口服布拉酵母菌对极低出生体质量儿的临床意义

目的 研究布拉酵母菌散剂对极低出生体质量儿的临床意义.方法 198例极低出生体质量儿中未服布拉酵母菌散剂早产儿93例（对照组）,口服布拉酵母菌散剂早产儿105例（观察组）,回顾性对照分析两组患儿的一般资料,观察两组患儿大便频次或腹泻（伴中重度脱水）情况、新生儿坏死性小肠结肠炎（NEC）发生率、院内感染（败血症、肺部感染）发生率、真菌感染率、静脉营养时间、总住院时间.结果 两组患儿一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05）.观察组和对照组患儿大便频次、静脉营养时间、住院时间比较差异有统计学意义[（1.8±0.4）次/d比（3.4±0.5）次/d、（30.21 ±3.43）d比（40.47±4.35）d、（33.5±6.8）d比（45.4±9.3）d]（P＜0.05）;两组新生儿腹泻、NEC、败血症或脓毒血症发生率比较差异有统计学意义[14.3％（15/105）比25.8％（24/93）、11.4％（12/105）比19.4％（18/93）、19.0％（20/105）比29.0％（27/93）] （P＜ 0.05）;两组肺炎发生率和真菌感染率比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 口服布拉酵母菌散剂可以减少极低出生体质量儿腹泻发生率,减少NEC发生率,以及院内感染发生率（主要是败血症）,可以促进胃肠喂养,缩短住院时间,同时亦不会增加真菌感染率,有临床应用价值.     

经鼻给予胰岛素样生长因子1对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的影响

目的:胰岛素样生长因子1具有非选择性神经营养作用,选择经鼻外源性中枢给药方式,观察其对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用及其机制。方法:实验于2000-01/03在南京医科大学儿科研究所实验室完成。取28只7日龄新生大鼠随机分为对照组,给药组和假手术组3组。给药组于缺氧后经鼻腔滴入胰岛素样生长因子12.5μg(溶于生理盐水0.1mL中);对照组于缺氧缺血性脑损伤后给予等量的生理盐水经鼻腔滴入;假手术组仅分离颈总动脉,不结扎不缺氧。24h后处死动物取脑组织,应用组织学方法检查损伤部位变性神经细胞计数,应用免疫组化法检查脑组织半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的表达,评估胰岛素样生长因子1的脑保护作用。结果:脑组织半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白表达水平:假手术组个别皮质区域有少量表达。与对照组(7.27±0.48)相比,用药组半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(2.03±0.64)表达减少(P<0.01),神经细胞总数增加(P<0.01),变性/坏死神经细胞数减少(P<0.01)。结论:鼻腔滴入胰岛素样生长因子1可能通过降低缺氧缺血性脑损伤脑组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达,从而对缺氧缺血性脑损伤脑组织损伤产生保护作用。     

地塞米松预处理对缺氧缺血性新生大鼠脑组织单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

缺氧缺血前地塞米松预处理对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤具有保护作用。而发育脑组织中单核细胞趋化蛋白 1(ＭＣＰ 1)是代表小胶质细胞应答脑缺氧缺血性损伤的一个功能性重要的分子信号[1] 。本实验通过研究地塞米松预处理对缺氧缺血性新生大鼠脑组织中ＭＣＰ 1蛋白表达的影响 ,探讨地塞米松预处理对缺氧缺血性脑损伤保护作用的机制。1　材料和方法1 1　材料48只 7日龄ＳＤ大鼠 ,性别不拘 ,体重 0 .0 10～ 0 .0 15ｋｇ,购自江苏省实验动物中心。一抗为羊抗大鼠ＭＣＰ 1多克隆抗体 (购自ＳａｎｔａＣｒｕｚＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ,Ｉｎｃ)…     

间充质干细胞与肺发育及肺损伤

肺组织的干细胞目前还不确定,肺组织损伤后上皮发育和再生存在多种模式,闻充质干细胞是具有多向分化潜能的一类多能干细胞,可在体外进行分离、培养并扩增,全身应用后能在肺组织中定植,在肺组织损伤修复中发挥重要作用,但机制还有待进一步探讨.     

间充质干细胞与肺发育及肺损伤

肺组织的干细胞目前还不确定,肺组织损伤后上皮发育和再生存在多种模式,闻充质干细胞是具有多向分化潜能的一类多能干细胞,可在体外进行分离、培养并扩增,全身应用后能在肺组织中定植,在肺组织损伤修复中发挥重要作用,但机制还有待进一步探讨.     

