微卫星不稳定与Ⅱ期结直肠癌化疗的相关性探讨

FOLFOX方案[氟尿嘧啶（5-FU）、甲酰四氢叶酸（LV）加奥沙利铂]为目前Ⅲ期结肠癌术后标准辅助治疗方案,其中FOLFOX4方案的5年无病生存率达66.4%[1].而Ⅱ期结直肠癌术后是否需要辅助化疗,一直是争论的热点,至今仍未达成共识.研究表明,结直肠肿瘤的临床特征对Ⅱ期患者预后评估和化疗反应性预测作用是有限的[2].具有类似临床特征的患者对相同化疗方案的反应性不同,这很可能与肿瘤的遗传学和表观遗传学特征有关,同时也取决于个体的微环境.因此,理想的治疗方案应着眼于肿瘤和宿主的分子（基因组学和蛋白组学）特征,并结合患者的临床病理特点综合决定.目前,对肿瘤分子生物学认识的进展,提示肿瘤相关分子标记物可能更好的辨别能从辅助化疗中受益的高危群体.其中微卫星不稳定性（microsatellite instability,MSI）是目前的研究热点之一.     

肿瘤和正常组织中细胞角蛋白CK19的表达差异及其意义分析

目的:探讨细胞骨架蛋白(CK19)在不同恶性肿瘤组织及其自身对照正常组织中的表达及其意义。方法:采用逆转录聚合酶链反应酶联免疫吸附(RT—PCR—ELISA)法,检测CK19基因在79例恶性肿瘤(大肠癌、胃癌、乳腺癌、肺癌、肝癌)及其相对应的对照正常组织中的表达,并结合大肠癌患者的临床病理资料对CK19表达差异进行分析。结果:CK19基因在正常黏膜及大肠癌表达量的比值为1．638,有显著差异(P＜0．01);在正常肺组织和肺癌表达量的比值1．352,有显著差异(P＜0．05);胃癌、乳腺癌、肝癌组织的CK19的表达量与自身对照正常组织比较,差异无显著性(P＞0．05),CK19表达结合临床病理特征分析无明显差异。结论:在大肠癌、肺癌组织出现CK19的表达下调,与大肠癌、肺癌的发生发展的相关性值得进一步研究。     

含HPV16 E7的嵌合型VLPs引发细胞溶解反应

目的 探讨ＢＰＶ（牛乳头状瘤病毒）Ｌ１／ＨＰＶ（人乳头状瘤病毒）１６Ｅ７嵌合型乳头状瘤病毒样颗粒（ＶＩＰｓＸ）的免疫学特性。方法 将表达纯化的含ＢＰＶＬ１／ＨＰＶ１６Ｅ７的嵌合型ＶＬＰｓ作为抗原在体外刺激ＥＬ－４细胞并对其进行细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）反应分析。结果 嵌合型ＶＬＰｓ可引发特异的ＣＴＬ反应。Ｌ１－ＶＬＰｓ抗体能阻断这种特异性细胞溶解反应。结论 含ＢＰＶＬ１／ＨＰＶ１６Ｅ７嵌合型的Ｖ     

脉冲铜激光照射肿瘤组织的热效应研究

实验观察脉冲铜激光（５ｌ０ｎｍ）及泵浦染料激光（６３０ｎｍ），照射小鼠Ｓ１８０移植瘤体表时的瘤内温度变化。结果表明，在５５～４００ｍＷ／ｃｍ２功率密度范围，瘤内温度随功率密度的增加而上升，温升大部分发生在照射后５分钟，约１５分钟后温度达到平衡，距光源越远瘤内温度越低。６３０ｎｍ铜激光泵浦染料激光４００ｍＷ／ｃｍ２照射１５分钟，可使皮下４ｍｍ处的肿瘤组织内升温９．ｌ℃，绿光（５１０ｎｍ）的温升作用强于红光（６３０ｎｍ）。因此，应用光动力学疗法治癌时，应合理利用温度的协同效应，建议铜激光表面照射功率密度以５１０ｎｍ绿光３００ｍＷ／ｃｍ２左右，６３０ｎｍ红光３００～４００ｍＷ／ｃｍ２为宜。     

多基因单链构象多态性技术在大肠癌多基因突变联合测定中的应用

多基因单链构象多态性（ＭＳＳＣＰ）是一种与多基因聚合酶链反应（ＰＣＲ）联合应用，一次性快速测定多基因突变的方法［１］。本研究建立了测定ＡＰＣ基因突变聚集区域（ＭＣＲ）和Ｋｒａｓ第１２／１３密码子突变的ＭＳＳＣＰ技术。一、材料与方法１样本收集：收集...     

