金水宝胶囊生产过程中质量控制方法的建立

目的:完善金水宝胶囊生产过程中的质量控制体系,为该制剂的后续研究与应用提供实验依据。方法:采用高效液相色谱法(HPLC),Ultimate AQ-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),腺苷、鸟苷、尿苷含量测定的色谱条件为流动相甲醇(A)-0.1%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0~14 min,100%~99%B;14~19 min,99%~89%B;19~39 min,89%~85%B),流速0.4 m L·min^-1,柱温30℃,进样量10μL,检测波长260 nm。麦角甾醇含量测定的色谱条件为流动相甲醇-水(98∶2),流速1 m L·min^-1,柱温25℃,进样量10μL,检测波长283 nm。结果:发酵虫草菌粉不同生产阶段样品的指纹图谱中主要色谱峰差异性较小。腺苷、鸟苷、尿苷的线性关系良好(R2均>0.999);三者的加样回收率分别为106.06%,101.25%,105.88%,RSD均<3.0%。于2016-2018年各抽取的20批样品中腺苷、麦角甾醇的含量均符合2015年版《中国药典》的要求,鸟苷、尿苷的质量分别为0.97~1.36,0.67~1.38 mg/粒。结论:市面所售金水宝胶囊质量较为稳定。建立的方法可用于检测金水宝胶囊的质量,且操作简便、稳定可靠,可为发酵虫草菌粉类产品的检测提供参考。     

长期口服磷霉素治疗慢性细菌性前列腺炎安全有效

Karaiskos等进行一项单中心、前瞻性研究,以评估长期服用磷霉素治疗慢性细菌性前列腺炎(CBP)的疗效和耐受性。CBP的诊断为:排尿不适和/或疼痛>3个月;菌尿(≥104 CFU/mL),或“4杯法”培养阳性,即前列腺按摩液或前列腺按摩后尿液(≥尿道或膀胱标本中细菌数10倍以上);尿道或尿液中性传播病原体的聚合酶链反应阴性;磁共振成像或直肠超声检查显示炎症。体外药敏试验提示有效口服抗生素少。     

鸡白痢沙门菌SpiC蛋白的原核表达及其应用

目的进行鸡白痢沙门菌Spi C蛋白原核表达并建立以Spi C蛋白为检测抗原的间接ELISA。方法以鸡白痢沙门菌S06004基因组DNA为模板,PCR扩增384 bp的spi C基因。将spi C基因克隆至原核表达载体p ET30a中,构建重组原核表达质粒p ET30a-spi C,再转化到表达宿主菌E.coli BL21(DE3)中,异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析鉴定,纯化His-Spi C蛋白,建立Spi C蛋白为检测抗原的间接ELISA并检测临床血清样品。结果通过对诱导后重组菌裂解产物进行SDS-PAGE和Western blot分析,重组菌可以表达相对分子质量(Mr)约19 200的可溶性重组蛋白His-Spi C。重组蛋白GST-Spi C免疫无特定病原体鸡,所获得的高免血清能识别重组蛋白His-Spi C,表明体外表达的重组蛋白His-Spi C有良好的免疫反应原性。所建立的以重组蛋白His-Spi C介导的间接ELISA有较好的特异性,能够区分spi C基因缺失型疫苗候选株免疫与野生菌自然感染。结论重组蛋白His-Spi C呈可溶性表达,具有良好的免疫原性,以重组蛋白His-Spi C建立的间接ELISA,可以作为区分感染和免疫动物(DIVA)鸡白痢疫苗免疫的鉴定方法。     

肺部铜绿假单胞菌(PAE)感染患者前后肺角质细胞生长因子(KGF)的变化

目的:探讨患者在肺部铜绿假单胞菌(PAE)感染前后肺角质细胞生长因子(KGF)的变化情况。方法:选取肺炎患者62例为观察对象,对其PAE感染前后肺组织进行检测,观察其KGF水平变化情况。结果:对本组患者进行免疫印迹定量测试后,结果表明,所有患者在PAE感染后,肺组织KGF蛋白表达水平同感染前对比,明显较高,差异存在统计学意义(P<0.05),且随时间推移,患者KGF表达水平呈较明显上升趋势,在72 h后,KGF值达到最高水平。本组患者中PAE感染前,肺组织KGF蛋白含量较为稳定,PAE感染后各时间段,患者肺组织KGF含量均明显高于感染前,差异存在统计学意义(P<0.05)。结论:在PAE感染后,患者肺组织KGF水平会出现明显变化,随病程发展而增长。对KGF水平进行严密监测,同时采取辅助干预措施,能有效改善症状,促进患者痊愈。     

