癫痫大鼠颞叶和海马区PX1mRNA与CX36mRNA表达及甘珀酸的干预

目的观察戊四氮点燃大鼠颞叶和海马区PX1mRNA和CX36mRNA的表达及阻断剂甘珀酸的干预作用。方法 K组、CBX、NS组SD大鼠各10只,K组、CBX组用PTZ点燃,再分别用生理盐水CBX干预3d,NS组注射生理盐水。观察3组大鼠的行为变化,采用RT-PCR方法观察颞叶和海马区PX1mRNA和CX36mRNA的表达。结果①K组,CBX组28d左右均达到点燃,NS组大鼠行为学无变化。②PX1mRNA在海马和颞叶的表达均为K组〉CBX组〉NS组（P〈0.05）,各组海马区的表达高于颞叶（P〈0.05）。CX36mRNA在海马和颞叶的表达均为K组〉CBX组〉NS组（P〈0.05）,各组颞叶的表达高于海马区（P〈0.05）。结论 PX1和CX36可能参与癫痫的发生发展,其阻断剂CBX有潜在的抗惊厥作用。     

托吡酯、氟桂利嗪对大鼠海马快速电点燃模型的干预效果

目的:观察托吡酯、氟桂利嗪对大鼠海马快速电点燃模型-慢性颞叶癫痫模型的干预效果。方法:实验于2004-12在中山大学电生理实验室完成。选择8～10周成年雌性Wistar大鼠60只,右侧海马植入双极电极,随机数字表法分为对照组、单纯刺激组、氟桂利嗪组,托吡酯组和联合用药组,每组12只。对照组植入电极不予电刺激,单纯刺激组仅给予电刺激,氟桂利嗪组,托吡酯组和联合用药组刺激前90min分别给予40mg/kg氟桂利嗪、80mg/kg托吡酯及上述剂量两药联合灌胃。观察点燃率,点燃速度及异常脑电发放时间。经历全面痫性发作后,主动脉灌注法处死动物做右侧海马部尼氏体(标记神经元)和胶质纤维酸性蛋白(标记星形胶质细胞)染色并计数。对照组大鼠与其他组饲养相同天数后处死做病理检查。结果:对照组动物无死亡,单纯刺激组、氟桂利嗪组,托吡酯组和联合用药组分别有11,10,11,11只大鼠充分点燃并完成后续实验。成功率组间差异无显著性意义(P>0.05)。①单纯刺激组、氟桂利嗪组、托吡酯组和联合用药组首次全面点燃所需刺激次数分别为[(16.36±4.32)、(18.40±3.86)、(24.36±7.71)、(32.01±9.46)次],平均异常脑电发放时间分别为[(46.24±12.22)、(43.52±13.40)、(30.92±6.73)、(25.20±3.86)s],除单纯刺激组、氟桂利嗪组间差异无显著性意义(P>0.05),其余两两组间差异均有显著性意义(P<0.05);②对照组、单纯刺激组、氟桂利嗪组,托吡酯组和联合用药组动物右侧海马神经元计数均值分别为[(5958.5±167.5)、(4838.5±70.0)、(5159.0±175.5)、(5480.5±219.5)、(5547.0±321.0)个/mm2],星形胶质细胞计数均值分别为[(2162.5±173.0)、(3282.0±163.5)、(2872.0±163.0)、(2532.5±82.0)、(2502.5±137.5)个/mm2],除托吡酯组和联合用药组间差异无显著性意义(P>0.05),其余两两组间差异均有显著性意义(P<0.05)。结论:托吡酯对大鼠海马快速电点燃模型有明显抑制效果,氟桂利嗪作用不明显,联合用药时有一定的叠加作用。     

