树突细胞与细胞因子诱导的杀伤细胞共培养增强其体内外抗肿瘤活性

目的探讨与树突细胞(DC)共培养能否增强正常人细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)的体内外抗瘤活性.方法分别按照常规方法从正常人外周血单个核细胞诱导DC和CIK细胞,将NB4白血病细胞冻融物(LCL)冲击或未冲击的DC与CIK细胞共培养(LCL-DC+CIK、DC+CIK),以CIK细胞单独培养作为对照.用流式细胞术分析细胞表型,酶联免疫斑点法(ELISPOT)测定分泌IFN-γ的细胞数,51Cr释放实验测定体外细胞毒活性,同时用NB4细胞系建立荷瘤裸鼠模型研究其体内抗肿瘤活性和归巢情况.结果在培养第15天, LCL-DC+CIK与CIK细胞单独培养相比,增殖速率明显提高 [(18.2±2.1)倍vs(11.6±2.3)倍, P<0.05],CD3+CD56+ 表达水平也明显提高 [(51.05±2.63)% vs(30.18±1.45)%, P<0.05],分泌IFN-γ的细胞数量明显增高 [(86.33±5.51)/104细胞 vs(44.61±3.05)/104细胞, P<0.05],同时LCL-DC+CIK对NB4、K562、KG1a的体外细胞毒活性增强.体内实验显示与单独培养CIK细胞相比,LCL-DC+CIK细胞共培养后,可明显抑制接种瘤细胞裸鼠的成瘤率,提高裸鼠的长期无瘤存活率(100% vs 66.7%, P<0.05),以DiI标记的LCL-DC+CIK细胞在接种后7 d内可在脾脏、淋巴结及肿瘤局部被检测到.LCL-DC+CIK与DC+CIK细胞在抗瘤效应上没有明显差异.结论与DC共培养可使CIK细胞获得更高的增殖速率和更强的体内外抗肿瘤活性,可以作为一种临床有效的抗白血病免疫治疗策略.     

异基因骨髓源间充质干细胞移植形成稳定的嵌合体并诱导免疫耐受的研究

目的　探讨器官移植中间充质干细胞诱导免疫耐受的可能性。方法　雌性C57BL/6小鼠致死量照射后 ,移植同基因骨髓细胞和异基因骨髓源间充质干细胞 ,150d后以流式细胞仪检测其骨髓及脾脏的T细胞嵌合状态 ;以H3 TdR混合淋巴细胞反应 (MLR)和刀豆蛋白A(ConA)诱导增殖实验检测细胞移植组小鼠对供者来源细胞和有丝分裂原的反应性 ;以皮肤移植实验观测细胞移植组小鼠对供者来源组织器官移植物的反应性。结果　在细胞移植组小鼠脾脏中检测到供者来源T细胞占受者脾细胞 5 97% ;MLR反应中 ,细胞移植组小鼠的平均刺激指数 (SI)为 1 79,未处理组小鼠的平均SI为 7 2 8;在ConA诱导增殖实验中 ,细胞移植组小鼠的平均SI为 3 1 92 ,未处理组小鼠的平均SI为 3 4 99。细胞移植组小鼠供者来源皮肤移植物存活 >90d ,未处理组平均为 8d。结论　异基因骨髓源间充质干细胞移植后可形成稳定嵌合体 ,并诱导特异性免疫耐受的产生 ,使供者来源的皮肤移植物长期存活     

子宫内膜癌分子分型与肥胖及代谢异常合并症的关系

目的：探讨子宫内膜癌（EC）患者分子分型与其临床特征、肥胖及代谢异常疾病之间的关系。方法：纳入2019年1月至2021年8月在北京大学第三医院住院治疗的188例初治EC患者,比较不同分子分型之间临床特征、体质量指数（BMI）、血脂及代谢异常合并症的差异。结果：p53突变型手术分期晚期比例显著高于p53野生型（P=0.039）,低分化比例显著高于其他3种亚型（P=0.002、P=0.001、P <0.001）,淋巴结转移率显著高于p53野生型（P=0.027）。POLE突变型BMI显著低于其他3种亚型（P=0.043、0.018、0.003）,多发动脉粥样硬化（P=0.041）及脂肪肝（P=0.006）发生率显著低于p53野生型。p53突变型中肥胖比例显著高于POLE突变型（P=0.044）,多发动脉粥样硬化患病率显著高于POLE突变型（P <0.001）、MMR-D型（P=0.004）及p53野生型（P=0.001）。结论：p53突变型患者具有更显著的肥胖及代谢异常的特点,应更重视其体重管理并积极治疗代谢异常合并症。     

