余杭县莫家桥村马来丝虫病血清流行病学纵向观察

我所于1982～1984年在余抗县莫家桥村进行了阻断马来丝虫病传播的试点研究。该村1982年人群微丝蚴阳性率为2.04%,1983和1984年分别降为1.03%和0.29%。中华按蚊为传播丝虫病的唯一媒介,1982年幼丝虫自然感染率为2.56%,1983和1984年分别降为0.07%和0。因而认为当地于1983年达到了控制马来丝虫病传播即基本消灭丝虫病的     

血管内皮生长因子的表达与胃癌浸润和转移的关系

目的　研究血管内皮生长因子165(VEGF)mRNA在胃癌中的表达 ,探讨VEGF与胃癌浸润和转移的关系。方法　采用RT PCR方法 ,对 31例胃癌及非癌组织手术标本中VEGF165mRNA的表达进行相对定量研究。结果　胃癌组织中VEGF165mRNA表达的平均相对量 (1.12 5± 0 .35 6 )明显高于非癌组织的表达量 (0 .76 0± 0 .2 78,P <0 .0 5 ) ,其中淋巴结转移组 (1.2 19± 0 .377)和Ⅲ、Ⅳ期组 (1.2 6 2±0 .386 )分别高于无淋巴结转移组 (0 .92 7± 0 .2 0 5 )和Ⅰ、Ⅱ期组 (0 .934± 0 .194 ,P均 <0 .0 5 )。VEGF高表达者中淋巴结转移率为 83.3% ,Ⅲ和Ⅳ期占 77.8% ,均明显高于VEGF低表达者的 4 6 .2 %和 33.8%(P <0 .0 5 )。结论　胃癌组织中有VEGF的高表达 ,VEGF的表达在胃癌浸润和转移过程中发挥重要作用。     

急性非淋巴细胞白血病与HLA—DR抗原表达关系的研究

应用免疫酶标染色法检测了５７例急性非淋巴细胞白血病患者的ＨＬＡ－ＤＲ和其它细胞免疫类型，其中３８例，表达ＨＬＡ－ＤＲ抗原，表达ＨＬＡ－ＤＲ的的ＡＮＬＬ常伴有ＣＤ７的表达，而较成熟的髓系细胞表面标记ＣＤ１５则不表达，ＨＬＡ－ＤＲ＾＝的ＡＮＬＬ与ＦＡＢ亚型Ｍ１，Ｍ５ａ有密切关系。     

裸鼠腹腔输注体外扩增人脐血干/祖细胞的研究

脐血由于来源广泛 ,采集方便 ,造血干 /祖细胞丰富 ,免疫活性低等优点已成为极有潜力的造血干细胞来源而用于临床。但由于单份脐血细胞绝对数量少 ,尚不能满足成人移植的需要 ,解决成人移植的关键问题是进行有效的脐血扩增和采用合适的植入方案以改善移植效率。我们以裸鼠作模型探讨扩增后脐血造血细胞经腹腔输注在体内的植入能力。材料和方法1　脐血　来自浙江大学医学院附属妇产科医院 ,排除ＨＩＶ、ＨＢＶ、ＨＣＶ、ＣＭＶ和梅毒感染的健康足月分娩产妇 ,无菌采集 ,肝素抗凝。采集后 4ｈ内用羟乙基淀粉 (ＨＥＳ)沉降法分离单个核细胞 (Ｍ…     

ABC-ELISA检测抗班氏丝虫抗体的初步观察

<正> 国内外学者报道,将生物素-亲和素系统(BAS)引入免疫学的各种标记检测技术能提高灵敏度,改善稳定性和特异性。本文报道用ABC-ELISA(简称ABC法)检测抗丝虫抗体,并和常规ELISA(简称常规法)进行比较。     

胞嘧啶脱氨酶APOBEC3G可能通过G→A突变抑制乙型肝炎病毒的复制

目的研究胞嘧啶脱氨酶APOBEC3G(A3G)对HBV复制的影响及作用机制。方法利用脂质体介导A3G和HBV的真核表达质粒瞬时共转染人肝癌细胞株HepG2,以空载体pcDNA3.1与HBV真核表达质粒共转染为对照,同时转染含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的质粒载体以判定转染效率。共转染两天后用荧光定量PCR方法定量细胞内核壳体(core)相关HBV DNA水平,用Western blot检测细胞内A3G和HBcAg的表达,并对细胞内core相关HBV DNA X基因进行PCR扩增、T-A克隆和测序,分析X基因中的碱基突变。结果经EGFP判定的转染效率平均为29%。共转染0.5μgA3G和0.5μgHBV的HepG2细胞内core相关HBV DNA量平均下降为对照的8.9%,共转染2μgA3G和0.5μgHBV的平均下降为对照的0.6%。共转染A3G和HBV表达质粒后,HepG2细胞内HBV的X基因中发生G→A突变的数目明显增多,33个克隆中有9个克隆检测到了16～37个G→A突变,突变总数达254个,而对照的33个克隆中仅有2个克隆各检测到2个G→A突变。进一步的分析发现,共转染A3G后发生的G→A突变大多集中于几个热点区域,突变靶点常在GG二核苷酸中的第一个G上。结论胞嘧啶脱氨酶APOBEC3G可能通过诱导。HBV DNA的X基因发生G→A超突变,抑制HBV在人肝癌细胞HepG2中的复制。     

