基于网络药理学的桂枝茯苓胶囊治疗痛经、子宫肌瘤和盆腔炎的分子作用机制研究

目的探索桂枝茯苓胶囊治疗痛经、子宫肌瘤和盆腔炎的分子作用机制和潜在活性成分群。方法通过文献挖掘、多个数据库联用检索与痛经、盆腔炎以及子宫肌瘤疾病相关的130个靶蛋白基础上,利用分子计算结合网络特征分析获得桂枝茯苓胶囊的主要活性成分和潜在的靶点蛋白,并将其投射到KEGG数据库阐释桂枝茯苓胶囊的分子作用机制。结果数据分析结果表明,与蛋白相互作用较强的115个活性分子主要分布在桂枝和茯苓中,进一步的网络特征分析发现高网络度和介数的分子主要为五环三萜类和甾醇类化合物;与化合物作用的绝大部分靶蛋白(78.57%)分布在与痛经、盆腔炎及子宫肌瘤密切相关的15条生物通路中,而这些通路涉及到子宫平滑肌的增殖和收缩,子宫内的血管形成和血液循环,雌激素和黄体酮等多种激素的分泌,以及前列腺素等炎症因子合成或释放和相关钙通道的调控等。结论桂枝茯苓胶囊主要是由其所含的五环三萜类和甾醇类化合物与多个靶点蛋白作用,调控多条生物通路(如arachidonic acid metabolism,calcium signaling pathway,Gn RH signaling pathway,complement and coagulation cascades,progesterone-mediated oocyte maturation)来抑制子宫平滑肌收缩和增殖、改善微循环、降低激素分泌和炎症反应(如PGE_2,PGF_(2α),leukotriene B4),从而起到缓解痛经和盆腔炎引起的疼痛、改善子宫肌瘤患者的生活质量的作用。     

基于网络药理学方法探讨通塞脉片治疗动脉粥样硬化的作用机制

该研究利用网络药理学方法探索通塞脉片治疗动脉粥样硬化的药效物质和分子作用机制。经分子对接、分子-靶蛋白网络分析发现,通塞脉片中有97个分子可与动脉粥样硬化相关靶蛋白产生较好的相互作用(对接得分大于等于7),其中37个分子可作用于2个以上靶点,且具有较高的介数,推测这37个分子可能是通塞脉片治疗动脉粥样硬化的主要活性成分群。同时,所预测活性成分中含有较多的黄酮类和皂苷类化合物,提示该2类成分应在药效物质基础和质量标准研究中重点关注。靶点网络特征分析显示,通塞脉片主要活性成分可通过与Toll样受体(TLR1,TLR2)、基质金属蛋白酶(MMP1,MMP2,MMP3,MMP9)、血管紧张素转化酶(ACE)、白三烯A4水解酶(LTA4-H)、5-脂氧酶(5-LOX)、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARα,PPARγ)等22个主要靶蛋白作用,起到调节炎症、增加斑块稳定性、保护内皮细胞、参与血脂调节及抗凝等作用,从而参与对动脉粥样硬化病理过程不同环节的调控,最终实现对动脉粥样硬化的治疗。该研究揭示了通塞脉片治疗动脉粥样硬化的主要药效物质及其可能的分子作用机制,印证了通塞脉片多成分、多靶点、整体调节的作用特点,为后续系统进行通塞脉片药效物质基础和作用机制实验研究提供了理论依据。     

桂枝茯苓胶囊中主要成分对人子宫肌瘤细胞增殖及小鼠离体子宫收缩活动的影响

目的:初步评价桂枝茯苓胶囊中17个主要成分抗子宫肌瘤细胞增殖及抗痛经作用。方法:人子宫肌瘤细胞以4×103个/孔接种于96孔板中,加入终质量浓度为25 mg·L~(-1)的17个主要成分作用48 h,每组设6个复孔,采用Hoechst33342/碘化丙啶(PI)双染分析考察17个成分对人子宫肌瘤细胞的体外抑制作用;采用缩宫素(PGF2α)诱导的小鼠离体子宫收缩模型评价17个主要成分的抗痛经生物效应,每组实验重复10次。结果:与空白组比较,槲皮素,桂皮醛,丹皮酚,茯苓酸,去氢土莫酸,白芍苷,芍药苷7个成分能明显抑制子宫肌瘤细胞的增殖,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01);与空白组比较,没食子酸,芍药苷,丹皮酚,苦杏仁苷,苯甲酰芍药苷,五没食子酰葡萄糖6个成分对小鼠离体子宫平滑肌收缩有明显抑制作用(P0.01)。结论:槲皮素,桂皮醛,丹皮酚,茯苓酸,去氢土莫酸,白芍苷,芍药苷7个成分可能是桂枝茯苓胶囊治疗子宫肌瘤的主要活性成分;没食子酸,芍药苷,丹皮酚,苦杏仁苷,苯甲酰芍药苷,1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖6个成分可能是桂枝茯苓胶囊治疗原发性痛经的主要活性成分。     