铜绿假单胞菌注射液对肺癌A549细胞自噬及PI3K/Akt通路的影响

目的探究铜绿假单胞菌注射液(PA-MSHA)对肺癌A549细胞自噬及磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路的影响。方法体外培养人肺癌A549细胞,随机分为空白对照组、LY294002组(加入20μmol/L LY294002),PA-MSHA干预组(加入0.5×10^9/mL、1.0×10^9/mL、2.0×10^9/mL PA-MSHA)。干预培养48 h后,MTT法检测各组细胞活性,平板克隆形成实验检测各组细胞增殖能力,透射电子显微镜观察各组细胞自噬情况,Western blot检测各组细胞中自噬相关蛋白p62、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ及PI3K/Akt通路相关蛋白PI3K、Akt、p-PI3K、p-Akt表达。结果与空白对照组相比,LY294002组、0.5×10^9/mL、1.0×10^9/mL、2.0×10^9/mL PA-MSHA组细胞增殖抑制率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达显著升高(P<0.05),自噬体个数增加,细胞克隆形成率、p62、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白表达显著降低(P<0.05);与LY294002组相比,0.5×10^9/mL、1.0×10^9/mL PA-MSHA组细胞增殖抑制率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达显著降低(P<0.05),自噬体个数减少,细胞克隆形成率、p62、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白表达显著升高(P<0.05);与0.5×10^9/mL、1.0×10^9/mL PA-MSHA组相比,2.0×10^9/mL PA-MSHA组细胞增殖抑制率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达显著升高(P<0.05),自噬体个数增加,细胞克隆形成率、p62、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论PA-MSHA可能通过调控PI3K/Akt信号通路,促进肺癌A549细胞自噬,抑制细胞增殖。     

醋酸吲哚实验在卡他莫拉菌快速鉴定中的临床应用

目的通过对醋酸吲哚酚(ACIND)实验与经典生化鉴定结果的一致性分析,评价ACIND的临床应用价值。方法选取某院分离的273株卡他莫拉菌(MC)疑似菌株为实验菌株,同时应用ACIND与VITEK-2compact进行鉴定,对鉴定结果进行统计学分析,结合药物敏感性数据,评价其快速检测结果对临床用药的参考价值。结果 273株疑似菌株经生化鉴定为257株MC及16株非MC,257株MC经ACIND鉴定有254株显阳性,而16株非MC中也有6株显阳性或弱阳性。ACIND对MC的灵敏度与特异度分别为98.83%(254/257)与62.50%(10/16),阳性预测值与阴性预测值分别为96.15%(254/260)及76.92%(10/13),Kappa值为0.672。该菌β-内酰胺酶阳性率为99.22%(255/257),对复方磺胺甲噁唑、头孢克诺及头孢呋辛的不敏感率均在20%～30%,对其他抗菌药物不敏感率低于5%。结论 ACIND鉴定结果与经典生化鉴定结果具有较好一致性,结合该地区MC耐药监测数据对临床用药具有较好的指导作用及临床应用前景。     

粪菌移植替代多巴胺能药物治疗帕金森病案例分析

目的观察粪菌移植替代多巴胺能药物治疗帕金森病(PD)的疗效,探讨潜在的机制。方法为1例因服用多巴胺能药物出现幻觉而拒绝服药的PD患者行粪菌移植治疗,应用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)、PD问卷(PDQ39)、匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)、Bristol便秘评分、统一PD评定量表Ⅲ(UPDRSⅢ量表)对患者移植治疗前及移植治疗后4周、8周、12周的相关症状进行评分,同时对患者移植治疗前和移植治疗后4周、12周的粪菌进行16 s rRNA高通量基因测序分析菌群。结果与移植治疗前相比,移植治疗后HAMD、HAMA、PDQ39、PSQI、Bristol便秘评分、UPDRSⅢ量表评分均明显降低,粪菌16 s rRNA高通量测序显示粪菌移植治疗后拟杆菌属丰度下降,而瘤胃、布劳特、普雷沃等菌属丰度增高。结论粪菌移植对PD患者的非运动症状和运动症状均显示出明显效果,其机理可能与重建正常功能的肠道菌群密切相关。     

双歧杆菌三联活菌胶囊联合瑞舒伐他汀治疗老年血脂异常的疗效分析

目的探究双歧杆菌三联活菌胶囊联合瑞舒伐他汀治疗老年血脂异常的疗效。方法共纳入上海市金山区众仁老年护理医院诊治的血脂异常患者104例,根据随机数表法分为观察组和对照组,两组均为52例。对照组患者给予瑞舒伐他汀治疗,观察组患者在对照组的基础上给予双歧杆菌三联活菌胶囊治疗。两组患者治疗时间均为8周。比较两组患者治疗前后血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等血脂指标。观察两组患者临床疗效及不良反应发生率。结果治疗8周后,两组患者TC、TG、LDL-C水平均显著低于治疗前(观察组:t=9. 21,4. 01,3. 33;对照组t=8. 07,7. 58,9. 12; P 0. 05),HDL-C水平显著高于治疗前(t=9. 01,8. 90; P 0. 05),而观察组患者TC、TG、LDL-C水平均显著低于对照组(t=9. 25,9. 02,8. 90,P 0. 05),HDL-C水平显著高于对照组(t=9. 76,P 0. 05)。观察组总有效率(96. 08%)较对照组(78. 85%)高,差异具有统计学意义(χ2=5. 28,P=0. 02);两组双歧杆菌和乳酸杆菌、粪肠球菌数量较前明显上升(观察组:t=2. 64,7. 58;对照组:t=2. 30,2. 02; P 0. 05),大肠埃希菌数量明显下降(观察组:t=2. 43;对照组t=1. 71; P 0. 05),且观察组变化幅度比对照组更明显(t=2. 26,2. 87,2. 26; P 0. 05)。两组不良反应情况的比较差异无统计学意义(P 0. 05)。结论双歧杆菌三联活菌胶囊联合瑞舒伐他汀治疗血脂异常的疗效显著,同时可减少相关副作用。