隐丹参酮通过调节TGF⁃β/Smad通路改善高氧诱导肺损伤的纤维化过程

目的：探讨隐丹参酮（cryptotanshinone,CTS）对高氧诱导的支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia,BPD）大鼠肺纤维化的影响及作用机制。方法：体内实验：将50只新生雄性SD大鼠随机分为空气组、高氧组、CTS低剂量组（7.5 mg/kg）、CTS 中剂量组（15.0 mg/kg）及CTS高剂量组（30.0 mg/kg）。高氧组及CTS干预组大鼠饲养于氧浓度95％的氧箱中,空气组饲养于空气中。CTS干预组大鼠生后每日给予CTS腹腔注射,空气组及高氧组每日腹腔注射同等体积DMSO。7 d后安乐死全部大鼠后取肺组织用于后续实验。应用HE染色观察肺泡病理改变;通过Masson染色观察肺组织纤维化程度;RT-qPCR法检测转化生长因子β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）及α平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）的mRNA 水平;Western blot检测细胞信号转导分子（small mother against decapentaplegic,Smad）2/3、p-Smad2/3的表达。体外实验：选用人胚肺成纤维细胞（human fetal lung fibroblast-1,HFL-1）,按照培养条件分为空气组、高氧组及CTS干预组,空气组常规条件下培养,而高氧及干预组置于95％O₂恒温培养箱中培养24 h,干预组加入CTS 10 μmol/L。CCK-8实验检测细胞活力;Western blot检测TGF-β1、 α-SMA、p-Smad2/3、Smad2/3蛋白表达变化。结果：与对照组相比,高氧组大鼠肺泡形态紊乱、间隔增宽,RAC值下降,纤维化评分上升（P<0.05）;TGF-β1及α-SMA的mRNA水平升高（P<0.05）;p-Smad2/3表达升高（P<0.05）;不同剂量的CTS给药后可改善上述指标（P<0.05）;同时,CTS还可以降低高氧后HFL-1细胞的TGF-β1、α-SMA、p-Smad2/3、Smad2/3表达（P<0.05）。结论：CTS 可通过TGF-β/Smad通路改善高氧诱导肺损伤的纤维化过程。     

大剂量地塞米松降低缺氧缺血性新生大鼠脑MCP-1蛋白表达

目的　研究新生大鼠缺氧缺血性脑病 (HIE)时脑组织单核细胞趋化蛋白 - 1(MCP - 1)的表达及地塞米松对其影响。方法　 2 5只新生大鼠分为 3组 :HIE模型对照组 (对照组 ) ,大剂量地塞米松治疗组 (大剂量组 ) ,小剂量地塞米松治疗组 (小剂量组 ) ;于造模后腹腔内分别注射生理盐水 10ml/kg ,地塞米松 10mg/kg及地塞米松 0 .5mg/kg ;2 4h后处死后取脑组织 ,免疫组化法检查脑组织MCP - 1蛋白的表达 ,光镜检查脑病理改变情况。结果　对照组、大剂量组、小剂量组的MCP - 1蛋白 ,神经细胞总数及变性 /坏死神经细胞数 ,分别为 7.98±1.37% ,0 .97± 0 .42 % ,7.2 5± 2 .45 % ;15 8.0 7± 14.48个 / 6HP ,2 0 3.2 5± 10 .2 7个 / 6HP ,15 5 .11± 16 .6 1个 / 6HP ,2 2 .86± 3.13个 / 6HP ,17.75± 3.45个 / 6HP ,2 3.89± 4.18个 / 6HP。与对照组相比 ,大剂量组MCP - 1蛋白表达减少 (P <0 .0 1) ,神经细胞总数增加 (P <0 .0 5 )及变性 /坏死神经细胞数减少 (P <0 .0 1) ,而小剂量组改变不明显(P >0 .0 5 )。结论　大剂量地塞米松可能通过降低HIE脑组织中MCP - 1蛋白表达对HIE脑组织损伤产生保护作用。     