氯胺酮在点燃模型作用中的量效关系

目的:观察氯胺酮对大鼠杏仁核电刺激点燃和化学性点燃模型的作用,并了解其是否有量效关系。方法:实验在青岛大学医学院药理学研究室进行。①杏仁核电刺激点燃模型制备:用恒定电流刺激Wistar雌鼠右侧杏仁核(400μA单相方波,波宽1ms,频率60Hz,持续1s,1次/d),若动物连续3次出现RacinesⅤ级发作反应(全身痉挛、强直惊厥)即被完全点燃。②取点燃大鼠24只随机分为3组(n=8),分别腹腔注射氯胺酮30.0,10.0,5.0mg/kg,30min后测定后放电阈值,记录在后放电阈值刺激下的后放电时程和Racines分级。③取点燃大鼠24只随机分为3组(n=8),分别腹腔注射氯胺酮5.0mg/kg,尼卡地平2mg/kg,氯胺酮5.0mg/kg合并尼卡地平2mg/kg,记录给药前后后放电时程以及Racines分级。④腹腔注射盐酸利多卡因40mg/kg制备大鼠利多卡因化学点燃模型,取点燃大鼠28只随机分为4组(n=7),分别腹腔注射氯胺酮5.0,10.0,20.0,30.0mg/kg,30min后腹腔注射利多卡因40mg/kg,测定1h内大鼠发作Racines分级,计算给药前后V级发生百分率。结果:76只大鼠进入结果分析。①氯胺酮对大鼠杏仁核点燃发作影响:氯胺酮10.0,30.0mg/kg组大鼠给药后后放电时程显著短于给药前(P<0.05),Racines发作级别显著低于给药前(P<0.01)。②氯胺酮5.0mg/kg和尼卡地平2.0mg/kg合用能缩短点燃大鼠的后放电时程[(42.3±9.7),(60.6±10.3)s,P<0.05],降低Racines发作级别(3.1±0.7,5.0±0,P<0.05)。③腹腔注射氯胺酮20.0,30.0mg/kg可降低大鼠利多卡因化学点燃模型的V级发作百分率(50.0%,100%;12.5%,100%)。结论:氯胺酮对大鼠杏仁核点燃和利多卡因化学点燃模型具有抑制作用,与尼卡地平有协同作用,并有显著的量效关系。     

杏仁核点燃癫痫大鼠nNOS的表达及抗癫痫药物的影响

目的建立大鼠杏仁基底外侧核电点燃模型,测定大鼠海马nNOS的表达情况并观察常用抗癫痫药物对nNOS表达的影响,探讨癫痫的可能发病机制及常用抗癫痫药的药理作用。方法把双极电极插入大鼠左侧杏仁基底外侧核,给予慢性电刺激使大鼠达到点燃状态。设立空白对照组、手术对照组、电点燃癫痫组及托吡酯、丙戊酸钠、卡马西平治疗组,采用半定量RT-PCR法检测各组大鼠海马组织nNOS mRNA的表达,并用免疫组织化学法检测各组大鼠海马组织中nNOS的表达。结果杏仁核点燃癫痫组大鼠海马组织中nNOS较空白及手术对照组明显升高,经药物治疗后的nNOS表达出现明显下调,其中托吡酯组与其他两个药物组相比nNOS表达增高,差异具有显著性。免疫组化结果表明nNOS定位于神经元胞浆,癫痫组及托吡酯治疗组的强阳性表达率高于对照组及其他治疗组。结论杏仁核点燃癫痫大鼠海马组织nNOS表达明显增加,提示nNOS可能参与了杏仁核点燃癫痫的形成过程;抗癫痫药物明显减少了nNOS的表达,有利于保护正常的神经细胞功能。     

做公益路上的一颗火苗

对别人来说,公益也许是捐出物资和钱财,但是我"捐"的是自己的青春,甚至可能是一生。公益如同一颗火苗,会点燃人们内心奉献的火把。我无怨无悔地做一颗公益路上的火苗,用行为和青春去带动大家,让奉献的火把在更多志愿者中传递。     

腺苷灶点给药对大鼠杏仁核电点燃模型的作用

目的研究腺苷直接灶点给药对大鼠杏仁核电点燃癫痫模型的作用,并且是否存在"治疗时间窗"效应。方法采用杏仁核电点燃癫痫模型并在不同时间点直接在诱发灶点杏仁核给予腺苷(2.5 g.L-1)观察其作用。四组不同的给药时间点分别是点燃前20 min和5 min,点燃后立即给药和电刺激诱发的后放电结束之后给药。结果每天电刺激前5 min灶点直接给予腺苷能显著抑制电刺激诱发的癫痫行为学等级进展并减少后发电的时长,而电刺激前20 min或者后放电结束之后给药却无抗癫痫效果。同时,电刺激后立即灶点给药也和提前5 min给药一样具有明显的抗癫痫作用。给生理盐水的对照组,前20 min给药和后放电结束后给药组的动物均在15 d内到达大发作或者完全被点燃。然而,在相同的时间内,前5 min给药组和电刺激后立即给药组中分别只有16.7%和25%的动物到达大发作。结论腺苷灶点给药能显著抑制大鼠杏仁核电点燃癫痫的进程,并且存在治疗时间窗现象,这将为以后研究反馈式的腺苷给药治疗方式提供理论依据。     

