阿特拉津对青春期大鼠黑质区多巴胺能神经元的损伤作用

目的：探讨阿特拉津对青春期大鼠黑质区多巴胺能神经元的损伤作用。方法：将4周龄的Wistar雄性大鼠40只随机分为4组,分别为对照组（1%甲基纤维素）、阿特拉津低（50 mg/kg）、中（100 mg/kg）和高（200 mg/kg）剂量组,每组10只,连续灌胃45 d后处死。收集中脑黑质部分,采用免疫组织化学法（SP法）检测神经元细胞中酪氨酸羟化酶（TH）的变化,并采用实时定量PCR法（qPCR）和Western blot检测多巴胺能神经元损伤相关基因mRNA和蛋白的表达情况。结果：免疫组化结果显示,200 mg/kg ATR组中TH阳性细胞数较对照组显著减少,差异具有统计学意义（P < 0.01）。qPCR结果显示,与对照组相比,100和200 mg/kg ATR染毒组TH mRNA和Bcl-2 mRNA的表达量显著降低;200 mg/kg ATR组p53 mRNA和Caspase-9 mRNA的表达量显著增加,差异具有统计学意义（P < 0.05）。Western blot结果显示,与对照组相比,100和200 mg/kg ATR染毒组TH和Bcl-2的蛋白表达量显著降低;100和200 mg/kgATR组p53蛋白表达量显著增加;50、100和200 mg/kg ATR组Caspase-9蛋白表达量均显著增加,差异均具有统计学意义（P均 < 0.05）。结论：阿特拉津可以影响大鼠黑质区多巴胺能神经元损伤相关基因mRNA和蛋白的表达。     

PBL教学法在毒理学基础教学中的应用

PBL教学法是以问题为导向的教学方法,可以培养学生的学习能力、创新能力和实践能力.毒理学基础是预防医学领域以实践为基础的基础课程,将PBL教学法应用到毒理学基础课程的教学实践中,可以克服传统教学方式的一些缺点,既增加了学生学习兴趣,又培养了学生的综合能力,取得了理想的效果.     

铝的神经毒性：改变神经细胞钙稳态

铝是一种具有神经毒性的金属，现在发现它与神经退行性老年性疾病有关。本研究主要目的探讨铝对神经毒性作用机制。采用动物实验方法，对实验大鼠进行经口染毒，判定铝染毒后大鼠大脑皮层细胞内钙浓度的改变，以及与钙稳态有关的基因和蛋白表达情况。结果显示铝染毒后大鼠大脑皮层内钙浓度增加，其机制可能是由于下调Cam蛋白表达，上调 Ryr2,L-Ca2+α1c和Na+/Ca2+ 交换体基因的表达而发挥神经毒性作用。所以可以认为铝可以通过改变与钙稳态有关的基因和蛋白表达，是神经细胞内钙浓度增加而发挥神经毒性作用。     

大豆异黄酮对更年期动物模型的安全性研究

妇女更年期症状主要是由体内雌激素水平下降造成的,目前已成为危害妇女健康的严重问题.大豆异黄酮可以补充体内雌激素不足,改善更年期症状.雌性去势大鼠是采用人工的方法切除双侧卵巢,导致卵巢功能丧失     

