膜联蛋白5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌及3β-羟基类固醇脱氢酶表达的影响

目的先前研究发现促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)刺激Leydig细胞后,膜联蛋白5(annexin 5)及睾酮水平同时增加,推测annexin 5和睾酮之间可能存在某种内在的联系,3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)是间质细胞的标记酶。文中旨在研究annexin 5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌及3β-HSD表达的影响。方法原代培养大鼠睾丸间质细胞,用不同浓度的annexin 5(0、10-10、10-9、10-8mol/L)处理间质细胞24h和用10-9mol/L的annexin 5处理细胞不同时间(6、12、24、36h),收集培养液,用化学发光法测定培养液中的睾酮含量;Western blotting方法分析睾丸间质细胞中3β-HSD的表达变化。结果不同浓度的annexin 5处理间质细胞24h后,与对照组比较,终浓度为10-10mol/L和10-9mol/L时,睾酮水平分别升高了18%[(14.38±0.30)nmol/Lvs(12.12±0.74)nmol/L](P<0.01)和26%[(15.25±0.47)nmol/Lvs(12.12±0...     

光照应激对SD大鼠睾丸中Annexin 5表达的影响

目的观察光照应激状态下SD大鼠睾丸组织中annexin5的表达变化。方法建立SD大鼠光照应激模型,24h持续光照,分为光照应激短期(2、3、4、7d)和光照应激长期(14、21、28d),分别取应激状态和相应对照组的大鼠睾丸组织,采用免疫组织化学和Western blotting技术分析annexin5免疫定位和蛋白相对表达。结果Western blotting结果显示:短期光照应激组(2、3、4、7d)的实验组大鼠睾丸annexin5表达与对照组相比无明显变化;在持续光照14d和21d后,实验组大鼠睾丸annexin5的相对表达量与对照组相比分别从3.09提高到4.16,从4.20提高到5.28(P<0.01,P<0.05);而持续光照28d后,实验组大鼠睾丸annexin5的相对表达量(4.87)与对照组(4.13)比较无明显差异(P>0.05)。免疫组织化学显示,annexin5在大鼠睾丸中的分布未见明显改变,但光照应激长期实验组(14、21、28d)annexin5免疫组化显色较深,说明annexin5表达升高,这与Westernblotting的结果基本一致。结论长期光照应激使大鼠睾丸annexin...     

精浆胸苷激酶1与精液参数关系的初步分析

目的 探讨精浆胸苷激酶1(Thymidine kinase 1,TK1)的浓度与精子参数的关系.方法 利用增强化学发光法检测无精子症和少弱精子症及已生育健康人精浆TK1的浓度.同时利用计算机辅助精液分析系统分析各实验组精子密度及活力.各实验组精浆酸性磷酸酶、α-葡糖苷酶、精浆果糖和锌的浓度也一并检测.分析精浆TK1浓度变化和精子参数、精浆相关参数的相关性.结果 弱精于组(2.41±0.21)及无精子组(2.72±1.16)患者精浆TK1的浓度显著高于正常对照组(1.53±0.22)(P<0.01),少精子组(1.60±0.13)和少弱精子组(1.68±0.24)患者精浆TK1的浓度与对照组相比差异没有统计学意义(P>0.05).精浆TKl与精浆生化指标即精浆酸性磷酸酶、α-葡糖苷酶、果糖和锌的浓度都没有显著的相关性(P>0.05).结论 TKl可能与精子活动质量有一定相关性,高浓度的TKl是引起弱精子症的原因之一,与精子数量的变化关系不密切.TKI在无精子症患者中浓度偏高的原因有待进一步研究.     

