11基因mRNA表达差异以及ERG11基因突变在氟康唑耐药形成中的作用。方法采用罗丹明6G试验比较氟康唑耐药组与敏感组的外排泵作用,Rea1—TimePCR检测外排相关基因CDR1、CDR2、SNQ2和ERG11表达情况。同时,对ERG11基因进行PCR扩增和测序,比较耐药组和敏感组的突变位点。结果耐药组光滑假丝酵母菌外排泵功能明显强于敏感组,差异有统计学意义（P〈0．01）。耐药组的CDR1和CDR2mRNA表达水平显著高于敏感组（P〈0．01,P〈0．05）;但两组间SNQ2和ERG11mRNA表达水平比较差异无统计学意义（P〉0．05）。检测到ERG11基因4个突变位点,均为同义突变,其中3个突变位点在耐药组和敏感组中均出现,1个突变位点只在敏感组中出现。结论外排泵功能在光滑假丝酵母菌氟康唑耐药过程中起重要作用。ERG11基因序列存在多态性,但未发现与氟康唑耐药相关的突变位点。     

妇产科住院病例传染病血清标志物检测结果趋势变化分析

摘要:目的 分析妇产科因非传染病就诊住院病人传染病血清标志物的检出结果,研究该人群传染病感染情况,为特大型城市传染病防控提供数据。方法 对2010 - 2013年172 737例某院住院病人的传染病血清学检测结果进行统计,并与上海市传染病疫情进行比较,分析传染病感染率变化趋势。结果 研究对象中HIV感染率、梅毒感染率、乙型肝炎感染率、丙型肝炎抗体阳性率分别为5.79/10万,441.71/10万,4620/10万%,877.63/10万,其中丙型肝炎抗体阳性率远高于上海市丙型肝炎报告发病率。4年间HIV感染率、梅毒感染率变化均上下波动,无年度增减趋势（χ2 = 0.15,Ｐ = 0.985;χ2 = 2.45,Ｐ = 0.484）、HBsAg携带检出率最高,但呈逐年下降趋势（χ2 = 125.25,Ｐ ＜0.001）。HCV抗体阳性检出率亦有下降趋势（χ2=9.08,Ｐ＜0.05）。结论 研究表明人群乙型肝炎新发感染逐渐减少,丙型肝炎实际感染率可能高于报告患病率,人群HIV和梅毒感染水平持续较高。应重视育龄女性及其他住院病人的传染病筛查,以实现传染病的综合防控并减少传染性疾病对诊疗活动的影响。     

利用IRS-PCR技术分析金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌基因多态性

目的：利用IRS-PCR技术分析院内感染金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌基因组多态性,以期进行更加行之有效的院内感染监控。方法：收集重症监护病房中引起院内感染的金黄色葡萄球菌23株和铜绿假单胞菌10株;利用IRS-PCR方法进行基因组多态性分析。结果：金黄色葡萄球菌表现明显同源性,与质控菌株显著不同;同病房不同来源铜绿假单胞菌则呈现不同型别多态性特征。结论：重症监护病房短期内存在金黄色葡萄球菌暴发流行;利用IRS-PCR技术进行细菌多态性分析快速、准确、可靠,而且可用于不同菌种,是用于流行病学监测的有效方法。     

女性阴道分泌物产ESBLs肠杆菌科细菌监测及耐药分析

目的了解女性阴道分泌物中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肠杆菌科细菌分布现状及耐药情况,为临床治疗提供依据。方法收集复旦大学附属妇产科医院2014年1月至2017年12月女性阴道分泌物分离的肠杆菌科细菌939株,应用VITECK 2Compact全自动细菌鉴定分析仪进行菌株鉴定及药敏试验,分析产ESBLs肠杆菌科细菌的检出率和耐药性。结果 939株肠杆菌科细菌检出产ESBLs菌株257株,检出率为27%;其中共包含大肠埃希菌220株,肺炎克雷伯菌34株,臭鼻克雷伯菌2株,产酸克雷伯菌1株。产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对氨苄西林和头孢唑啉全部耐药,对头孢他啶、呋喃妥因、复方SMZ、阿米卡星、环丙沙星、庆大霉素、妥布霉素、氨苄西林/舒巴坦、头孢曲松、厄他培南、哌拉西林/他唑巴坦、氨曲南、头孢吡肟、左氧氟沙星的耐药率分别为36%和44%,2%和41%,67%和68%,2%和15%,58%和38%,51%和65%,14%和26%,65%和76%,99%和97%,0%和29%,0%和3%,50%和65%,26%和18%,57%和32%,但对亚胺培南和头孢替坦全部敏感。结论女性阴道分泌物产ESBLs肠杆菌科细菌携带率较高,亚胺培南、头孢替坦、哌拉西林/他唑巴坦有较高的抗菌活性,可作为初始治疗的经验用药。     

