氨茶碱对大鼠气道平滑肌细胞分泌基质金属蛋白酶的影响

目的: 探讨氨茶碱对体外培养的大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)分泌基质金属蛋白酶(MMPs)的影响及其与ASMC增殖抑制的关系 .方法: 分离大鼠气道平滑肌细胞,在含有100 mL/L胎牛血清的DMEM中培养,第4～6代细胞用于实验,细胞用不同浓度氨茶碱(0,50,100,200 mg/L)诱导培养12～72 h;采用细胞计数法观察并比较不同浓度氨茶碱对培养细胞的增殖抑制作用; Western blot和明胶酶谱法检测细胞MMP2,MMP9的活性及表达 . 结果: ① 100和200 mg/L浓度氨茶碱对体外培养大鼠ASMC增生较对照组有明显的抑制作用(P <0.05);②当氨茶碱浓度＞50 mg/L时,Western blot法检测到MMP2和MMP9表达显著降低(P <0.05),且呈剂量依赖效应;③明胶酶谱也显示,浓度＞50 mg/L的氨茶碱作用48 h后,明胶酶活性较对照组显著降低,也呈剂量依赖效应 .结论: 氨茶碱通过剂量依赖效应抑制大鼠ASMC分泌MMP2和MMP9,从而阻止气道平滑肌细胞增生和气道重塑.     

原癌基因表达与哮喘气道炎症

目的:观察原癌基因表达与气道炎症细胞浸润的关系。方法:卵蛋白致敏豚鼠,复制哮喘模型。Dot-blot\,Northern-blot分子杂交及免疫组织化学技术观察哮喘发作前、后豚鼠气道上皮及肺组织中c-fos\,c-myc\,c-jun和c-sis的表达及其与炎症细胞浸润的关系。结果:正常豚鼠气道及肺组织中c-fos\,c-mycmRNA无或很少表达,极少炎症细胞浸润。哮喘发作后,豚鼠气道上皮及肺组织c-fos\,c-mycmRNA表达明显增加。免疫组织化学研究显示Fos、Myc、Jun及Sis在正常豚鼠气道及肺组织低水平表达,哮喘发作后即刻,4种原癌基因表达产物明显增加,气道内有少量淋巴细胞、嗜酸性粒细胞及中性粒细胞浸润;12-24h,上述细胞浸润加重,粘膜下层及粘膜上皮内以中性粒细胞和嗜酸性粒细胞浸润为主。结论:原癌基因表达与气道炎症在哮喘发病中有密切关系。     

组胺对家兔气道平滑肌细胞增生的影响

支气管哮喘是以气道高反应性（ａｉｒｗａｙｈｙｐｅｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓ，ＡＨＲ）和可逆性气道狭窄为表现的气道慢性炎症性疾病，气道平滑肌增厚是产生气道阻塞的重要原因，与气道高反应性的发生密切相关。许多炎症介质如５－羟色胺（５－ｈｙｄｒｏｘｙｔｒｙ...     

氨基胍对内毒素诱发的兔急性肺损伤血清丙二醛的影响

目的：观察氨基胍（AG）对内毒素（ET）诱发的兔急性肺损伤（ALI）血清丙二醛（MDA）水平的影响及其与血清一氧化氮（NO）代谢产物NO2^-/NO3^-的关系。方法：24只健康成年兔被均分为生理盐水组、ET组、AG组和ET AG组，ET AG组先静注ET复制ALI模型。再静滴25mg/kgAG，共维持3小时，观察不同时间点血清NO2^-/NO3^-及MDA水平。实验结束后留取肺标本，观察病理损害情况。结果：ET组NO2^-/NO3^-及MDA明显上升，持续静滴AG后NO2^-/NO3^-及MDA明显降低；组织病理观察表明ET AG组兔肺内炎症细胞渗出较少，肺水肿较ET组减轻，结论：AG可降低血清NO2^-/NO3^-及MDA水平，减轻内毒素诱发的兔ALI。     

