抗人胰腺癌单克隆抗体的制备及其特性的研究

本实验采用常规细菌融合方法，在PEG作用下，成功地制备了五株能稳定分泌抗人胰腺癌单克隆抗体的杂交瘤。以间接型ELISA方法和ABC技术进行抗体检测，有限稀释法进行克隆。用羟基磷灰石法纯化单克隆抗体（MAb)，所得MAbB6的免疫球蛋白类型为IgG1,它在培养上清及小鼠腹水中的效价分别为1：16和1：2600。MAbB6具有较好的特异性，其所针对的抗原可能为一种胰腺癌细胞胸膜抗原，是一种肿瘤相关性抗原，羟基磷灰石方法是一种比较理想的单克隆抗体提纯方法。     

用McAb-AST对犬内脏利什曼病早期诊断的初步研究

本文报道实验感染杜氏利什曼原虫小犬10只,在感染前及咸感后5、12、20、40d,分别收集血清,用McAb-AST检测血清内循环抗原。试验结果可见小犬感染后5d即出现阳性反应,表明已可检测出其血清内循环抗原,并随着时间的加长,阳性反应程度有所增加。初步建立了犬利什曼病的一种新的早期诊断方法,简便易行,易于推广应用。     

9种抗日本血吸虫单克隆抗体特性鉴定及其组合试验研究

9种抗日本血吸虫抗原的单克隆抗体,经IFA定位可分为4类.将其中抗不同抗原表位的单抗组合使用,检测抗原敏感性可提高4—8倍.用3种单抗组合,建立的夹心ELISA检测慢性血吸虫病的阳性率为81.3%,276例正常人假阳性率为1.5%.环卵沉淀反应阳性的单抗似可用来分离有关COP反应的虫卵抗原,或在小鼠中诱导及/或调节免疫病理的免疫反应.     

牛种布氏菌单克隆抗体的研究

应用酚杀死的光滑型牛种布氏菌544A抗原免疫的BALB/C小鼠,融合前一周用超声波处理后高速离心制备的可溶性抗原加强免疫,腹腔内注射3次,以无菌手术取脾,制备成免疫脾细胞悬液,取10~8个免疫脾细胞与10~7个SP~2/0小鼠骨髓瘤细胞混合,在分子量4000的PEC 0.8ml(w/v)融合剂的作用下,两分钟后速加无血清的1640液25ml,离心沉淀再悬浮于20%FBSHAT1640培养基中,分装六块96孔细胞培养板,定期补加培养液。10天后开始测其孔上清,其检出阳性孔44孔(ELISA OD值>0.3),初步筛选出11株效价较高、特异性较好者,经反复检测,抗体分泌水平比较稳定,扩大培养,冻存液氮中。克隆后的细胞染色体计数平均为94条/细胞,无血清培养的细胞上清液在PAGE中呈现一条带,符合Mc.cell株仅分泌一种抗体的特性。     

肝癌的靶向治疗——对人肝细胞癌进行抗体介导的治疗

作的研究目的是开发肿瘤特异性靶抗原高亲和力和高稳定性的抗体及其片段，来尝试研制人肝细胞癌（HCC）新的治疗制剂。肿瘤相关抗原是药物和基因传送的很好靶位，具有细胞特异性的优点。作已经研究了使用抗人肝细胞癌细胞系的单克隆抗体（Mab）AF-20作为模型系统。     

Elisa试剂盒法测定抗体修饰纳米粒表面OX26浓度

脑血管疾病是发病率较高的一种疾病,严重危害人类健康。为提高药物血脑屏障透过率可将药物进行抗体修饰,本文针对这种新剂型,应用Elisa试剂盒检测制剂表面是否连接有转铁蛋白受体的单克隆抗体OX26,并测定OX26浓度。     

抗NPM1单克隆抗体的制备

目的 制备并鉴定NPM1单克隆抗体.方法 利用纯化的NPM1融合蛋白作为抗原,通过常规的细胞融合技术制备杂交瘤细胞,用间接ELISA法筛选能出产生抗NPM1单克隆抗体的阳性细胞株,对抗NPM1单克隆抗体的特性进行分析.结果 筛选出1株产生抗NPM1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,产生的抗体为IgGl亚类,效价达1∶720000;纯化后经SDS-PAGE显示两条蛋白条带,纯度达95％以上,相对分子质量约为50000和25000,与单一抗体重链、轻链分子大小相符.免疫组化证实,纯化的2G7抗NPM1单克隆抗体可检测出NPM1在结直肠癌表达,阳性位点为细胞核.结论 制备的抗NPM1单克隆抗体可用于NPM1蛋白功能的研究与临床检测.     

新型肿瘤标志物:Mu-GlcNAc

作者发现了一个新的肿瘤标志物MA153,其化学结构为Mu-GlcNAc（粘蛋白1-N-乙酰氨基葡萄糖）,它可与单克隆抗体Ma695和相关Aptamer（适配体MA153-A）形成Ma695-Mu-GlcNAc-MA153-A式的夹心反应。临床血清学检测表明,Mu-GlcNAc存在于癌症患者血中,以1U/mL为正常界值,Mu-GlcNAc的肿瘤特异度达95%,癌症检出的灵敏度对乳腺癌、胰腺癌、肝癌、肺癌、食管癌、口腔癌、结肠癌、胆管癌、卵巢癌、宫颈癌、子宫癌,分别为80%、74%、68%、70%、75%、50%、60%、55%、70%、64%、60%。本研究资料显示,Mu-GlcNAc是一个新的良好广谱肿瘤标志物。     

一对高亲和力抗人肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体的制备及鉴定

目的 获取抗人肌钙蛋白Ⅰ（cTnI）的单克隆抗体（McAb）.方法 以人cTnI作为抗原,免疫Balb/c小鼠,通过杂交瘤技术制备了抗人cTnI高亲和力、高特异性单克隆抗体.随后采用间接ELISA法测定抗血清效价,用protein G亲和纯化法纯化抗体,抗原竞争ELISA法鉴定抗体亲和力,SDS-PAGE法鉴定纯度,Western blotting鉴定抗cTnI单克隆抗体的特异性,竞争ELISA法分析抗原结合位点.结果 筛选出9株稳定分泌抗cTnI的单抗杂交瘤细胞株,其中A3、A9两株免疫球蛋白亚类均为IgG2a,分泌的抗体纯度高,与CK-MB、cTnT无交叉反应,效价均为：1：1024000,亲和力分别为4.21×10^8mol/L、1.07×10^8mol/L,抗原结合位点不同.结论 成功制备出了一对高亲和力、高特异性抗人cTnI单克隆抗体.     

McAb-RIHA检测日本血吸虫循环抗原

目的观察单克隆抗体反向间接红细胞凝集试验(McAb-RIHA)检测血吸虫循环抗原的敏感性和特异性。方法采用McAb-RIHA双盲法测定正常人与各种类型血吸虫病人血清,同时进行交叉反应与重复性试验。结果McAb-RIHA检测正常人血清,假阳性率为2.17%;对急性、慢性及晚期血吸虫病人阳性率分别为99.39%、84.00%、28.57%,与粪检阳性病人阳性符合率为84.00%。急性血吸虫病人体内循环抗原含量高于慢性血吸虫病人及晚期血吸虫病人,反应滴度的平均几何均数为慢性血吸虫病人的13.3倍,晚期血吸虫病人的36.4倍;而不同感染度的慢性血吸虫病人体内循环抗原的滴度与粪虫卵数无明显关系。结论McAb-RIHA检测日本血吸虫循环抗原有较好的敏感性和特异性