氟桂利嗪对杏仁核点燃鼠模型脑内P-糖蛋白及谷氨酸表达的影响

目的观察氟桂利嗪对杏仁核点燃鼠模型脑内P-糖蛋白（P-glycoprotein,Pgp）及谷氨酸（glutamate,Glu）表达的影响。方法选择健康雄性Wistar大鼠30只制作动物模型,造模成功后随机分为单纯对照组、癫痫模型组和氟桂利嗪组,再分别取脑组织,采用免疫组化的方法检测大鼠脑内Pgp及Glu表达并比较各组的变化。结果（1）癫痫模型组中杏仁核、海马、颞叶P-糖蛋白表达的阳性细胞计数明显增多、谷氨酸灰度值减少（灰度值越高,Glu的表达越少）,氟桂利嗪组中Pgp表达的阳性细胞计数减少、谷氨酸灰度值增多（P〈0.05）。（2）Pgp和Glu的表达均以杏仁核最强,特别是在模型组中,其次为海马和颞叶。结论（1）氟桂利嗪在杏仁核电刺激点燃模型中可明显抑制杏仁核、海马、颞叶Pgp、Glu的表达。（2）Pgp、Glu在杏仁核、海马、颞叶中表达程度不同,以杏仁核表达最强。     

戊四氮点燃大鼠海马及额叶皮层单胺水平的变化

目的:通过观察癫痫模型大鼠脑内单胺类递质水平的变化,探讨其在癫痫发病机制中的作用.方法:腹腔注射戊四氮(PTZ)建立Wistar大鼠癫痫模型,应用荧光分光光度法测定大鼠额叶、海马中多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)和去甲肾上腺素(NE)的含量.结果:癫痫模型组额叶中5-HT、DA均高于正常对照组(P<0.05或P<0.01);NE含量低于对照组,两者之间的差异有显著性(P<0.01);海马中:癫痫模型组DA与正常对照组比较无明显差异,5-HT、NE的含量均低于正常对照组(P<0.05或P<0.01) .结论:脑内单胺类递质参与了癫痫活动调控,单胺水平的改变将导致脑的兴奋性改变.作用的性质取决于所在脑区,具体机制有待深入的研究.     

草果知母汤加减方及其拆方对戊四唑点燃大鼠脑内NMDAR1 mRNA的影响

目的：探讨草果知母汤加减方及其拆方抗癫痫作用机制。方法：使用戊四唑（pentyle-netetrazol,PTZ）点燃大鼠模型,利用原位杂交法定量分析大鼠脑内N-甲基-口天冬氨酸受体1（N-methyl-D-aspartate receptor 1,NMDAR1）mRNA的表达。结果：草果知母汤加减方及其拆方治疗4周后,与模型组比较,全方组和拆方1组海马CA1、皮质内NMDAR1 mRNA表达水平均显著下降（P〈0．01）;拆方2组仅皮质内NMDAR1 mRNA表达水平显著下降（P〈0．01）。结论：草果知母汤加减方及其拆方能降低脑内NMDAR1 mRNA表达,从而起到抗癫痫作用。     

大鼠杏仁核电点燃癫痫模型的建立及海马病理变化的研究

目的:探讨建立大鼠杏仁核电点燃癫痫模型的方法及海马的病理学变化.方法:利用立体定向手术,向Wistar大鼠杏仁核(前囟后2.2 mm、旁开4.8mm、颅骨平面下深8.5mm)植入微电极.术后7 d予以电刺激(50Hz、0.8mA),观察点燃过程中大鼠行为学表现及脑电表现.HE染色、GFAP免疫组化染色,分析大鼠海马及杏仁核区的病理学改变.结果:点燃率为88.6%.大鼠在0.8mA刺激电流强度下,(19.89±3.64)d可以达到点燃要求.海马的病理改变为:海马区锥体细胞神经元缺失及神经胶质细胞的增生.结论:杏仁核靶点参数进行立体定向手术植入电极是可靠的,单侧杏仁核在频率50Hz、0.8mA细电流刺激下,可以达到点燃要求.点燃模型的大鼠行为学表现、脑电表现及海马病理学改变与人类颞叶内侧型癫痫相似.