比索洛尔对缺氧/复氧内皮细胞一氧化氮生成的影响

目的 :观察比索洛尔对培养的人脐静脉内皮细胞 （HU VECs）在缺氧 /复氧 （A/ R）过程中一氧化氮 （NO）生成的影响。方法 :将 HUVECs暴露于缺氧环境中 30 m in后复氧 ,并加入比索洛尔 （1,5 0和 5 0 0 μmol/ L）或空白对照 ,测量复氧前、复氧后 1和 4h培养液上清 NO含量。结果 :对照组 NO产量在复氧后 1h,4h与复氧前相比有显著下降 （均 P<0 .0 1）。比索洛尔 5 0 μm ol/ L 组和 5 0 0 μmol/ L 组 NO产量在复氧后 1h,4h与复氧前相比无显著差异 （均P>0 .0 5 ） ,而与对照组和 1μmol/ L 组同一时间相比均有显著增加 （均 P<0 .0 1）。结论 :比索洛尔可以阻止 A/ R期间内皮细胞 NO产量的下降 ,因此 NO可能参与了 β阻滞剂减少缺血再灌注损伤的过程。     

晚期糖基化终产物对心肌微血管内皮细胞管样结构形成和崩解的影响及机制

目的研究晚期糖基化终产物(AGEs)对大鼠心肌微血管内皮细胞(CMECs)管样结构形成和崩解的影响及其初步机制。方法分离、培养SD大鼠CMECs,将AGEs-BSA与大鼠CMECs共同孵育,实验分为对照组(只加DMEM培养液)、BSA组(100 μg/ml BSA)、AGEs-BSA组(100μg/ml AGEs-BSA)。分别在孵育第1、3天时,用管样结构形成实验观察CMECs管样结构的长度;流式细胞仪检测CMECs的凋亡;ELISA法测定CMECs半胱天冬酶3(caspase-3)的活性。孵育1天采用Western blot法检测CMECs血管内皮细胞生长因子(VEGF)蛋白的表达。结果第1天时,与对照组和BSA组比较,AGEs-BSA组CMECs管样结构的长度明显增加,VEGF蛋白表达显著增加,差异均有统计学意义(P<0.01);而CMECs早期凋亡率及caspase-3的活性,差异无统计学意义(P>0.05)。第3天时,与对照组和BSA组比较,AGEs-BSA组CMECs的管样结构长度明显降低,CMECs早期凋亡率及caspase-3的活性显著增加,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 AGEs-BSA在早期可能通过自分泌VEGF促进CMECs管样结构的形成,晚期可能通过促进CMECs的凋亡,加速管样结构的崩解。     

急性冠脉综合征患者PCI术后外周血MMP-9水平的连续观察及其临床意义

目的观察急性冠脉综合征（ACS）患者经皮冠脉介入（PCI）术后外周血中基质金属蛋白酶-9（matrix metallo-proteases-9,MMP-9）水平的连续变化,探讨MMP-9与ACS的关联性。方法选取ACS患者39例,采用双抗体夹心ELISA测定血清MMP-9的水平。结果ACS患者入院即刻血浆MMP-9水平显著高于对照组及稳定型心绞痛组[（66±16）vs（24±11）μg/L,P<0.01;（66±16）vs（33±11）μg/L,P<0.01]。稳定型心绞痛患者入院即刻血浆MMP-9水平显著高于对照组（P<0.01）。ACS患者PCI术后即刻,外周血MMP-9水平均较入院时显著升高（P<0.01）,随着术后时间的延长,外周血MMP-9水平逐渐降低。结论ACS患者入院时外周血MMP-9水平升高,PCI术后即刻,外周血MMP-9水平均较入院时显著升高,随着术后时间的延长,外周血MMP-9水平逐渐降低。提示MMP-9可以作为诊断ACS的指标之一,术后检测有助于监测ACS患者术后病情的恢复情况。     

抗迟缓爱德华菌单克隆抗体的制备及鉴定

迟缓爱德华菌(Ｅｄｗａｒｄｓｉｅｌｌａｔａｒｄａ)是爱德华菌属中对人和鱼类均具有致病性的病原体,经口或创伤感染后,可引起肠胃炎、败血症等严重疾病〔１〕,鱼类感染后可导致肝肾损害。目前,对该菌所致疾病的诊断主要靠临诊观察和细菌学检查,难以做到准确、及时。鉴于国内外尚未见抗该菌单克隆抗体（ｍＡｂ）的报道,我们制备了抗该菌的ｍＡｂ,以为临床诊断和保护水产资源提供新的检测方法。１材料和方法１．１材料迟缓爱德华菌标准菌株,由青岛海洋大学生命学院提供;大肠杆菌和伤寒杆菌,由本校微生物学教研室惠赠。创伤弧菌和鳗弧菌购自北…     

