真核表达载体pcDNA3-CTLA4Ig转染小鼠对移植胰岛功能的影响

目的:探讨真核表达载体pcDNA3-CTLA4Ig转染受体小鼠肌细胞后对胰岛移植后排斥反应的影响.方法:受体C57BL/6小鼠随机分为对照组、空白转染组和实验组(转染pcDNA3-CTLA4Ig).Western blot检测受体小鼠血清CTLA4-Ig表达,观察移植物存活时间,术后7 d取受体肾脏做HE染色及胰岛素免疫组化染色,采用微量全血~3H-胸腺嘧啶掺入法检测单个核细胞在刀豆蛋白A刺激下的增殖程度,流式细胞仪检测外周血T细胞亚群表达情况.结果:受体小鼠转染5 d后,Western blot检测到血清内有CTLA4Ig表达,转染效率为27.50%;实验组小鼠血糖维持正常时间明显延长(P<0.05):术后7 d,转染组单个核细胞在刀豆蛋白刺激下的增殖程度明显降低(P<0.05),CD4~ 、CD8~ T淋巴细胞表达与对照组和空白转染组相比有显著差异差异(CD4~ :14.38%±0.84% vs 20.56%±0.68%,21.04%±1.14%,P<0.05:CD8~ :14.77%±0.92% vs 24.63%±1.30%,23.84%±1.21%,P<0.05),小鼠肾被膜下胰岛素免疫组化染色强度明显增高.结论:利用脂质体法可将pcDNA3-CTLA4Ig转染到活体小鼠肌细胞内并在小鼠体内表达CTLA4Ig,从而阻断B7/CD28共刺激信号途径,抑制胰岛移植术后排斥反应.     

加贝酯对犬胰腺移植后Oddi括约肌及外分泌功能的影响

目的 研究加贝酯对膀胱引流式犬胰腺移植后移植物Oddi括约肌(SO)和外分泌功能的影响.方法 正常犬和膀胱引流式胰腺移植后犬应用加贝酯前后进行SO测压,检测移植后犬应用加贝酯前后尿中胰蛋白原激活肽(TAP)和淀粉酶水平.结果 正常犬SO有规律收缩,基础压为(19.4 ± 3.2)mmHg,收缩频率为(9.9 ± 1.6)次/min,收缩幅度为(45.1 ± 6.5)mmHg,动力指数为355.4 ± 31.3.应用加贝酯后SO收缩频率和动力指数分别下降为(4.8 ± 0.9)次/min和206.5 ± 21.4,与用药前相比,差异均有统计学意义(P＜0.01).基础压和收缩幅度无明显变化(P＞0.05).胰腺移植后,犬移植物SO基础压和收缩频率分别升高为(27.2 ± 5.6)mmHg和(13.8 ± 2.5)次/min,收缩幅度缩小为(8.6 ± 2.5)mmHg,动力指数无明显变化.移植犬应用加贝酯后,SO基础压、收缩频率、收缩幅度和动力指数分别降低为(18.6 ± 2.9)mmHg、(8.6 ± 2.5)次/min、(5.4 ± 0.9)mmHg和136.9 ± 3.5,与用药前相比,差异均有统计学意义(P＜0.01).用加贝酯后尿淀粉酶和TAP水平分别为(6 000 ± 290)IU/L和(16.7 ± 3.8)nom/L,与用药前相比,有显著性差异(P＜0.01).结论 加贝酯可抑制犬SO运动,尤其胰腺移植后,抑制作用更加显著.加贝酯还可以降低膀胱引流式犬胰腺移植后尿中的胰蛋白酶原激活肽和尿淀粉酶水平,从而有助于防治移植物胰腺炎.     

受体血预先经门静脉输入供体延长肝移植大鼠生存时间

目的:探讨受体全血预先经门静脉输入供体对大鼠肝移植排斥反应的作用．方法:采用异系大鼠肝移植模型,供体为ACI大鼠．受体为LEW大鼠．将实验组受体大鼠全血1 mL经门静脉输入供体肝内,7 d后将处理后的供体肝脏移植于受体．经门静脉将生理盐水1 mL输入对照组供体肝内,7 d后将此供体肝脏移植于受体．观察大鼠生存时间,分期分批处死大鼠,从移植肝及受体脾分离T淋巴细胞,测定移植肝及受体脾内中供体来源活化T淋巴细胞的比例,检测细胞因子mRNA的表达．结果:肝移植大鼠生存时间:实验组31．7±7．6 d,对照组11．1±2．1 d．两组差异显著(P< 0．05)．移植后7 d从移植肝分离的浸润T淋巴细胞分析结果:实验组OX76 CD4 细胞25．6%．OX76 CD8 细胞26．6％;对照组OX76 CD4 细胞6．2％,OX76 CD8 细胞7．4％．实验组移植肝内有大量供体来源的活化T淋巴细胞．实验组肝内OX76 CD8 细胞可见IL-10 mRNA及IFN-γmRNA的表达．结论:受体血预先经门静脉输入供体,可以延长异系大鼠肝移植生存时间．有限的移植物抗宿主反应,可能是这种肝移植排斥反应抑制的机制．     