人脂肪间充质干细胞来源的外排体促进大鼠创伤性脑损伤后神经功能恢复

目的研究人脂肪间充质干细胞(h AMSCs)来源的外排体对创伤性脑损伤(TBI)的治疗作用及其可能的机制。方法分离健康成人脂肪MSCs,通过超滤法提取外排体。将大鼠分成:假手术组,PBS对照组,MSC治疗组,exosomes治疗组。于TBI建模24 h后,治疗组分别沿损伤边缘区局部注射,PBS 30μL,MSC 2×10~5个细胞/只,exosomes 25μg总蛋白量/只,总体积30μL。在建模前和TBI后1、3、7、10、13、16和30 d测试所有大鼠的m NSS评分和前肢踩空试验。3和7d处死大鼠,提取大鼠脑组织总RNA,实时定量PCR检测大鼠炎性因子TNF-α和IL-1β的表达,30 d处死大鼠,tunel-neun双标免疫荧光检测TBI后神经元凋亡。结果外排体的治疗显著促进TBI后的神经功能的恢复,治疗效果与MSC治疗效果相当,其机制可能是通过抑制大鼠TBI后急性炎性反应,减少神经元凋亡。结论人脂肪间充质干细胞来源的外排体促进脑外伤后神经功能的恢复,这将为临床提供一种新的更安全的TBI治疗手段。     

脂肪MSCs分泌的DKK-1抑制慢性粒细胞白血病细胞K562的增殖

目的 研究间充质干细胞（MSCs）抑制慢性粒细胞白血病细胞K562增殖的分子机制,为临床治疗提供理论依据。方法 利用脂肪来源的MSCs与慢性粒细胞白血病细胞K562共培养,通过中和抗体实验、3H-TdR 掺入法、细胞周期流式分析、RNA干扰和定量PCR等技术,分析K562细胞增殖能力、WNT信号通路的基因表达变化。 结果 与MSCs共培养后 K562的增殖减少了77％（P<0.05）,处于G0/G1期的细胞比例为62.1%±5.8%;而明显高于K562单独培养时的45.2%±6.9%（P<0.05）。当用Transwell隔开MSCs和K562细胞后,上述抑制作用仍然存在。利用中和抗体实验发现MSCs抑制K562增殖是通过分泌DKK-1。将MSCs表达的DKK-1用RNA干扰敲低后,再与K562共培养,可重新增加K562细胞WNT信号通路中β-CATENIN、c－MYC和CYCLIN D2的表达,减弱了对K562增殖的抑制作用。 结论 脂肪来源的MSCs可以通过分泌可溶性分子DKK-1抑制白血病细胞K562的WNT信号通路,将其细胞周期阻滞在G0/G1期,从而抑制其增殖。     

LED光疗在女性生殖系统疾病治疗中的研究进展

发光二极管(LED)光疗作为一种新兴的物理治疗手段,可通过光照起到抑制细菌、真菌、病毒等的生长复制作用,减少炎症、水肿等发挥治疗作用。因其微创、可重复治疗、不易产生耐药性、副反应少等优点,同时与激光光源相比,LED具有环保耐用、高亮度低热量、成本低廉等优势,发展前景广阔,有望成为未来女性生殖系统多种常见疾病治疗的有效方法之一。近年来,通过LED光疗来治疗女性生殖系统疾病在临床及基础研究中越来越受到人们的重视,应用在不断推广,尤其是在女性下生殖道感染、慢性盆腔疼痛、促进伤口愈合等方面。本文将对LED光疗目前在多种临床常见女性生殖系统疾病治疗中的研究进展和应用进行综述,以期为进一步深入临床应用提供理论依据。     