促性腺激素释放激素类似物对In-R1-G9细胞中胰高血糖素分泌的影响

目的 研究表明促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone, GnRH)可能对胰高血糖素具有调节作用,文中观察GnRH类似物对仓鼠胰高血糖素瘤细胞(In-R1-G9)胰高血糖素分泌的影响. 方法 通过Western blot和免疫细胞化学的方法检测GnRH受体在In-R1-G9细胞中的表达和定位,然后分别用终浓度为0、0.1、10、1000nmol/L的GnRH类似物处理培养的In-R1-G9细胞2h,用放射免疫法分别检测对照组和实验组中胰高血糖素分泌量. 结果 GnRH受体在In-R1-G9细胞中表达并定位在细胞膜上.低浓度的GnRH激动剂(GnRHa)(0.1nmol/L)增强胰高血糖素分泌的作用不显著;而高浓度的GnRHa(10、1000nmol/L)能显著增强胰高血糖素的分泌(P＜0.05).低浓度的GnRH拮抗剂(GnRHant)(0.1nmol/L)降低胰高血糖素分泌的作用不显著;而高浓度的GnRHant(10、1000nmol/L)能明显地抑制胰高血糖素的分泌(P＜0.05). 结论促性腺激素释放激素类似物能以浓度依赖性的方式调节In-R1-G9细胞中胰高血糖素的分泌,这一过程可能通过GnRH受体作用.     

促性腺激素释放激素激动剂对In-R1-G9细胞中胰升血糖素表达的影响

目的研究促性腺激素释放激素（GnRH）激动剂（GnRH agonist,GnRHa）对In-R1-G9细胞内胰升血糖素表达的调控作用。方法分别用终浓度为0．1nmol／L、10nmol／L、1000nmol／L的GnRHa处理培养的In-R1—09细胞2h（对照组用生理盐水处理）,通过Western blot和荧光定量PCR技术观察胰升血糖素在蛋白水平及转录水平的变化。结果与对照组相比,低浓度的GnRHa（0．1nmol／L）使胰升血糖素在蛋白水平和转录水平的表达均有所升高,但差异无统计学意义（P〉0．05）;而高浓度的GnRHa（10nmol／L、1000nmol／L）能明显增强胰升血糖素的表达（P〈0.05或P〈0．01）。结论一定浓度的GnRHa能增强In—R1-G9细胞内胰升血糖素的表达。     

软胶囊囊壳力学性能的影响因素研究进展

软胶囊在有效期内出现的黏连、渗漏、崩解迟缓及老化等一系列稳定性问题,与软胶囊囊壳的力学性能有关。软胶囊力学性能受到多种因素影响,包括软胶囊囊壳材料、软胶囊制备过程、环境温度、湿度与光照等。明胶对软胶囊力学性能的影响主要是因其发生交联反应;软胶囊制备过程干燥温度过高会使囊壳的硬度、抗拉强度变大,断裂伸长率减小;环境温度低温时断裂伸长率较大,但抗拉强度较小,但高温时断裂伸长率较小,但抗拉强度较大;在环境湿度低于50%时抗拉强度显著降低,高于50%时环境湿度的变化对抗拉强度影响不大;而断裂伸长率则相反,其随环境湿度的增加呈上升趋势;环境中的紫外线与可见光会使囊壳中的胶束发生变性聚焦,增加囊壳交联程度,导致囊壳抗拉强度异常增大。通过研究软胶囊囊壳的力学性能有助于解决其在有效期内出现的稳定性问题。     

坐骨神经选择性损伤对SD大鼠胃中annexin 5表达的影响

目的:疼痛特别是慢性疼痛,是战争创伤引起的常见症状,也是近年来影响人们身心健康的主要因素之一,但其对消化系统功能的影响仍没有系统的研究.因此,文中通过建立坐骨神经选择性损伤模型研究慢性疼痛应激状态下SD大鼠胃中annexin 5表达的变化. 方法:72只SD大鼠随机分成3组,手术组大鼠结扎并切断胫神经和腓总神经,但保留腓肠神经以建立坐骨神经分支选择性损伤(SNI)模型;假手术组只暴露坐骨神经干及其分支而不损伤神经;正常对照组不做任何处理.然后通过免疫组织化学和Western blot方法分别研究坐骨神经选择性损伤后14d、21 d和28d时大鼠胃中annexin 5蛋白定位及表达的变化. 结果:免疫组化结果显示annexin 5存在于胃上皮及胃腺细胞中.术后14d,手术组胃黏膜上皮细胞中annexin 5的定位明显减少;Western blot结果显示,在坐骨神经分支选择性损伤引起的慢性疼痛应激状态下,14 d时手术组annexin 5蛋白表达水平显著低于对照组(P＜0.01)和假手术组(P＜0.05),21 d时手术组annexin 5蛋白表达水平也显著低于对照组和假手术组(P＜0.05),而48d时手术组与其对应的对照组和假手术组相比均无显著性差异(P＞0.05). 结论:坐骨神经选择性损伤引起的慢性疼痛应激能下调SD大鼠胃中gnnexin 5的表达,annexin 5可能参与了胃对疼痛应激的反应.     