极低出生体重儿支气管肺发育不良血清敏感标志物的研究

目的:通过对极低出生体重(very low birth weight,VLBW)患儿血清的可溶性晚期糖基化终产物受体(soluble receptor for advanced glycation end products,sRAGE)?内源性分泌型RAGE(endogenous secretory RAGE,esRAGE)?肺表面活性蛋白D(surfactant protein D,SP-D)?Clara细胞蛋白16(clara cell 16 kD protein,CC-16)等血清标志物水平与支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)的相关性研究,以期找到早期评估BPD发生可能性及严重程度的敏感指标?方法:选取极低出生体重儿60例,在生后48 h内留取血清,ELISA法测定sRAGE?esRAGE?SP-D?CC-16等血清标志物水平,同时记录患儿BPD发生情况及程度,统计学分析血清学指标与BPD发生及程度的相关性?结果:①与非BPD组患儿相比,BPD组患儿血清sRAGE?esRAGE水平明显增高(P均 < 0.01);而SP-D?CC-16水平差异无统计学意义(P均 > 0.05);②BPD患儿中,sRAGE?esRAGE在轻度?中度及重度组间差异也有统计学意义;③血清sRAGE?esRAGE水平与患儿胎龄没有相关性?结论:血清sRAGE?esRAGE可以作为VLBW患儿发生BPD及严重程度的一个早期评估指标?     

糖皮质激素对高氧诱导新生大鼠肺组织RAGE-NF-κB通路的影响

目的探讨RAGE-NF-κB信号通路在新生大鼠高氧肺损伤过程中的变化,以及糖皮质激素对其的影响。方法 24只新生大鼠随机分为空气对照组、高氧模型组和激素干预组。模型组新生大鼠于生后即暴露于95%氧气浓度环境中1周,空气对照组大鼠生后仅暴露于同室内空气中饲养7 d,激素干预组于造模后行尾静脉注射地塞米松(1 mg/kg),隔天1次,共3次。日龄13 d时处死全部大鼠,RT-PCR检测各组肺组织RAGE m RNA及NF-κB m RNA的表达;Western blot检测RAGE及NF-κB蛋白水平;ELISA法检测血清及肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α和s RAGE含量;苏木精-伊红染色后行肺组织病理学评估。结果与对照组和激素干预组相比,高氧模型组肺组织RAGE、NF-κB的m RNA和蛋白表达水平均明显增高(均P0.05),血清中s RAGE含量明显升高(P0.01),BALF中s RAGE含量下降(P0.01);与对照组相比,激素干预组肺组织RAGE、NF-κB的m RNA和蛋白表达水平明显升高(P0.05),血清中s RAGE含量明显升高(P0.05),而BALF中s RAGE含量明显下降(P0.05)。结论 RAGE-NF-κB通路在高氧诱导的新生大鼠肺损伤中活化增强,糖皮质激素可能通过下调RAGE-NF-κB信号通路对高氧肺损伤发挥保护作用。     

间充质干细胞对窒息新生大鼠合并多脏器损伤的影响

目的 研究大鼠骨髓来源的间充质干细胞(MSCs)对窒息新生大鼠引致的多脏器损伤的影响及相关机制.方法 采用贴壁选择法分离、培养、扩增大鼠骨髓来源MSCs,以PBS按要求稀释供注射用;3日龄清洁级SD新生大鼠32只,随机分为窒息+ MSCs组(A组)、空气+MSCs(B组)、窒息对照组(C组)、正常对照组(D组)四组;A、C组均先将大鼠置于密封瓶中密闭30 min,再予氧罩吸氧2 h[氧浓度(60±5)%];B、D组同时置于密封瓶中,但瓶口不密闭,也不予吸氧.模型结束后,A、B组每只大鼠腹腔注射5×104的MSCs,而C、D组仅注射相同容积的PBS,72 h后(6日龄)处死全部动物,组织病理学进行心、脑、肺组织病理评分;ELASA法检测心、脑、肺组织匀浆TNF-α含量及血清TNF-α、CK-MB、cTnT、S-100b、NSE水平.结果 (1)心脏、脑、肺组织四组病理学评分分别是1.79±0.22,0.34±0.13,2.33±0.27,0.34±0.08;3.06±0.33,1.29±0.14,4.30±0.47,1.15±0.10;2.31±0.56,0.46±0.20,3.06±0.33,0.44±0.18,差异有统计学意义(P均=0.000).(2)四组间血清TNF-α、CK-MB、cTnT、S-100b、NSE水平差异存在统计学意义(F=32.19,P=0.000;F=39.14,P=0.000;F=242.40,P=0.000;F=66.66,P=0.000;F=78.66,P=0.000).(3)以上各指标结果在A、C组均明显高于D组(均P<0.05),C组高于A组(P<0.05).(4)血清TNF-α水平与细胞因子及酶学改变呈正相关.组织匀浆TNF-α水平与相应组织病理评分也存在正相关(P均<0.05).结论 (1)新生大鼠窒息模型合并有多脏器损伤.(2)MSC对窒息新生大鼠多脏器损伤具有保护作用,可能与抑制损伤部位的炎症反应有关.