Novel multi-probe RNase protection assay set for detection of endotoxin associated receptors gene expression

Objective: To construct the multi-probe ribonuclease protection assay (RPA) template set to be used for detecting expression patterns of MD-2, TLR4, CD14 mRNAs in human peripheral blood mononuclear cells. Methods : The designed cDNA fragments of the three genes were generated by polymerase chain reaction (PCR)using specific primers and directionally cloned into EcoR I and Hind III sites of expression plasmid pSP72 containing the T7/ promoter, the linearized plasmids was used as template to synthesize anti-sense RNA probes. Then we extracted total RNA from peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and detected the dynamic expression patterns of the three genes with RPA method. Results: The proper sequence and orientation of the template set were confirmed by sequencing and the template set was successfully used to assay TLR4, MD-2 and CD14 mRNAs in human PBMC. The results showed that the three detected genes decreased transiently 1-3 hours after 100 ng/ml LPS stimulation. Conclusions: These new RPA multi-probe set provided valuable tool for the simultaneous quantitative determination of expression of TLR4, CD14 and MD-2 mRNAs in both constitutive and inducible types.     

创伤后应激障碍样行为异常大鼠海马糖皮质激素与盐皮质激素受体表达研究

目的：在建立海马惊厥阈下电刺激创伤后应激障碍（PTSD）动物模型基础上，进一步探讨脑组织糖皮质激素受体（GR）与盐皮质激素受体（MR）变化规律。方法：采用频率25Hz、波宽1ms、串长10s、串隔7min、强度100μA的恒流、单脉冲电流，反复刺激大鼠海马，并通过旷场行为及拒俘反应性检查观测大鼠情感行为改变；利用免疫印迹法检测脑组织GR与MR表达。结果：成功诱发了实验大鼠较长时程的活动习性改变，警觉水平增高，惊恐行为，环境适应能力下降，躲藏逃避反应等PTSD样行为异常表现。免疫印迹检测显示，电刺激停止后2d-1周，阈下刺激组大鼠海马GR表达明显增高；电刺激停止后1dMR表达增高，2－3d则明显降低；而额叶皮层二者表达无明显改变。结论：海马CA1区惊厥阈下电刺激可基本模拟PTSD多种临床表现，而海马结构GR持续性高表达与MR较长时程降低在PTSD样行为异常的发生发展中可能有重要意义。     

烧冲复合伤后细胞免疫功能和PGE1,消炎痛的作用

本实验对大鼠中度烧冲复合伤后脾淋巴细胞增殖反应、白细胞介素－２的变化进行了观察，并对前列腺素Ｅ１和消炎痛的调节作用进行了研究。结果发现，伤后脾淋巴细胞增殖反应除伤后第一天明显降低，３、５、７天均明显增加，１４天恢复正常。ＩＬ－２诱生在伤后明显增加，１４天恢复正常。ＰＧＥ１对淋巴细胞增殖反应和ＩＬ－２诱生均有显著或非常显著的抑制作用；而消炎痛却有不同程度的增强作用。上述结果表明，中度烧冲复合伤对大…     

CHANGES OF VON WILLEBRAND FACTOR ANTIGEN CONTENT IN PLASMA AND PULMONARY MICROVASCULAR ENDOTHELIAL CELLS AFTER BURN-BLAST COMBINED INJURY

Ｔｏｒｅｃｏｇｎｉｚｅｃｈａｎｇｅｓｏｆｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｃｉｒ┐ｃｕｌａｔｉｎｇｖｏｎＷｉｌｅｂｒａｎｄｆａｃｔｏｒａｎｔｉｇｅｎ（ｖＷＦ：Ａｇ）ａｎｄｉｔｓｒｅｌａｔｉｏｎｔｏｔｈｅｄａｍａｇｅｏｆｐｕｌｍｏｎａｒｙｅｎｄｏｔｈ...     

G蛋白在大鼠心血管对去甲肾上腺素脱敏反应中的作用

为了研究鸟嘌呤核苷酸结合蛋白（Ｇ蛋白）在慢性输入去甲肾上腺素（ＮＥ）所致大鼠心脏和主动脉对ＮＥ脱敏反应中的作用，采用大鼠皮下植入微量泵持续输入ＮＥ（０．１ｍｇ·ｋｇ－１·ｈ－１）模型，Ｇ蛋白α亚基及其ｍＲＮＡ水平用相应的抗体和ｃＤＮＡ探针按Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ法测定．结果显示：输注６ｄＮＥ的大鼠主动脉中Ｇｓα，Ｇｉα和Ｇｏα均显著下降，但其ｍＲＮＡ无显著改变；心房及心室中Ｇｉα显著升高，Ｇｓα，Ｇｏα维持不变，而Ｇｉ２αｍＲＮＡ升高，心房中ＧｓαｍＲＮＡ下降．输入ＮＥ３ｄ的大鼠心房及心室Ｇｉα，Ｇｏα无改变，Ｇｓα４５和４２ｋＤ带显著下降，但５２ｋＤ带升高；心室中ＧｏαｍＲＮＡ的３．８和３．４ｋｂ带显著升高，而心房中５．４ｋｂ带升高，心室Ｇｉ３αｍＲＮＡ下降．上述结果表明输入ＮＥ可引起Ｇ蛋白的动态变化，提示Ｇ蛋白在ＮＥ慢性刺激引起的心血管反应性降低中可能起一定的作用，其早期以Ｇｓ下降为主，６ｄ时则以Ｇｉ升高为主     

进一步推进我国创伤评分工作的开展

进一步推进我国创伤评分工作的开展朱佩芳随着工农业、交通运输业和城市建设的飞速发展，由此也带来了各种事故、灾害所致的大量创伤伤员不断增多，特别是交通事故引起的人员伤亡和财产损失对社会已构成极大的威胁。在伤员救治中如何评定损伤的严重程度；如何对医院本身工...     

Distribution of endotoxins in tissues and circulation and its effects following hemorrhagic shock.

ＤｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆｅｎｄｏｔｏｘｉｎｓｉｎｔｉｓｕｅｓａｎｄｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎａｎｄｉｔｓｅｆｅｃｔｓｆｏｌｏｗｉｎｇｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃｓｈｏｃｋＪｉａｎｇＪｉａｎｘｉｎ蒋建新，ＣｈｅｎＨｕｉｓｕｎ陈惠孙，ＤｉａｏＹｏｕｆａｎｇ刁有...     

院内评价和伤员的预后估计及比较系统

本文介绍了国外公认的一些院内评分和伤员预后估计与比较系统，对它们作了对比分析，总结了各自的特点。     

VEGF在骨折愈合过程中对Ⅷ因子相关抗原表达变化影响的实验研究

目的 研究血管内皮生长因子（VEGF）在骨折愈合过程中骨折端对Ⅷ因子相关抗原含量变化的影响，以确定VEGF对骨折端血管重建中的作用。方法 用105只大耳白制作桡骨骨折模型，随机分为对照组、应用VEGF组、拮抗VEGF组，分别于伤后不同时间利用Western blot方法测定各组动物骨折端Ⅷ因子相关抗原含量变化。结果 应用外源性VEGF后，骨折端Ⅷ因子相关抗原含量明显增加；拮抗VEGF则使骨折端Ⅷ因子相关抗原含量明显下降。结论 VEGF对骨折愈合过程中的血管重建具有重要作用，并可能作为一种重要因子参与了骨折愈合的修复过程。