呼吸道合胞病毒感染导致豚鼠气道反应性增高及M2受体作用的研究

目的：通过电刺激迷走神经，检测呼吸道合胞病毒(RSV)感染急性期豚鼠气道反应性的变化及其影响机制，探讨RSV感染与哮喘发病之间的关系。方法:RSV感染豚鼠，第6 d电刺激迷走神经法测定气道反应性，二道生理记录仪记录并比较气道内压力（IP mmH2O）。给予选择性M2受体激动剂匹罗卡品，检测IP的变化，判断M2受体功能是否障碍。结果:未刺激迷走神经时，感染组和对照组豚鼠的IP分别为(11.08±1.02)mmH2O、(11.75±1.47)mmH2O，差异无显著(P>0.05)。给予电刺激后，2组IP均呈频率依赖性增高，且感染组明显高于对照组(P<0.01)。依次给予匹罗卡品，对照组IP呈剂量依赖性降低，而感染组IP下降幅度明显低于对照组 (P<0.01)。结论:RSV感染导致气道副交感神经自身抑制性M2受体功能障碍，引起气道高反应性发生。     

钙激活Cl-通道基因疫苗对哮喘小鼠气道高反应性的预防作用

目的：探讨hCLCA1 DNA疫苗对哮喘小鼠气道高反应性（AHR）的影响。方法： 构建重组真核表达载体pSecTag-2A/hCLCA1，将其作为DNA疫苗肌注法接种给BALB/c小鼠（每2周1次），并采用间接ELISA法检测血清抗体。卵蛋白致敏法复制接种小鼠的哮喘模型。引喘5 d后，测定小鼠气道压力峰值-时间指数（APTI）和离体气管环收缩最大张力，并计数肺泡灌洗液（BALF）中嗜酸性粒细胞的数量。设接种空载体pSecTag-2A对照组、生理盐水组和正常小鼠对照组。结果： 间接ELISA法证实疫苗接种3次后，小鼠产生能结合mCLCA3胞外肽段的血清抗体，其滴度为1∶800-1∶1 000。疫苗组、空质粒组和生理盐水组的APTI、气管环收缩张力和BALF中嗜酸性粒细胞含量均明显高于正常小鼠（P<0.01）；但疫苗组的这些指标显著低于空载体组（P<0.01）。空载体组与生理盐水组结果相似。结论： 人源hCLCA1基因疫苗能诱导小鼠产生结合自身mCLCA3的交叉抗体，并因此阻断了上皮对哮喘AHR的促进作用，从而在一定程度上抑制了哮喘AHR的发生。     

肥大细胞与哮喘非特异性炎症

支气管粘膜中的肥大细胞经变应原激发后释放多种介质和细胞因子,与哮喘非特异性炎症关系密切。     

透明质酸、层粘连蛋白作为早期放射性肺损伤标志物的实验研究

目的 :探索透明质酸和层粘连蛋白对早期放射性肺损伤的诊断价值以及氟伐他汀对放射性肺损伤的治疗作用。方法 :将SD大鼠随机分为正常对照组 (C组 )、单纯照射组 (R组 )和氟伐他汀防治组 (TG组 )。TG组于照射前一周开始服氟伐他汀2 0mg·kg- 1·d- 1,直至活杀。其他组灌服等容量生理盐水。R组和TG组以直线加速器全胸部照射 ,单次剂量 2 0Gy ,于照射后5、15、3 0、60d以硫喷妥钠 40mg·kg- 1腹腔内注射。麻醉后固定 ,抽取心脏血 3ml ,分离血清。用放射免疫法测透明质酸、层粘连蛋白含量 ,统计分析用重复测量多因素方差分析和t检验。结果 :透明质酸在R组于照射后 60d较C组显著升高 (P <0 .0 1) ,TG组较R组减低 (P <0 .0 5)。层粘连蛋白在R组 3 0、60d较C组升高 (P <0 .0 5) ,TG组在相应时间减低 (P <0 .0 5)。结论 :透明质酸可作为放射性肺炎治疗情况的监测指标 ,层粘连蛋白可以作为预测纤维组织增生的一个早期指标 ;氟伐他汀对放射性肺损伤有一定的防治作用 ,用药后透明质酸、层粘连蛋白增高均受抑制     

降钙素基因相关肽对急性肺损伤兔血浆一氧化氮的影响

AIM:To examine whether calcitonin gene-related peptide (CGRP) enhances nitric oxide (NO) level in pulmonary circulation blood and observe the influence of CGRP on mean pulmonary artery pressure (mPAP) in rabbits with acute lung injury (ALI) caused by oleic acid.METHODS: The level of NO was assessed by measuring the presence of nitrite in cervical artery blood by the Griess reaction, mPAP was measured with right ventricular catheter.RESULTS:The level of nitrite in cervical artery blood was significantly increased and the mPAP was markedly reduced after administration of CGRP intravenousely.CONCLUSION:CGRP enhanced the NO level of pulmonary circulation blood and reduces the mPAP significantly in rabbits with ALI.