铝对大鼠海马细胞内钙水平和钙通道蛋白基因表达的影响

Objective To dynamically investigate the effects of aluminum on the concentration of free intracellular Ca2+([Ca2+]i) and the expression of calcium channels in the hippocampus of rats. Methods Healthy 64 Wistar rats were taken as the experimental objects. And these rats were randomly divided into 16 groups according to their weights, and were instilled with AlCl3 at 0(control),37.3,74.7 and 248.7 mg/kg respectively. The experimental time exposed to AlCl3 was 45,75,120 d, among which the rats were given AlCl3 for 120 d fed normally for 30 d. The hippoeampus were segregated on day 45,75,120 and 150 d and the[Ca2+]i of hippocampus of rats were detected by fluorospectrophotometer. The expression of Ryanodine receptor 2 (RyR2) mRNA and α1C ubunit of L-type calcium ehannels(L-Ca2+α1C) mRNA were detected by RT-PCR analysis. Results [Ca2+]i was increased by AlCl3 in a dose-and time-dependant manner(F=23.136 and 19.089, P<0.01). There was a synergistic effect between the dose and time in [Ca2+]i (F=2.270, P<0.05). In time of 120,150 days, the [Ca2+]i of rats hippocampus in 37.3[(299.3±48.7), (342.7±35.3)nmol/L], 74.7[(391.2±47.9), (408.1±42.8)nmol/L] and 248.7 mg/kg group[(397.9±55.8), (405.2±22.7)nmol/L] significantly increased compared with control group [(195.1±29.9), (209.1±30.6)nmol/L; P<0.01]. The expression of RyR2 mRNA and L-Ca2+α1C mRNA were increased by AlCl3(F=23.301 and 60.812, P<0.01). The experimental time could lower the expression of L-Ca2+ α1C mRNA (F=6.088, P<0.01), but had no influences on the expression of RyR2 mR NA (F=1.361, P>0.05). There was interaction between the dose of AlCl3 and the time in the expression of L-Ca2+α1C mRNA (F=5.876,P< 0.01). On day 75,120 and 150 of the experiment, the expression of L-Ca2+α1C mRNA in rat hippocampus of 74.7 (1.03±0.16,1.18±0.18,0.92±0.11) and 248.7 mg/kg group(1.89±0.26, 1.25±0.10, 1.07±0.14) also increased compared with control group(0.63±0.09,0.78±0.16,0.69±0.11; P<0.05 or <0.01). On day 45,75, 120 and 150 of the experiment, the expression of RyR2 mRNA in 74.7(0.49±0.06,0.51±0.07,0.57±0.11, 0.47±0.11), 248.7(0.47±0.03,0.52±0.09, 0.70±0.10, 0.78±0.09)mg/kg AlCl3 groups was highly increased compared with control group (0.24±0.07, 0.32±0.04, 0.30±0.06, 0.27±0.06; P<0.05 or<0.01). Conclusion Al increases [Ca2+]i by increasing the expression of the RyR2 mRNA and L-Ca2+α1C mRNA, thus exerts an irreversible neuronal toxicity.     

慢性氯化铝染毒对大鼠大脑皮层内钙稳态影响

目的研究铝对大鼠大脑皮层细胞内游离钙([Ca2 ]i)质量浓度的影响,探讨铝的神经毒性的机制。方法应用248.7、74.7和37.3 mg/kg AlCl3对Wistar大鼠经口灌胃染毒,分别在染毒45、75和120 d和染毒结束后30 d处死大鼠,取脑分离大脑皮层。将荧光染料Fura-2/AM与皮层细胞一起孵育,应用荧光分光光度计测定[Ca2 ]I质量浓度。应用Western Blot方法测定各组大鼠脑皮层中钙调蛋白(CaM)和钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)表达情况。结果在染毒45、75和120 d时,74.7 mg/kg剂量组大鼠[Ca2 ]i质量浓度为(273.8±91.2)(、308.0±96.9)和(453.0±90.5)nmol/L,均显著高于对照组(P<0.05);染毒120 d时,高剂量组大鼠大脑皮层[Ca2 ]i质量浓度为(445.5±68.8)nmol/L,显著高于对照组(P<0.01);染毒结束后30 d,各染毒组大鼠大脑皮层[Ca2 ]i质量浓度高于对照组大鼠,但差异无显著性(P>0.05)。染毒457、5和120 d时,各染毒组大鼠大脑皮层中CaM表达与对照组相比均减少。各染毒组大鼠大脑皮层中CaMKⅡ表达与对照组相比,在不同染毒时期内均有不同程度上升。结论AlCl3可以增加皮层神经细胞内[Ca2 ]i质量浓度,同时引起CaM表达减少和CaMKⅡ表达增加,可见铝可使神经细胞内钙稳态失调而发挥神经毒作用。     