糖化血红蛋白及糖化白蛋白在高龄孕妇妊娠期糖尿病中的应用价值

目的探讨糖化血红蛋白(HbA_(1c))和糖化白蛋白(GA)在高龄孕妇妊娠期糖尿病(GDM)筛查中的价值。方法选取妊娠时年龄≥35周岁的孕妇1 201名,其中血糖正常者(对照组)626名,GDM患者575例。分别采用己糖激酶法检测血糖、高效液相色谱法检测HbA_(1c),酶法检测GA。将GDM患者按葡萄糖耐量试验(OGTT)3个值(空腹血糖、1 h血糖、2 h血糖)的异常个数分别分组,其中1个值异常者330例、2个值异常者170例、3个值异常者75例,分别比较各组的HbA_(1c)和GA水平。各项目之间的相关性采用Pearson相关分析。采用受试者工作特征(ROC)曲线及Logistic回归分析评价HbA_(1c)、GA诊断GDM的价值。结果与对照组比较,GDM组HbA_(1c)和GA水平均明显升高(P0.01)。在GDM患者中,OGTT 3个值异常者HbA_(1c)水平明显高于2个值异常者和1个值异常者(P0.01),OGTT 3个值异常者和2个值异常者的GA水平明显高于1个值异常者(P0.01)。相关性分析显示,HbA_(1c)、GA与空腹血糖呈明显正相关(r值分别为0.309、0.141,P0.01),HbA_(1c)与GA呈正相关(r=0.206,P0.01)。ROC曲线分析显示,HbA_(1c)和GA联合检测诊断GDM的曲线下面积[95%可信区间(CI)]为0.851(0.821~0.881),明显优于单项检测。结论 HbA_(1c)和GA联合检测对辅助诊断高龄孕妇GDM有重要价值。     

上海地区四家医院鲍曼不动杆菌产β-内酰胺酶研究

目的了解上海地区4家医院2010年鲍曼不动杆菌对13种抗菌药物耐药性及β-内酰胺酶基因携带情况,研究该菌的流行型别,为临床合理用药及控制医院感染提供依据。方法收集上海4家医院临床分离的鲍曼不动杆菌共204株。采用琼脂稀释法检测上述细菌对13种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),三维试验检测AmpC酶,乙二胺四乙酸(EDTA)纸片协同试验检测金属酶表型。聚合酶链反应(PCR)检测OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58、ampC、IMP-1、IMP-4、VIM-2编码基因。结果 4家医院鲍曼不动杆菌对环丙沙星、哌拉西林-他唑巴坦、头孢西丁、复方磺胺甲口恶唑、头孢哌酮耐药率均较高,达到90%以上;对左氧氟沙星、多黏菌素B耐药率均相对较低。研究发现浦东地区医院对美罗培南、左氧氟沙星、多黏菌素B的耐药率均高于浦西地区医院。AmpC酶表型检测以公利医院表型阳性率最高(84.6%),瑞金医院表型阳性率最低(42.3%);金属酶表型检测,公利医院和仁济医院西院未检测到金属酶表型阳性菌株,另外3家医院中以东方医院检出率最高(27.3%),瑞金医院检出率最低(7.7%)。基因检测,浦东地区医院的OXA-23和ampC阳性率要比浦西地区医院的阳性率高。204株菌株OXA-51均为阳性,均未检测到OXA-24、OXA-58、IMP-1基因。在仁济医院东院和东方医院标本中检测到IMP-4和VIM-2基因,其他医院标本未检测到IMP-4和VIM-2基因。结论本地区分离到的鲍曼不动杆菌均检测出OXA-51,上海地区不同医院之间鲍曼不动杆菌产β-内酰胺酶情况略有不同。     

耐氟喹诺酮淋病奈瑟菌基因突变研究

目的:研究淋病奈瑟菌的DNA旋转酶A亚单位(gyrA)和拓扑异构酶ⅣC亚单位(parC)基因突变与淋病奈瑟菌耐氟喹诺酮类药物的关系。方法:收集临床分离淋病奈瑟菌30株,用E试验法检测其对6种抗菌药的最低抑菌浓度(MIC),并用Nitrocefin纸片检测β内酰胺酶,PCR扩增22株淋病奈瑟菌喹诺酮耐药决定区(QRDR)相关gyrA和parC基因并测序分析。结果:大观霉素、头孢他啶、头孢曲松、四环素、青霉素和环丙沙星的耐药率分别为0、3.3%、3.3%、33.3%、66.7%和100%。β内酰胺酶检出率为17株(56.7%)。22株高水平耐氟喹诺酮菌(MIC≥4mg/L)均存在gyrA基因双位点突变和parC单(或双)位点突变。结论:淋病奈瑟菌对青霉素、四环素、环丙沙星分别有较高的耐药率。gyrA和parC基因突变在淋病奈瑟菌对氟喹诺酮类药物耐药中起重要作用。