Flk-1＋骨髓间充质干细胞移植上调白细胞介素6水平：是否同时加重了胶原诱导性关节炎小鼠的症状？

背景：间充质干细胞的免疫调节作用是被大家普遍认可的,在以往实验中也对Flk-1＋骨髓间充质干细胞体外抑制T/B淋巴细胞增殖的能力进行了确认。目的：验证Flk-1＋骨髓间充质干细胞对胶原诱导性关节炎小鼠的治疗作用。方法：健康10周龄雄性DBA-1（H-2Kq）小鼠18只,随机分为3组：初次免疫后细胞移植组、加强免疫后细胞移植组、模型对照组,3组小鼠均通过尾皮下注射牛Ⅱ型胶原进行初次免疫,21d后同法进行加强免疫,建立胶原诱导性关节炎模型。密度梯度离心法和贴壁筛选法体外分离DBA-1（H-2Kq）小鼠Flk-1＋骨髓间充质干细胞,初次免疫后细胞移植组小鼠在初次免疫后立即经尾静脉输注Flk-1＋骨髓间充质干细胞（1～2）×106个/只,加强免疫后细胞移植组小鼠在加强免疫时同法输注等量Flk-1＋骨髓间充质干细胞,模型对照组小鼠于初次免疫后0或21d尾静脉输注等量生理盐水。观察初次免疫后和加强免疫后各组小鼠的爪垫增厚情况、临床评分,检测小鼠关节病理学变化及血清因子质量浓度的动态变化。结果与结论：与模型对照组比较,初次免疫后细胞移植组爪垫增厚程度及平均临床疾病得分均无明显差异（P0.05）,均可见明显的滑膜组织损伤和炎症细胞浸润,各血清细胞因子质量浓度基本相似;而加强免疫后细胞移植组爪垫明显增厚（P0.01）,平均临床疾病得分高达3.35分,滑膜损伤严重,毛细血管增生,在初次免疫后28d白细胞介素6血清浓度急剧上升（P0.1）,初次免疫后35d白细胞介素6血清浓度又明显下降（P0.1）。提示在胶原诱导性关节炎小鼠模型中,Flk-1＋骨髓间充质干细胞移植不但未取得预期的治疗效果,还在加强免疫后细胞移植组观察到显著地关节炎症状恶化现象,其可能通过上调白细胞介素6血清浓度加重类风湿关节炎小鼠的行为症状。     

间充质干细胞的免疫调节可塑性及其临床应用策略

间充质干细胞(MSCs)是具有自我更新、多向分化和免疫调节能力的多能干细胞。越来越多的研究证明了MSCs在免疫紊乱相关疾病治疗中的有益作用。然而体内获取或体外培养的MSCs的免疫调节能力都存在异质性，MSCs的免疫调节能力也会受到微环境的调控。本综述概述MSCs的免疫抑制能力和免疫支持能力的机制，介绍最近关于MSCs免疫调节机制的研究及其免疫调节能力可塑性假说，并讨论在细胞生产阶段增强MSCs免疫调节能力的策略，以期为MSCs临床转化研究提供参考。     

芳香烃受体调控人脂肪间充质干细胞的免疫调节功能

目的 探索芳香烃受体(AHR)对人脂肪间充质干细胞(MSCs)免疫调节功能的影响。方法 RT-qPCR和免疫荧光染色法检测炎性细胞因子刺激前后，MSCs中吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)、白细胞介素-4诱导基因1(IL4I1)和芳香烃受体表达水平；将si-Ctrl、si-IDO1、si-IL4I1、si-AHR转染至MSCs,阻断AHR信号通路；将MSCs的条件培养基与巨噬细胞共培养，RT-qPCR和ELISA检测巨噬细胞炎性因子IL-6、IL-1β、TNF-α水平。结果 未经细胞因子刺激的MSCs高表达AHR,几乎不表达IDO和IL4I1蛋白；不同细胞因子刺激后，代谢酶IDO1、IL4I1及AHR表达上调(P<0.05),IFN-γ刺激后IDO1、IL4I1表达上调最为显著(P<0.001),进入细胞核的AHR增多；下调AHR的表达削弱MSCs的免疫抑制作用(P<0.05)。结论 AHR参与调节MSCs的免疫功能，下调AHR可以抑制MSCs的免疫调节作用。