环境毒物对聚腺苷二磷酸核糖聚合酶表达影响

环境毒物是存在于人类生活和生产环境中,在一定条件下可以侵入人体,干扰或破坏人体正常生理功能,引起短暂性或者永久性病理状态的物质。环境毒物种类繁多,分布广泛。其最大的危害是与机体遗传物质相互作用而产生的三致作用,     

基于慢病毒介导RNA干扰技术的人PARP-1基因沉默细胞株构建

目的利用慢病毒介导的RNA干扰技术构建人淋巴母细胞TK6细胞的PARP-1基因沉默细胞株,为后续PARP-1基因功能和表观遗传学调控机制的研究提供有效的工具细胞。方法利用瞬时转染方法筛选最佳干扰效果的shRNA片段,与慢病毒载体pLVX-shRNA1连接,形成重组质粒,DNA测序鉴定后进行病毒包装,转导TK6细胞,利用嘌呤霉素筛选得到稳定表达PARP-1siRNA的PARP-1沉默细胞株,并用定量PCR和Western blotting鉴定所构建的细胞株。结果转染shRNA1、shRNA2、shRNA3、shRNA4细胞的PARP-1相对表达量分别为0.289、0.538、0.375和0.474,故选择shRNA1作为干扰PARP-1基因最佳片段。用0.5μg/ml的嘌呤霉素成功筛选出PARP-1沉默细胞株和空载体对照细胞株,并从mRNA、蛋白质、细胞表型来检测PARP-1基因的干扰效率,抑制效率超过80%。结论成功构建PARP-1的siRNA慢病毒干扰载体,并筛选出PARP-1基因沉默的TK6细胞株,携带shRNA的慢病毒稳定、高效干扰PARP-1基因表达。     

二氯乙腈对HepG2细胞凋亡的影响

目的探讨饮水消毒副产物二氯乙腈(dichloroacetonitrile,DCAN)对Hep G2细胞凋亡的影响及相关调控机制。方法二甲基亚砜(DMSO)溶解DCAN,以DMSO处理人肝癌细胞(Hep G2细胞)为对照组,分别以50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L DCAN染毒Hep G2细胞为处理组,培养24 h后通过Annexin V/PI流式细胞分析法检测细胞凋亡情况,用荧光测定法观察Caspase 3酶活性,蛋白质印迹法(Western blotting)技术检测Hep G2细胞pro-caspase 3和P53蛋白的表达情况。结果与对照组相比,400μmol/L DCAN处理组可诱导Hep G2细胞凋亡(P<0.05),各处理组细胞内Caspase 3酶活性随着染毒剂量的增加而显著升高(P<0.05)。DCAN作用于Hep G2细胞后pro-Caspase 3和P53蛋白含量呈下降趋势,当染毒浓度达到200μmol/L以上时,pro-Caspase 3和P53蛋白表达明显低于对照组(P<0.05)。结论高浓度的DCAN可通过激活Caspase 3诱导Hep G2细胞凋亡。     

氢醌对DNA甲基转移酶表达的影响

目的探索氢醌(hydroquinone,HQ)致DNA整体低甲基化的分子机制。方法以磷酸盐缓冲液(PBS)溶解HQ,以PBS处理组为对照组,分别以2.5、5.0、10.0和20.0μmo/lL HQ染毒TK6细胞为处理组。应用实时荧光定量-聚合酶链反应检测DNA甲基转移酶DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的表达水平。结果与对照组相比,DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的mRNA表达量在各HQ处理组细胞中均下降,其中以20.0μmo/lL组细胞的下降最为明显,分别下降46%(P0.05)、83%(P0.05)和48%(P0.05),且DNMT1和DNMT3a的表达量随着HQ剂量的增加而下降。结论 HQ致DNA整体低甲基化下调机制可能与DNMT1、DNMT3a和DNMT3b表达异常有关。     

2006—2011年深圳市宝安区企业使用苯系物调查

目的了解深圳市宝安区苯系物在企业中的使用情况及相关人员的健康状况,为苯系物急慢性职业中毒预防控制提供科学依据。方法收集2006—2011年度深圳市宝安区职业卫生服务现场职业病危害因素监测数据及健康检查资料,对相关企业苯系物的危害情况及危害特点进行统计分析。对接触苯系物作业工人的健康资料进行统计分析。结果有61.5%的企业使用到了苯系物,所占构成比最高的几类企业分别是电子类(29.3%)、五金类(23.1%)、傢俬类(21.3%)及印刷类(20.1%),分析结果表明喷油位、印刷位、调漆位、粘胶位、清洗位均是接触苯系物最多的岗位。健康检查人员共146 624人,其中查出职业禁忌证人员1 045人,确诊的职业病人有35例。结论电子、五金等多类企业存在使用苯系物的情况,相关工作岗位应加强苯系物的监督监测、作业人员的中毒预防及健康监护工作。     