应用抑制性消减杂交技术克隆和筛选白血病多药耐药相关基因

目的 克隆和筛选白血病多药耐药（MDR）相关基因。方法 以MDR白血病细胞株K562/DOX为检测样本。以K562细胞株为驱赶样本（对照）。应用抑制性消减杂交（SSH）技术分离和克隆K562/DOX细胞中过高表达的基因。构建cDNA消减库；通过反向Northern斑点杂交法进一步筛选消减库，对阳性克隆进行序列测定和同源性分析；并采用RT-PCR和Northern blot方法对某些阳性克隆进行进一步的验证。结果 发现了11个在K562/DOX细胞中高表达的基因。包括S3核糖体蛋白（S3ribosomal protein,S3rp)基因，尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位2（NADHdehydrogenase subunit2,ND2）基因，My023基因等，其中多数基因与肿瘤MDR的关系尚未见报道。结论 筛选到几个可能与白血病MDR形成有关的基因。提示了白血病MDR发生的新机制。     

血清蛋白质谱与人工神经网络模型诊断卵巢癌的应用性研究

目的 建立筛选卵巢癌血清蛋白质谱与人工神经网络诊断模型的研究。方法 用H4(疏水表面)蛋白芯片结合表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测卵巢癌患者和健康人血清样本的蛋白质谱，同时采用人工神经网络筛选差异蛋白以建立诊断模型。结果 用SELDI-TOF-MS技术和H4蛋白芯片从47例卵巢癌和29名健康人血清中，筛选出4个有明显表达差异的蛋白，其质荷比(m／z)分别为5881、7553、6652和9391。用其中的18名健康人和29例卵巢癌患者样本作训练集和交叉验证后，再用筛选出的4个差异蛋白质建立人工神经网络预测模型。然后，对11名健康人和18例卵巢癌患者样本进行盲法测试，以验证该模型。结果显示，我们建立的诊断模型对卵巢癌检测的敏感性为100％，特异性为90．9％，阳性率为94．7％。结论 血清蛋白质谱与人工神经网络模型对小样本的卵巢癌诊断具有较高的敏感性和特异性，可扩大样本进行深入的应用性研究。     

乳头状甲状腺癌患者血清中特异性标志物的检测与鉴定

目的 探讨并鉴定乳头状甲状腺癌患者血清中肿瘤相关蛋白作为特异性标志物的可能性.方法 应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测35例乳头状甲状腺癌、40例甲状腺良性结节和34例健康对照者的血清标本,应用生物信息学方法筛选差异蛋白峰,经高效液相色谱(HPLC)分离出差异蛋白,酶解后进行液质联用串联质谱(LC-MS/MS)分析,用SEQUEST检索程序查询Bioworks数据库蛋白序列进行鉴定.结果 筛选出6个最显著的差异蛋白质,质荷比(M/Z)分别位于6651、6452、7653、7932、15 106和15 848.M/Z位于6651、6452处的蛋白质在乳头状甲状腺癌组表达低于甲状腺良性结节和健康对照组;M/Z位于7653、7932、15 106、15 848处的蛋白质在乳头状甲状腺癌组表达高于甲状腺良性结节和健康对照组,差异均有统计学意义(均P<0.01).联合6种潜在蛋白质标志物,区别乳头状甲状腺癌和非乳头状甲状腺癌的特异度为88.0%,敏感度为92.5%.bl/Z位于6651、6452、7653和15 106、7932和15 848处的蛋白标志物分别为载脂蛋白C-Ⅰ、载脂蛋白C一Ⅲ、α-珠蛋白、β-珠蛋白.结论 鉴定出的载脂蛋白C-Ⅰ、载脂蛋白C-Ⅲ、α-珠蛋白和β-珠蛋白在乳头状甲状腺癌的诊断中具有一定的价值和广泛的应用前景,值得进一步研究和探讨.     

构建血清蛋白质质谱模型判别家族性腺瘤性息肉病与散发性肠腺瘤

目的 筛选家族性腺瘤性息肉病(FAP)的特异表达蛋白,构建判别FAP与散发性肠腺瘤的血清蛋白指纹图谱诊断模型.方法 采集19例FAP和16例散发性肠腺瘤患者的血清,以表面增强激光解吸电离飞行时间质谱仪(SELDI-MS-TOF)和阴离子CM01蛋白质芯片检测并筛选两组对象间的血清差异表达蛋白质峰,以支持向量机方法构建判别模型.结果 FAP与散发性肠腺瘤相比,P<0.01的蛋白质峰有6个,其中质荷比为5640、3160、4180和4290的蛋白质峰在FAP中高表达,质荷比为3940和3400的蛋白质峰在散发性肠腺瘤患者中高表达.以质倚比分别为5640、3160和4290的蛋白质峰为基础,联合质荷比为3940、13 750和4300的蛋白质峰所建立的模型判别效果最佳,对FAP与散发性肠腺瘤的判别准确率分别为94.7%和93.7%.结论 SELDI-TOF-MS能有效筛选FAP与散发性肠腺瘤的差异表达蛋白,支持向量机方法所建立的质谱模型判别效果较好,为进一步研究FAP的分子发病机制提供了切入点.