RP—HPLC法测定诃子中3种可水解丹宁的含量

目的 :建立诃子中 3种可水解丹宁的高效液相色谱测定方法。方法 :色谱柱为NovaPakC18,流动相为甲醇 - 2 %冰醋酸水溶液 (2 7∶73) ,检测波长为 2 80nm ,流速为 1mL·min-1。结果 :3种可水解丹宁诃子酸(chebulinicacid ,Ⅰ ) ,诃黎勒酸 (chebulagicacid ,Ⅱ )和 1,3,6 -三 -O -没食子酰基葡萄糖 (1,3,6 -tri-O -galloyl- β-D - glucose ,Ⅲ )的线性范围分别为 3 32～ 16 6 0 μg ,3 48～ 17 40 μg和 2 74～ 13 70 μg ,回收率分别为 10 0 3% ,94 5 0 %和 85 0 9% ,精密度试验RSD分别为 3 2 % ,3 4%和 3 3%。结论 :该法重现性较好 ,结果可靠 ,可为诃子药材的质量评价提供有效手段。     

高效液相法同时测定银杏叶中11种成分的含量

为了考察不同产地银杏叶药材中黄酮醇苷和双黄酮的含量差异,本实验采用Agilent ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250mm,5μm)色谱柱,在流动相为乙腈-0.4%磷酸水溶液系统,流速1 m L·min-1,检测波长为254 nm的条件下进行梯度洗脱,建立了同时测定银杏叶中7种黄酮醇苷和4种双黄酮成分含量的高效液相色谱方法。测定结果表明10个不同产地的银杏叶药材中7种黄酮醇苷和4种双黄酮成分的含量存在差异。     

不同干燥工艺对参蒲盆炎颗粒浸膏中芍药苷、虎杖苷和延胡索乙素的影响

目的从指标性化学成分量变化的角度,考察不同干燥方式和条件对参蒲盆炎颗粒浸膏质量的影响,为干燥工艺的优选提供方法依据。方法参蒲盆炎颗粒浸膏分别采用带式真空干燥、喷雾干燥、板式减压干燥、常压干燥4种不同方式进行干燥,测定各干燥样品含水量及芍药苷、虎杖苷和延胡索乙素的量,分别采用方差分析、聚类分析与主成分分析方法比较各组样品中3种指标成分量的差异、聚类情况,确定与干燥工艺参数相关性最大的化学成分。结果不同干燥方式样品含水量差异小,芍药苷、虎杖苷、延胡索乙素的量存在较大差异,以带式真空干燥样品中各成分量最高,喷雾干燥次之,100℃常压干燥样品最低。其中,带式真空干燥、喷雾干燥对样品指标性成分破坏较小且聚为一类,而板式减压干燥、常压干燥对样品指标成分破坏较大,并各自聚为一类。芍药苷、虎杖苷和延胡索乙素的量对4种干燥工艺的参数变化均较为敏感,在干燥过程中应重点监测这几类物质的量变化。结论干燥方式和条件的改变对参蒲盆炎颗粒浸膏质量的影响不容忽视,指标性化学成分定量测定可作为评价参蒲盆炎颗粒浸膏干燥工艺优选的一种快速检测方法。     

反相高效液相色谱法测定花叶的绿原酸含量

采用反相高效液相色谱法测定了花叶中绿原酸的含量．在ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒＲＰ－１８色谱柱（２５０ｍｍ×４ｍｍ）上以０．０１ｍｏｌ／ＬＫＨ２ＰＯ４—０．０１ｍｏｌ／ＬＨ３ＰＯ４—ＥｔＯＨ－ＥｔＯＡｃ（４２．５４２．５１０５）为流动相，检测波长２８０ｎｍ，平均加样回收率９５．５％，相对标准偏差１．３４％（ｎ＝５）．１１月采集的花叶中绿原酸含量为２．０５％．     

市售诃子药材中3种可水解丹宁的定量分析与质量评价

用ＲＰ—ＨＰＬＣ法测定了１０个市售诃子药材样品中３种主要可水解丹宁：诃子酸（ｃｈｅｂｕｌｉｎｉｃ ａｃｉｄ，Ｉ）、诃黎勒酸（ｃｈｅｂｕｌａｇｉｃ　ａｃｉｄ，Ⅱ）和１，３，６－三－Ｏ－没食子酰基葡萄糖（１，３，６－ｔｒｉ－Ｏ－ｇａｌｌｏｙ－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｓｅ，Ⅲ）的含量。结果表明，Ⅰ和Ⅱ的含量与诃子药材的性状有明显正相关性。     

六味地黄软胶囊及其各提取部位治疗更年期综合征的实验研究

目的：观察六味地黄软胶囊及其各提取部位对更年期综合征动物的影响。方法：选用雌性SD大鼠，采用摘除卵巢方法复制更年期综合征模型，以六味地黄软胶囊及其各提取部位灌胃给药治疗15日，观察药物对模型动物的动情周期，血清中IL-2、LH、E，和FSH水平以及子宫、肾上腺、胸腺等脏器指数的影响。结果：六味地黄软胶囊及其乙酸乙酯提取部位可改善去卵巢大鼠的动情周期的变化，升高去卵巢大鼠血清IL-2和E2水平，降低LH水平，升高子宫、肾上腺及胸腺指数；正丁醇提取部位也可以改善去卵巢大鼠动情周期变化，降低血清IL-2水平。结论：六味地黄软胶囊对更年期综合征有治疗作用，其有效成分主要集中在乙酸乙酯和正丁醇提取部位。     

花叶中丹宁及绿原酸季节性变化分析

本文利用正相与反相HPLC方法对檵花叶中丹宁与绿原酸季节性变化规律作了分析,结果表明:丹宁的种类在当年6月至次年2月间几无变化,而绿原酸的含量在这一期间呈明显逐渐上升趋势。这一结果为合理开发檵花叶药用资源提供了科学依据。