兔心肌梗死后心室肌细胞钙电流变化及比索洛尔的影响

目的本研究观察心肌梗死(myocardial infarction,MI)后3周,兔心室肌细胞L型钙电流(ICa-L)的改变及比索洛尔的影响.方法采用Langendoff灌流法获得单个心室肌细胞,利用膜片钳技术全细胞记录模式,记录心室肌细胞L型钙电流(ICa-L).结果本实验记录了3组心室肌细胞的ICa-L的电流的变化.MI组ICa-L电流峰值显著高于伪手术组(Sham组)(2.19±0.84)nA vs(1.57±0.56)nA,(P＜0.05),比索洛尔组(β-B组)(1.78±0.53)nA与Sham组间无显著差异.但经膜电容标化后,ICa-L电流密度3组间无显著差异[MI组(12.60±3.74)pA/pF、β-B组(12.57±2.69)pMpF、Sham组(12.49±4.21)pA/pF],Ⅰ～Ⅴ曲线呈典型"铃型"曲线.结论比索洛尔可减轻MI非梗塞区心室肌细胞ICa-L的变化.     

白藜芦醇对心肌微血管内皮细胞缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察白藜芦醇对缺血再灌注损伤心肌微血管内皮细胞(cardiac microvascular endothelial cells,CMECs)的保护作用。方法培养大鼠CMECs,模拟缺血再灌注损伤,随机分为对照组、缺血再灌注组及白藜芦醇组,采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法检测细胞活性;Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测CMECs凋亡率;酶联免疫吸附法检测半胱天冬酶3(caspase-3)活性、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果与对照组比较,缺血再灌注组和白藜芦醇组吸光度值明显降低(P<0.01);CMECs凋亡率、caspase-3相对活性、MDA含量、SOD活性明显升高,差异有统计学意义(P<0.05.P<0.01);与缺血再灌注组比较,白藜芦醇组吸光度值、SOD活性明显升高[(0.47±0.06)vs(0.14±0.04),(28.9±2.9)μU/L vs(22.4+2.2)μU/L,P<0.01];CMECs凋亡率、caspase-3相对活性、MDA含量明显降低.差异有统计学意义[(15.6±0.4)%vs(38.6±0.6)%,(152.1±13.3)vs(307.2±25.3),(9.2±0.7)μmol/L vs(13.5±1.2)μmol/L,P<0.01]。结论白藜芦醇可减轻CMECs的缺血再灌注损伤,这种保护作用可能是通过抗氧化和抗调亡来实现。     

SD大鼠两种气管插管方法的比较

凡涉及大鼠开胸的研究多需要进行辅助呼吸.准确顺利地气管插管是辅助呼吸的重要步骤,是实验成败的关键之一.我们用身边简单的静脉套管针进行引导,直视下经口腔气管插管,并与气管切开插管法比较.     

左旋卡尼汀对缺氧/复氧诱导的心肌细胞氧化、凋亡影响的体外研究

目的：探讨左旋卡尼汀（L-carnitine）对缺氧/复氧（A/R）诱导的乳鼠心肌细胞抗氧化、抗凋亡效应及其可能的作用机制。方法： 采用原代培养乳鼠心肌细胞作为模拟缺血再灌注损伤实验模型，实验分3组：①正常对照组（control）；②A/R组:缺氧120 min,复氧240 min;③L-carnitine组：A/R前2 h加用L-carnitine设4个浓度梯度，1组20 mg/L，2组50 mg/L，3组100 mg/L，4组200 mg/L。观察各组细胞经A/R损伤后，细胞内超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量、琥珀酸脱氢酶（SDH）活性的变化情况，并用流式细胞仪（FCM）检测细胞凋亡率，透射电镜观察细胞超微结构的改变。结果： A/R组SOD活性、SDH活性明显低于对照组，MDA含量、细胞凋亡率均高于对照组(P＜0.05）；在L-carnitine用药组，随给药浓度的增加，MDA含量逐渐恢复正常，SOD活性、SDH活性逐渐回升，而且细胞凋亡率下降，各药物治疗组与A/R组比较各实验指标均显著差异(P＜0.05)；A/R组心肌细胞超微结构损伤明显重于药物治疗组。结论:左旋卡尼汀对心肌细胞具有保护作用，其作用在一定范围内呈剂量依赖关系。     

提高免疫酶技术检测HFRS病毒抗原敏感性的初步研究

以磷苯二胺为辣根过氧化物酶底物显色剂的ELISA双抗体夹心法检测HFRSV抗原中,用四甲基联苯胺替代邻苯二胺,用生物素-抗生素蛋白的BA-ELISA和高效价抗HFRSV的McAb进行McAb-ELISA,使检测抗原的敏感性分别提高4倍以上。如果四甲基联苯胺与BA-ELISA或与McAb-ELISA联合应用,则比原ELISA敏感16倍以上。     

测定HFRS患者血清中特异性抗体方法初探

作者建立了检测HFRS患者血清特异抗体的捕获ELISA和阻断ELISA,并与间接酶染色和间接免疫荧光抗体技术进行了比较。四种方法的阳性检出率相同。血清的几何平均滴度,捕获ELISA比IFAT高32倍;阻断ELISA、酶染色及IFAT无显著差异。但应用不同抗原,ELISA检测血清滴度亦有不同。