促性腺激素释放激素激动剂通过ERK MAPK途径调控大鼠睾丸间质细胞3β-HSD mRNA表达

目的:促性腺激素释放激素(GnRH)是下丘脑分泌的10肽激素,通过刺激促性腺激素释放激素的合成和分泌,调节性激素的合成.GnRH对睾丸间质细胞也具有直接的刺激作用.文中研究GnRH激动剂(GnRHa)对大鼠睾丸间质细胞ERK MAPK信号通路和3β-HSD mRNA表达的影响. 方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞48 h后,血清饥饿2 h.GnRHa(10-7 mol/L)和ERK抑制剂PD98059(50 μmol/L)刺激细胞后Western blot检测磷酸化ERK(p-ERK)、总ERK(t-ERK)的蛋白表达,荧光实时定量PCR检测3β-HSD mRNA表达. 结果:结果显示GnRHa刺激间质细胞0、5、10、30、60和90min后,p-ERK水平在5min时达到最高,与对照组比较升高了约3.5倍(P<0.05);10min时开始下降,但与对照组相比较仍显著升高2.2倍(P<0.05);90min时恢复到正常水平.加入ERK选择性抑制剂PD98059后,p-ERK水平显著下降50%(P<0.05);再用GnRHa刺激细胞5min,p-ERK水平仍无法恢复正常水平.用PD98059处理细胞后,再加入GnRHa培养24h,3β-HSD mRNA水平也显著下降(与GnRHa组相比,P<0.05). 结论:GnRH激动剂可能通过ERK MAPK信号通路来调控大鼠睾丸间质细胞3β-HSD mRNA的表达,进而调控睾酮的分泌.     

膜联蛋白5在大鼠消化器官中的细胞定位

目的:观察膜联蛋白5(Annexin 5)在大鼠部分消化器官中的细胞定位,为探讨Annexin 5在消化器官内可能发挥的生理学作用奠定基础.方法:选取健康SD大鼠,经Bouin's液固定其消化器官(胃、小肠、肝脏、胰腺)后,应用特异的兔抗Annexin 5抗血清,采用免疫组织化学方法和免疫荧光化学方法,观察Annexin 5在大鼠消化器官中的细胞定位.结果:Annexin 5在大鼠的消化器官中呈细胞特异性分布.Annexin 5在胃上皮细胞、胃底腺部分细胞、小肠绒毛杯状细胞、胆管内皮细胞和血管内皮细胞中分布较多,同时在胃和肠的黏膜层和肌层的部分细胞、小肠固有层中某些细胞、肝内皮细胞、胰腺血管内皮细胞中也有分布.结论:Annexin 5存在于大鼠消化器官执行特殊功能的一些细胞内,提示Annexin 5可能在这些细胞发挥生理功能的过程中具有特定的作用.     

坐骨神经选择性损伤应激对大鼠颌下腺中annexin 5表达的影响

目的研究坐骨神经选择性损伤引起的慢性疼痛应激态下SD大鼠颌下腺中annexin 5表达的变化。方法72只SD大鼠随机均分为3组:手术组、假手术组和对照组(每组24只)。手术组:用氯胺酮(40mg/kg)腹腔注射麻醉后,切开左后肢侧面皮肤和股二头肌,暴露大鼠坐骨神经干及其3个分支:胫神经、腓总神经和腓肠神经,结扎并切断胫神经和腓总神经,保留腓肠神经以建立坐骨神经分支选择性损伤(SNI)模型。假手术组:只暴露坐骨神经干及其分支而不损伤神经。对照组:不做任何处理。分别于手术后14、21、28d从各组中取8只大鼠,麻醉后处死,分离颌下腺组织置于液氮内保存备用。然后通过免疫组织化学和Western blotting检测坐骨神经选择性损伤后14、21、28d时各组大鼠颌下腺中annexin 5蛋白定位及表达的变化。结果免疫组化结果显示,annexin 5主要定位在颌下腺润管、分泌管及排泄导管上皮细胞中。术后14d,annexin 5在颌下腺的定位明显减少,Western blotting结果显示术后14d时与对照组比较,手术组大鼠颌下腺中annexin 5表达水平显著降低(P<0.01),与假手术组比较,手术组annex...