CpG岛甲基化结合蛋白在氢醌致骨髓增殖性白血病病毒原癌基因转录激活中的作用

目的深入揭示氢醌(HQ)致MPL转录激活的表观遗传学机制。方法以磷酸盐缓冲液(PBS)溶解HQ,以正常TK6细胞、PBS处理细胞为对照组,分别以2.5、5.0、10.0和20.0μmol/L HQ染毒TK6细胞为染毒组。应用实时荧光定量-聚合酶链反应检测甲基化CpG结合蛋白1~5(MBD1~5)的表达。结果与对照细胞相比,MBD1~4的mRNA表达量在所有的HQ处理细胞中全部下降,20.0μmol/L HQ对MBD2和MBD4表达的抑制效果最为明显,抑制率分别为50%和32%(P<0.05);而10.0μmol/L HQ对MBD1和MBD3表达的抑制效果最明显,抑制率分别为36%和33%(P<0.05);MBD5表达无统计学意义(P>0.05)。在MPL的CpG岛内有3个MBD1序列特异性结合位点。结论 HQ致MPL的转录激活可能与MBD1表达异常有关。     

血清蛋白质组技术及其在预防医学中应用

随着生命科学进入后基因组研究时期,蛋白质组研究应运而生.而血清蛋白质组就是其中一个分支,它是在建立正常蛋白质表达图谱的基础上,寻找目标人群血清差异蛋白质点,研究与疾病相关蛋白质的结构和功能.这些研究将有利于阐明疾病发病机制,并可能发现与疾病特定状态相关的标志性蛋白质,为研究重大疾病病理生理学机制、早期诊断的特异性标志物、病程及疗效监测、药物作用靶点等开辟了新途径,在疾病诊断和防治方面有着广泛的应用[1-2].     

染铝大鼠尿中单胺类神经递质代谢物含量的变化

目的观察三氯化铝 (AlCl3)对染毒大鼠尿中单胺类神经递质含量变化的影响 ,寻找早期生物学监测指标 ,为探讨铝的神经毒性作用机制提供依据。方法144只Wistar大鼠随机分为注射剂量分别为5.0、15.0、25.0mg/Kg的3个剂量组和生理盐水对照组。用原子吸收分光光度计测定尿铝含量 ,用高效液相色谱仪测定尿中高香草酸 (HVA)及香草扁桃酸 (VMA)含量。结果各时间剂量组大鼠尿铝均显著高于对照组 (P<0.01);尿中的HVA和VMA水平均较高 ,各时间剂量组VMA水平显著高于对照组 (P<0.01) ;25mg/kg组HVA也显著高于对照组 (P<0.05)。结论铝可影响单胺类神经递质代谢 ,尿铝和VMA可用作铝引起的中枢神经系统功能异常的早期生物学监测指标     

DNA氧化损伤及其修复基因OGG1和MTH1的研究进展

过量的自由基特别是活性氧自由基(ROS),可以攻击包括DNA、蛋白质等所有生物分子,产生多种不同氧化产物,对机体造成各种不良后果.DNA对活性氧特别敏感,ROS能引起DNA的多种类型损伤,可形成种类繁多的具有致DNA突变作用的碱基氧化产物,其中鸟嘌呤8位碳原子的氧化最常见,其氧化产物8-羟基鸟嘌呤被视为DNA氧化损伤的生物标志物.机体具有多种途径修复DNA氧化损伤,对于这种DNA损伤修复的主要代表酶有MutT同源酶即8-羟基鸟嘌呤核苷酸(MTH1)和8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(OGG1),MTH1能够分解核苷酸池中的8-羟基鸟嘌呤,可以减少8-oxodGTP结合到DNA上,而OGG1则是能切除DNA中被氧化的碱基.本文将阐述氧化损伤的种类、危害及其修复的途径,着重于氧化损伤修复中的主要修复基因OGG1和MTH1的结构功能、表达与疾病关系的研究进行综述.     

预防医学专业学生现场实践技能培养中存在问题及对策分析

当前高等医学院对预防医学专业学生实践技能培养存在诸多不足之处：混淆实践技能与应急技能,教学内容与形式及师资力量不能满足实践技能培养需要。应提升专业教师自身实践技能水平、利用各种科研活动提供学生接触实践的机会、及时跟踪公共卫生领域发展动态、充分利用毕业实习机会、重视社区卫生服务相关技能培养。