乌司他丁对重症中暑患者血管内皮细胞损伤的影响

目的：探讨乌司他丁对重症中暑患者血管内皮细胞损伤的保护作用。方法回顾性分析40例重症中暑患者的临床资料,其中20例患者采用常规治疗,为常规组,20例患者在常规治疗的基础上加用乌司他丁治疗,为乌司他丁组,比较两组治疗后外周CEC数量、外周血管vWF和TM浓度。另选择20例健康体检者作为对照组。结果治疗前重症中暑患者外周血CEC计数、vWF和TM浓度显著高于对照组（P＜0.01）,治疗后常规治疗组和乌司他丁组较治疗前均显著下降（P＜0.05或P＜0.01）,但乌司他丁组下降幅度显著大于常规治疗组（P＜0.01）。结论重症中暑患者在常规治疗的基础上加重乌司他丁治疗对患者的血管内皮细胞具有一定的保护作用。     

脾切除在防治小肝综合征中的作用

 目的探讨小肝综合征发生的内在机制及脾切除对小肝综合征发生的影响。方法建立大鼠小体积肝脏模型。脾切除组切除80%肝组织同时行脾切除,对照组仅行80%肝组织切除,假手术组仅肝脏游离,不做肝切除。检测术后门静脉压力、肝组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)和增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA和蛋白表达及髓过氧化物酶(MPO)活性、肝功能变化及小肝综合征发生率。结果肝切除后,对照组和假手术组比较门静脉压力明显增高,TNF-αmRNA表达和蛋白表达明显增强,MPO活性明显增高(P<0.05);脾切除组和对照组比较门静脉压力降低,TNF-αmRNA和蛋白表达量、MPO活性均降低(P<0.05),而PCNAmRNA和蛋白表达明显增强(P<0.05)。脾切除组肝功能损害及小肝综合征的发生率和对照组比较显著降低(P<0.05)。结论脾切除能够降低小体积肝脏的门静脉灌流和压力,减少促炎性细胞因子的表达和释放,减轻细胞损害,促进肝再生,降低小肝综合征的发生。     

Clinical islet transplantation for type 2 diabetes mellitus:3 cases report

<正>Objective To evaluate the effect of islet transplantation for patients with type 2 diabetes mellitus ( DM ) .Methods Since December 2007,4 cases of islet transplantations were performed on 3 patients with type 2 DM and end - stage renal disease ( ESRD) . Two patients received simultaneous islet - kidney transplant from single     

靳三针配合十二井穴治疗脑卒中后肩手综合征疗效观察

目的观察靳三针配合十二井穴治疗脑卒中后肩手综合征的临床疗效。方法将60例符合纳入标准的脑卒中后肩手综合征患者随机分为治疗组和对照组,每组30例。治疗组采用靳三针配合十二井穴治疗,对照组采用常规针刺治疗。治疗2星期后,观察两组治疗前后临床神经功能缺损程度(CNDS)评分、Fugl-Meyer(FMA)评分、视觉模拟量表(VAS)评分及功能综合评定量表(FCA)评分,比较两组临床疗效。结果两组治疗后CNDS、FMA、VAS评分及FCA与同组治疗前比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。治疗组总有效率和愈显率分别为96.7%和55.7%,对照组分别为83.3%和26.7%,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论靳三针配合十二井穴是一种治疗中风后肩手综合征的有效方法。     

RGD肽保护大鼠胰岛活性和功能的实验研究

目的探讨RGD肽对分离纯化后的胰岛活性和功能的影响。方法将实验大鼠分成两组：1640组和RGD组。采用Ficoll不连续密度梯度离心纯化胰岛,浓度分别为：27％、25％、23％、20．5％和11％。1周后,用丫啶橙／溴乙啶（AO／EB）荧光染色观察RGD肽对胰岛活性的影响。胰岛素分泌功能检测：采用放免法检测培养液中胰岛素含量,计算胰岛素释放指数（SI）。流式细胞仪检测：caspase-9和磷酸化Akt阳性细胞比例,观察RGD肽对caspase-9及Akt的影响。结果采用改良梯度离心法,平均每只大鼠可获约600IEQ～700IEQ胰岛,YO／EB荧光染色,结果显示刚分离后胰岛活率〉95％。1640组培养1周后胰岛分泌指数为1．64±0．28,RGD组胰岛分泌指数为2．28±0．16,较1640组明显增加,差异具有统计学意义（P〈0．05）。流式细胞仪检测结果表明胰岛1640组培养1周后,激活的caspase-9为（22．66±3．56）％,RGD组激活的caspase-9为（10．54±1．96）％,较1640组明显降低13％,且其差异具有统计学意义（P〈0．05）;检测RGD对Akt磷酸化的影响,胰岛1640组培养1周后,Akt磷酸化占（31．47±4．08）％,RGD组磷酸化Akt占（61．054±6．03）％,较1640组明显升高,其差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论RGD可通过Akt／PKB的磷酸化抑制细胞凋亡。