115. 共轭亚油酸对正常动物细胞和肿瘤细胞间通讯传递的影响

细胞间隙连接通讯(gap junctional intercellular communication，GJIC）对细胞的正常增殖分化和代谢功能以及组织自身稳定等起着重要调节作用。而肿瘤组织和肿瘤细胞间的GJIC表达减弱或消失。本文目的：采用c9，t11-CLA来探讨其对人体肿瘤细胞（SGC-7901细胞和MCF-7细胞）GJIC的影响以及在促癌物（TPA）存在下，对CHL细胞GJIC的影响。方法：采用划痕标记染料示踪技术（SLDT）； c9，t11-CLA剂量为25 μmol／L， 50 μmol／1， 100 μmol／1和200 μmol／L，阴性对照为96％乙醇（0．1％v／v）。结果：①荧光染料荧光黄（luciffer yellow，LY)划痕标记SGC-7901细胞和MCF-7细胞3 min后，在阴性对照组中，LY黄色荧光仅分布在伤沿细胞列内，说明SGC-7901细胞无间隙通讯功能。当用c9，t11-CLA作用SGC-7901细胞和MCF-7细胞24 h和48 h时，可见（24 h 100 μmol／L的MCF-7细胞）24 h 200 μmol／L和48 h 100 μmol／L，200 μmol／L剂量组的肿瘤细胞有一定的细胞间隙通讯功能，可见LY沿伤沿列传向邻近的细胞；②LY划痕标记CHL细胞3 min后，在阴性对照组中，LY黄色荧光分布在伤沿细胞列和邻近的2～3列细胞内，表示CHL细胞有间隙通讯功能，而单独使用TPA剂量组，LY仅分布伤沿细胞内，表示CHL细胞间隙通讯功能被完全阻滞。在TPA存在时，c9，t11-CLA作用CHL细胞24 h和48 h时，各个剂量组不同程度地恢复CHL细胞间隙通讯功能，当CLA剂量为200 μmol／L 24 h时，LY荧光染料已从伤沿传递至2列细胞，48 h时，细胞间隙通讯功能基本上与阴性对照组相近。结论：c9，t11-CLA可提高SGC-7901细胞和MCF-7细胞的GJIC的功能，并且不同程度的拮抗TPA对CHL细胞GJIC的抑制效应。     

大豆异黄酮对阿特拉津损伤SH-SY5Y细胞的保护作用及其机制

目的：比较大豆异黄酮、槲皮素、茶多酚、姜黄素和白藜芦醇5种植物化合物对阿特拉津（ATR）损伤神经元的保护作用及分子机制。方法：体外培养SH-SY5Y细胞,分别加入浓度为5、10、20、50、100 μmol/L的5种植物化合物,24 h后,加入250 μmol/L ATR,继续培养24 h后,CCK-8法检测细胞活力,Annexin V-FTTC/PI双染检测细胞凋亡情况,DCFH-DA探针检测活性氧（ROS）水平,Western blot检测酪氨酸氢化酶（TH）蛋白表达量,并用SPSSS 20.0进行统计学分析。结果：5种植物化合物在低剂量范围内抗ATR损伤效果显著,剂量分别为大豆异黄酮5 μmol/L、白藜芦醇5 μmol/L、槲皮素50 μmol/L、姜黄素5 μmol/L、茶多酚20 μmol/L,与其他4种植物化合物相比,大豆异黄酮抗ATR损伤SH-SY5Y细胞效果显著,尤其在5 μmol/L,可显著降低ROS水平,增加TH蛋白的表达（P < 0.05）。结论：大豆异黄酮可能通过降低SH-SY5Y细胞内ROS水平,增加TH蛋白的表达,增加细胞活力,抑制细胞凋亡。     

冷烫精的致突变效应

冷烫精作为简便的美发用品深受人们的欢迎,但对其致突变性研究甚少。我们采用细胞遗传损伤试验对××牌冷烫精进行了致突变性检测,以期为其安全生产和使用提供科学依据。 方法与结果 被检样品为哈尔滨市××化妆品厂生产,无批号,失效日期为1989年12月17日。该冷烫精为淡玫瑰红色透明水剂,有明显臭     

细胞间隙连接通讯与肿瘤关系的研究进展

细胞间隙连接通讯 (ｇａｐｊｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｎｔｅｒｃｅｌｌｕｌａｒｃｏｍ ｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ ,ＧＪＩＣ)是细胞间一种最普遍的通讯方式 ,传递生长抑制和 (或 )增殖信号 ,在调节细胞的生长、分化及凋亡中起重要作用。肿瘤是一种增殖失控和分化紊乱的疾病 ,自从发现肿瘤细胞间的电偶联丧失以来 ,许多学者相继发现肿瘤和转化细胞普遍存在细胞间隙连接通讯缺陷、间隙连接蛋白基因表达异常的现象 ,说明ＧＪＩＣ与肿瘤的发生和发展过程有密切关系。1　细胞间隙连接通讯细胞间隙连接通讯的结构基础是间隙连接 (ｇａｐｊｕｎｃｔｉｏｎ …