人胃癌p16/CDKN2基因蛋白质水平的异常表达

目的ｐ１６／ＣＤＫＮ２基因是新近发现的肿瘤抑制基因，已有研究表明该基因在许多肿瘤出现缺失、突变或重排．胃癌细胞系中有高频率纯合子缺失，应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和ＳＳＣＰ技术在胃癌手术标本中未发现有该基因的缺失．本文首次研究胃癌中ｐ１６／ＣＤＫＮ２基因在蛋白水平的表达．方法应用蛋白Ａ金探针免疫组化技术对３０例胃癌和２０例正常胃粘膜标本的ｐ１６进行分析．结果所有正常对照组均有ｐ１６表达，其阳性细胞百分率为７２５５％±１７２２％；而胃癌中的阳性细胞百分率为５４９０％±２８９０％，明显低于正常对照（Ｐ＜００５）．在肿瘤病例中有２３３３％（７／３０）ｐ１６表达减低，１０％（３／３０）未表达ｐ１６．此外有１例呈过度表达．结论胃癌中有ｐ１６的异常表达，免疫组化技术可能较准确地反映ｐ１６的表达，更适合于临床研究．     

P16基因在胃癌中的表达

为研究胃癌中P16基因在蛋白水平的表达,应用蛋白A金探针免疫组化技术对30例胃癌和20例正常胃粘膜标本P16进行分析。结果所有正常对照组均有P16表达,其阳性细胞百分数为72.55％±17.22％,而胃癌组为54.90％±28.90％,明显低于正常对照(t=2.100,P<0.05)。胃痛组中23.3％(7/30)P16表达减低,10％(3/30)未表达。提示胃癌中有P16的异常表达,免疫组化技术可较准确地反映P16的表达,更适合于临床研究。     

小檗胺诱导K562细胞凋亡及其与bcr/ablgene及P210表达的关系

目的:探讨小檗胺(BER)诱导K562细胞凋亡及其可能的机制。方法:以流式细胞仪(FCM)分析、电镜观察细胞微结构变化及基因组DNA电泳等方法检测细胞凋亡。以RT-PCR及Westernblot方法检测K562细胞BCR/ABLmRNA和蛋白质水平表达。结果:FCM检测见到典型的凋亡峰,8.0mg/LBER作用24-72h,随药物作用时间延长,细胞凋亡率由(29.20±3.82)%上升至(61.77±4.35)%(P＜0.01);以2.0-8.0mg/LBER作用24h,随药物浓度增加,K562细胞的凋亡率也增加。电镜下可见明确的细胞凋亡的形态学改变。DNA电泳呈现典型的梯形条带。16.0mg/LBER处理24h,K562细胞bcr/ablmRNA相对表达量及BCR/ABL融合蛋白质P210水平均明显低于对照组,分别为0.73±0.02vs1.19±0.02(P＜0.01)和0.63±0.01vs1.04±0.02(P＜0.01),呈时间-浓度依赖效应。经BER作用后,K562细胞bcr/ablmRNA表达强度与P210水平呈正相关(r=0.928,P＜0.05),且细胞凋亡率与bcr/ablmRNA表达呈负相关(r=-0.997,P＜0.01)。结论:在体外BER对K562细胞有明显的促凋亡作用,抑制bcr/ablmRNA表达及其蛋白质水平可能是其作用的重要机制之一。     

系统性红斑狼疮患者新的内源性逆转录病毒 NP9基因表达及其蛋白功能预测

目的研究新发现的人内源性逆转录病毒 NP9基因在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus, SLE)患者体内表达及其蛋白功能预测.方法逆转录PCR、T-A克隆技术和DNA序列测定分离、克隆和分析 NP9基因, 检测40例SLE患者和48名正常对照的 NP9基因表达, 借助NCBI BLAST系列分析工具及相应的基因分析软件预测其蛋白功能.结果 SLE患者组逆转录病毒 NP9基因表达阳性率为77.5%(31/40),明显高于正常对照的8.3%(4/48), P<0.01. NP9基因编码产物由74个氨基酸组成,含有多个细胞核内分布信号,其等电点(pI)为9.59,与SLE患者体内高表达的某些细胞因子具有较高同源性.结论 SLE患者存在逆转录病毒 NP9基因特异性转录, NP9表达可能与SLE发生发展相关.