混苯作业工人外周血细胞DNA损伤的检测

目的：研究混苯作业工人外周血DNA损伤。方法：应用新型彗星图象分析系统对单细胞凝胶电泳（SCGE）检测的制鞋厂112名接触混苯作业工人进行DNA损伤分析。结果：发现接触混苯作业工人外周血细胞尾长、矩迁移比、尾矩、尾惯量、惯量迁移比尾长／头长比、尾DNA％，与对照组比较差异均有显著性，并且混苯浓度越高的工种DNA损伤程度越大。结论：苯、甲苯与二甲苯之间存在一定的相互作用，作者开发的彗星图象分析系统能较好地应用于单细胞凝胶电泳。     

DNA错配修复酶hMSH2缺陷细胞株生物学特性

目的　通过对hMSH2酶缺陷的基因工程细胞的生物学特性研究 ,探讨错配修复酶hMSH2缺陷与肿瘤易感性的关系。方法　分别用普通光镜法、电镜法、细胞计数法、流式细胞术观察hMSH2酶缺陷细胞生长形态、超微结构、生长曲线及细胞周期 ,并通过软琼脂培养法鉴定hMSH2酶缺陷细胞恶性程度。结果　hMSH2酶缺陷细胞体积增大 ,有异型性改变 ;细胞表面突起增多 ,核浆比例增大 ;细胞生长速度加快 ;细胞内DNA含量增加 ,出现G1期阻滞 ;不能在软琼脂中生长。结论　hMSH2酶缺陷细胞恶性程度增加 ,肿瘤易感性增高 ,但不属于恶性细胞 ,可作为环境污染物致突变性检测的生物材料     

中国汉族、布依族和壮族群体中聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1基因多态性

【目的】探讨人类聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)5个外显子核苷酸多态性。【方法】采用聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)和银染技术检测3个民族(汉族、布依族和壮族)634名正常人PARP-1基因多态性。【结果】在3个民族634名正常人血标本的5个外显子扩增产物SSCP电泳条带中,219名汉族人PARP-1基因5个外显子均未检出多态性条带;203名布依族和212名壮族人PARP-1基因的5个外显子扩增产物中分别有2例的外显子20检出1条多态性条带,其余4个外显子扩增产物未见多态性条带。【结论】PARP-1基因第20外显子上可能存在多态性。     

三氯乙烯对鼠伤寒沙门氏菌的致突变实验

目的 为了观察三氯乙烯的致突变作用。方法 本文采用剂量为50 000、10 000、2 000、400、80μg/皿的三氯乙烯对鼠伤寒沙门氏菌株TA97、TA98、TA100、TA102进行染毒,并于37℃培养48 h后观察其菌落数。结果 菌株TA97、TA98、TA102不论是否加入S_9,其菌落数没有比空白对照组增加1倍以上。而TA100菌落数比空白对照组增加一倍以上,三氯乙烯在S_9存在的情况下导致鼠伤寒沙门氏菌株TA100增加的数量比没有S_9存在的情况下多。结论 三氯乙烯是能导致菌株TA100发生突变的致突变剂(碱基对置换)。三氯乙烯的致突变作用可能部分是由于三氯乙烯经过代谢成中间活性产物而起作用的。     

铬化合物对人体外淋巴细胞DNA损伤研究

目的　研究铬化合物对人体外淋巴细胞 DNA损伤。　方法　应用新型彗星图象分析系统以及单细胞凝胶电泳 (SCGE) ,检测六价铬对外周血处理 1h后 DNA的损伤程度。　结果　作者开发的彗星图象分析系统能较好地应用于单细胞凝胶电泳 ,剂量大于 6 0μmol/L的重铬酸钾均可引起 DNA损伤 ,并且存在明显的剂量反应关系。　结论　六价铬可以诱发体外淋巴细胞 DNA损伤     

hPARP-1蛋白缺陷细胞株建立及生长特性

目的建立hPARP-1蛋白缺陷细胞株，观察该缺陷所引起的生物学效应。方法用构建的hPARP-1基因反义RNA绿色荧光蛋白真核表达载体（pEGFP-C1-P）转染人胚肺成纤维细胞（HLF），用蛋白免疫印迹法鉴定转染细胞中hPARP-1基因的表达水平。同时观察转染细胞生长形态，绘制生长曲线，用流式细胞术观察细胞周期，软琼脂培养法鉴定转染细胞恶性程度。结果pEGFP-C1-P载体在转染细胞内可较稳定表达，hPARP-1蛋白缺陷细胞株hPARP-1基因的蛋白表达水平比HLF下降了47％，比绿色荧光蛋白载体（HLFC）低45％，HLFC比HLF仅少3％。转染后hPARP-1蛋白缺陷细胞生长形态、生长速度无明显变化，软琼脂培养未见细胞集落。hPARP-1缺陷细胞生长形态无明显变化，细胞倍增时间为0．89d．与HLF细胞0．93d接近，软琼脂培养未见细胞集落。结论成功建立和鉴定了hPARP-1蛋白缺陷细胞株，在正常生长环境中，该缺陷不足以单独引起可观察的生长特性改变。     

三硝基甲苯对大鼠肝细胞质膜Ca(2+)-ATP酶和蛋白质巯基含量的影响

用两种实验模型观察三硝基甲苯(TNT)对大鼠肝细胞质膜Ca~(2+)-ATP酶和蛋白巯基含量的影响。结果表明:当TNT直接与Percoll密度梯度离心分离的质膜及NADPH在37℃温育30或60min后,上述两项指标均未见明显改变;但若将TNT与胶原灌注分离的肝细胞在37℃温育同样的时间,然后用Affi-Gel 731聚阳离子凝胶颗粒吸附法分离质膜,则质膜Ca~(2+)-ATP酶活性和蛋白巯基含量均见明显下降,且呈剂量时间效应关系,两项观察指标之间密切相关。若在肝细胞的温育介质中加入二硫苏糖醇或GSH,则前者对Ca~(2+)-ATP酶活性具有明显的保护作用,而GSH作用不明显。     

四氯化碳亚急性染毒大鼠肝脏脂质过氧化的分析

采用ＳＰＦ屏障系统繁育ＳＣＩＤ小鼠３７７胎共１６３１只，两种不同的繁育方法比较结果证明１雄×２雌交配法优于１雄×１雌交配法。ＳＣＩＤ小鼠离乳后的体重增长，雄性大于雌性，３～８周龄增重较快，８周龄后体重增长趋缓。经寄生虫和微生物检测，符合ＳＰＦ小鼠标准。将人体肿瘤Ｈ１２８小细胞肺癌、ＳＧＣ７９０１胃腺癌、Ｕ２５１脑瘤、ＢＥＬ７４０２和ＳＭＭＣ７７２１肝癌移植于ＳＣＩＤ小鼠和ＢＡＬＢ／ｃ裸小鼠皮下，发现ＳＣＩＤ小鼠的成瘤率和瘤体积明显高于ＢＡＬＢ／ｃ裸小鼠，ＳＭＭＣ７７２１肝癌在ＳＣＩＤ小鼠身上出现局部浸润、肝转移和淋巴结转移，发生率分别为４６．４３％、３２．１４％和３９．２９％。ＳＧＣ７９０１胃腺癌在ＳＣＩＤ小鼠胃原位移植，不仅原位１００％生长，还伴有向肝、脾等脏器的高转移。     

铝致大鼠中枢神经系统病理形态学改变的研究

目的：观察不同剂量、不同染毒时间铝对脑神经细胞数和海马颗粒空泡变性（GVD）的影响及神经细胞的结构变化，为探讨铝的神经毒作用机制提供依据。方法：144只大鼠分为腹腔注射AlCl3剂量组（分别为5．0，15．0，25．0mg/kg/d)和生理盐水对照组，于染铝4，8，12周处死动物，取各脑区标本进行光镜，电镜观察。结果：与对照组比较，15．0mg/kg4周及5．0mg/kg12周组，大脑顶叶锥体层锥体细胞，小脑浦肯野细胞和海马锥体细胞数显减少（P＜0．05），5．0mg/kg8周组，15．0mg/kg及25．0mg/kg4周组的GVD细胞数即有明显增加（P＜0．05），且各剂量组细胞GVD阳性率与铝剂量有相关性，光镜下5．0mg/kg8周组和15．0mg/kg4周组即出现尼氏小体溶解消失，核固缩等现象；电镜下25．0mg/kg12周组，出现核膜变形，核仁变小，核周空泡化，线粒体肿胀等；15．0mg/kg12周组海马神经细胞出现核涨大空化，结论：本实验结果进一步证实了铝的神经毒性，其中海马GVD可能起重要作用，并提示该毒性与铝导致神经细胞结构改变及细胞数减少有关。